截短型人乳头瘤病毒58型L1蛋白的表达及其体外生物活性研究

利用PCR技术克隆截短型HPV58 L1基因并重组入杆状病毒表达系统穿梭质粒pFastBac-Htb,通过转座反应,将目的基因片段重组入杆状病毒基因组,分离重组的Bacmid DNA, 并转染Sf-9昆虫细胞,收集被转染的Sf-9细胞,提取细胞蛋白,SDS-PAGE检测可见在大约58Kda处出现一新生蛋白条带,Western blot 证实为HPV58L1蛋白。用ProBondTM纯化系统纯化所表达的蛋白。小鼠红细胞凝集试验证实纯化的蛋白可介导小鼠红细胞凝集,透射电镜观察证实纯化蛋白可自组装成VLP。结果表明昆虫杆状病毒表达系统可高效表达截短型HPV58L1蛋白,纯化后的截短型HPV58L1蛋白在体外可自组装VLP,并具有介导小鼠红细胞凝集的生物学活性。     

微重力条件下心肌细胞在聚羟基乙酸纤维支架上的三维固定化培养

以 1d龄Wistar乳鼠的心室肌组织为心肌细胞的来源 ,采用胰蛋白酶消化及细胞差速贴壁分离心肌细胞 ,以未经修饰和经鼠尾胶原溶液浸泡修饰的聚羟基乙酸 (polyglycolicacid ,PGA)纤维支架作为心肌细胞体外三维 (3D)固定化培养的支架 ,比较心肌细胞在静置培养体系及微重力培养体系下的生长、形态和收缩状况。心肌细胞在未经处理的PGA纤维支架 3D固定化培养时 ,心肌细胞在其上的分布不均匀 ,大部分心肌相互连接形成球状聚集体 ;PGA纤维支架经鼠尾胶原溶液浸泡处理后 ,心肌细胞在其上的分布较为均匀 ,细胞形态多呈梭形或不规则状 ,心肌细胞自律性搏动的幅度加大。在模拟微重力培养条件下 ,心肌细胞在经鼠尾胶原溶液浸泡修饰的PGA纤维支架上的分布更为均匀 ,心肌细胞形成具有自律性同步收缩特性、面积约为 15mm2 的类组织样 3D结构     

志贺菌福氏2a毒力大质粒DNA全序列的测定与基因分析

对志贺菌福氏2a 301株的毒力大质粒pCP301的DNA全序列进行了测定, 并进行了结构分析. 结果表明, pCP301 DNA全序列由221618个碱基对组成, 基因分析共确定了272个开放读码框架(ORF), 经过与基因数据库比较, 其中194个ORF与已知基因或编码产物具有高同源性, 61个ORF同源性较低, 其余17个为新确定的未知功能的ORF. pCP301中的基因主要包括: (ⅰ) 与细菌毒力有关的ipa-mxi-spa, osp和iph基因; (ⅱ) 与调控有关的vir基因; (ⅲ) 与质粒的维持、稳定和DNA代谢有关的mvp, stb, rep和par等基因; (ⅳ) 转座酶编码基因. pCP301中的插入序列总长68 kb, 占全序列的 30%, 提示pCP301在细菌生长与进化过程中发生了多次基因重排. 研究结果对揭示志贺菌的致病机理及大质粒的遗传与进化有重要意义.     

"没有细胞结构的微小生物--病毒"的课堂教学设计

要把科学素质教育切实落实到生物学课堂教学改革之中 ,必须使教学设计以学生的发展为本。要承认学生的主体地位并促进学生主体性的发展 ,关注学生在教学过程中所表现的积极性、能动性、创造性等主体意识 ,教学设计要最大限度地满足学生的需要和可能 ,贴近学生的生活 ,注重学生个性的养成 ,能力的培养 ,智力的发展 ,保护和鼓励学生的创造天性。在“没有细胞结构的微小生物——病毒”的教学设计中我努力体现上述改革思想 ,收到了较好的教学效果。1　创设情景 ,了解病毒与人类的关系学生以小组为单位 ,收集有关病毒与人类关系的资料 ,通过分工…     

生态系统健康评价—概念构架与指标选择

在探讨了生态系统健康概念构架的基础上,寻求对管理景观中的生态系统健康进行整体性评价的合适指标,健康的生态系统不仅在生态学意义上是健康的,并能维持健康的人类群体及有利于社会经济的发展,健康生态系统的一般特征是恢复力,多样性和生产力,建立生态系统健康评价指标的第一步是指标选择原则的确定,根据生态系统健康评价的目的和指标筛选的原则,把生态系统健康指标体系（Ecosystem Health Indicator,EHI)分为生物物理指标,生态学指标和社会经济指标。     

曲阜孔林土壤动物多样性研究

对曲阜孔林土壤动物进行了调查研究。共获标本5456只,隶属于5门11纲24目,其中优势类群3类,常见类群8类,占总捕量的95.12%.4种生境土壤动物种类组成极为相似,在垂直分布上具有明显的表聚性。在多样性分析中,H、E指标在各生境表现为杂木林>侧柏林>麻栎林>林缘草地;在整个孔林中大型土壤动物H、E远大于中小型土壤动物.     

大规模动物细胞培养的问题及对策

大规模动物细胞培养在生物技术产业化进程中显示出强大的潜力。本文综述了大规模动物细胞培养过程中出现的问题及其解决办法,包括细胞培养环境、基因工程途径改建细胞系及过程监控等。对于这些进展的充分了解对优化细胞培养工艺、提高产品质量具有重要意义     

98年长春地区肾综合征出血热病人血清学诊断及分型鉴定

吉林省原为肾综合征出血热（HFRS）野鼠型疫区,家鼠型存在较少,且长春市为低发区,可近2年来病人较多,且多为家鼠型,现已将其列为重点防治疾病。1998年对长春市双阳、新立城、九台、二道。朝阳等地区105例临床病人进行了IgM、IgG抗体测定,并用血凝抑制法（HI）及空斑减少中和试验（PRNT）平行进行了分型鉴定。经检测105例病人,Igh阳性98例,IgM阳性者83例,经分型鉴定,其中有1型2例,11型50例,其它为未定型。根据1998年我们对长春地区进行的鼠类监测情况看,鼠类带毒率较高（10．9％）,且所带毒多为11型。由于1型和11型传染…     

大规模动物细胞培养的问题及对策

大规模动物细胞培养在生物技术产业化进程中显示出强大的潜力。本文综述了大规模动物细胞培养过程中出现的问题及其解决办法 ,包括细胞培养环境、基因工程途径改建细胞系及过程监控等。对于这些进展的充分了解对优化细胞培养工艺、提高产品质量具有重要意义     

肝素对组织型纤溶酶原激活剂的作用

重组组织型纤溶酶原激活剂 ( rt PA)经肝素处理后与未经处理的 rt PA比较 ,结果显示 ,rt PA在体外的溶纤活性提高 5 0 %～ 90 % ,在兔体内的半衰期延长 1 min,同时也提高了 rt PA对热的稳定性