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61.
血管生成抑制因子K4K5 Cdna基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达 总被引:12,自引:0,他引:12
应用PCR方法,扩增人纤溶酶原cDNA基因中K4K5 cDNA片段,与酵母表达载体pPIC9K重组,获得表达质凿p9kkk-18。该质粒转化毕赤酵母菌GS115,用G418-YPD筛选高拷贝表型,PCR筛选K4K5 cDNA与酵母染色体整全形成的阳性克隆,阳性克隆用甲醇诱导表达。表达产物r-K4K5分子量约21.5kD,占分泌总蛋白80%以上,产物浓度为150-250mg/L。初步纯化产物抑制牛毛细血管内皮(BCE)细胞增殖与鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管生成。 相似文献
62.
序列特异的三锌指多肽的构建及其在大肠杆菌中的表达 总被引:2,自引:1,他引:1
在获得单一锌指突变体的基础上,以小鼠转录因子Zif268的三锌指DNA结合区为模板,利用重叠(Over-lap)PCR技术,获得了关键氨基酸位点同时突变的三锌指突变体ZF123、2ZF123。ZF123、2ZF123分别克隆进pUC-18质粒,序列测定正确后,以pGEX-2T为表达质粒,在大肠杆菌JM109中实现了功能性的表达。经SDS-PAGE分析,表达出了分子量34.0kD的融合蛋白,扫描分析其含量在20%左右。菌体经超声波破碎后,对可溶性融合蛋白进行了纯化得到了游离的目的蛋白,为进一步的DNA结合特性分析、杂交转录因子的构建等奠定了基础。 相似文献
63.
锌指蛋白是最大的DNA结合蛋白,它能和DNA进行特异性识别,是研究蛋白—DNA相互作用的理想对象。改变锌指元件上的几个保守的氨基酸位点可设计筛选出序列特异的全新锌指蛋白,计算机在锌指蛋白设计方面的应用,使得全新的锌指蛋白识别特异性明显增强。这在基因治疗等方面,具有广阔的应用前景。 相似文献
64.
65.
松突圆蚧种群动态研究 总被引:9,自引:0,他引:9
对松突圆蚧为害时间不同的两个调查区的松突圆蚧种群动态进行调查,建立了相应的数学模型.对松突圆蚧种群的全年种群波动规律运用带时滞效应的Logistic模型进行拟合,通过内禀增长率r和时滞τ的拟合值对种群出现的周期性波动作出解释. 相似文献
66.
添加营养盐对酒精酵母发酵的影响 总被引:9,自引:0,他引:9
在以瓜干为原料的酒精生产中,选择添加适量营养盐及其复合物,能改善酵母菌生长环境,提高发酵产物酒精度,缩短发酵周期 相似文献
67.
首次报道了人肝脏血红素加氧酶的同工酶的分离纯化,并初步探讨了它们的性质,采用DEAE-SephadexA-25和羟基磷灰石柱层析法从人肝脏分离纯化HO的同工酶,酶活性检测、SDS-PAGE分析结果显示,人肝脏微粒体含量HO的同工酶,按洗脱先后顺序分别得到分子量为30000和36000的HO-1和HO-2.酶促反应中需相同辅酶参与,其中酶活性HO-1明显高于HO-2,两之比为2.4:1,从分子量和 相似文献
68.
69.
70.
用AcMNPV的gp67信号肽与慈菇蛋白酶抑制剂基因(API2)融合,并整合到昆虫病毒表达载体BmBacPAK6中,受多角体蛋白基因启动子控制。慈菇蛋白酶抑制剂在蚕体内成功地得到了高效表达。比较了gp67信号肽和慈菇蛋白酶抑制剂信号肽在昆虫表达系统中对表达产物的影响,发现表达产物都能分泌到血淋巴中,表达量很相似,但这两种信号肽在表达过程中都没有被切除,且不同信号肽对表达产物的生物活性有很大影响。 相似文献