| 序列特异的三锌指多肽的构建及其在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 张书祥,马清钧,赵志虎.序列特异的三锌指多肽的构建及其在大肠杆菌中的表达[J].生物工程学报,2001,17(4):406-409. |
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| 作者姓名： | 张书祥 马清钧 赵志虎 |
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| 作者单位： | 1. 安徽大学生命科学学院
2. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(39970162). |
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| 摘 要： | 在获得单一锌指突变体的基础上，以小鼠转录因子Zif268的三锌指DNA结合区为模板，利用重叠(Over-lap)PCR技术，获得了关键氨基酸位点同时突变的三锌指突变体ZF123、2ZF123。ZF123、2ZF123分别克隆进pUC-18质粒，序列测定正确后，以pGEX-2T为表达质粒，在大肠杆菌JM109中实现了功能性的表达。经SDS-PAGE分析，表达出了分子量34.0kD的融合蛋白，扫描分析其含量在20%左右。菌体经超声波破碎后，对可溶性融合蛋白进行了纯化得到了游离的目的蛋白，为进一步的DNA结合特性分析、杂交转录因子的构建等奠定了基础。
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| 关 键 词： | 锌指蛋白， 重叠PCR， 蛋白表达纯化 |
| 文章编号： | 1000-3061(2001)04-0406-04 |
| 修稿时间： | 2000年12月31 |
Constructing and Expression of Three Zinc-fingers Peptide with Specific DNA Recognition Property in Escherichia coli |
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| S X Zhang,Q J Ma,Z H Zhao.Constructing and Expression of Three Zinc-fingers Peptide with Specific DNA Recognition Property in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Biotechnology,2001,17(4):406-409. |
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| Authors: | S X Zhang Q J Ma Z H Zhao |
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| Institution: | Beijing Institute of Biotechnology, Beijing 100850, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | zinc-finger protein over-lap PCR protein expression and purification |
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