DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立

目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Polι)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,建立DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将带有目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,通过G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆.结果:通过G418筛选筛选出了具有G418抗性的克隆,通过RT-PCR技术检测出高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.结论:建立了高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.     

黑曲霉pepD基因阻断突变菌株的构建及功能分析

运用同源重组技术破坏了黑曲霉基因组中的pepD基因,该基因编码一种类subtilisin的胞外蛋白酶PEPD。实验以黑曲霉GICC2773基因组DNA为模板,PCR扩增pepD基因,并在此基因中间插入潮霉素抗性基因(hph)表达单元,由此产生了3.7kb的pepD阻断基因片段。将此阻断基因片段与载体pBS连接,构建成pepD基因阻断质粒pBSDH。采用原生质体-CaCl₂/PEG法将酶切阻断质粒得到的含pepD基因和hph表达单元的3.7kb线性片段转化AspergillusnigerGICC2773菌株,在含潮霉素的平板上筛选潮霉素抗性转化子,从这些抗性转化子中经PCR检测分离到到1个pepD基因阻断突变菌株?pepD66。外源漆酶分泌活性分析显示,黑曲霉pepD基因的破坏使其外源漆酶的分泌表达有所提高。     

土壤缓慢脱水对开花期小麦根系及叶片渗透调节及渗透调节物质的影响

以抗旱性不同的小麦品种为材料,在小麦的水分临界期开花期进行缓慢脱水处理,分别在脱水的不同阶段取样测定叶片及根系的渗透调节能力及渗透调节物质。结果表明：随着土壤含水量的降低,叶片与根系的饱和渗透势同步下降,表现出叶片与根系对水分胁迫反应的一致性,但根系的渗透调节能力低于叶片。根系与叶片的渗透调节物质,一方面在物质总含量方面,表现出与渗透调节能力的一致性,另一方面各种物质的相对含量又有一定差异,叶片中可溶性糖与K+的含量及增加量都高于根系,而根系中的游离氨基酸与Ca2+的相对增加量则大于叶片。     

Functional analysis of three amino acid residues of purR repressor, Trp147, Gln-218 and Gln-292 in Salmonella typhimurium

The amber mutation sites of 6 purR(am) mutants were determined by cloning and DMA sequencing. The results showed that the mutations were distributed at three different sites in PurR coding region, G721(→A), C933(→T) and C1155(→T), which respectively turn Trp-147,Gln-218 and Gln-292 of PurR into TAG terminal codon. To determine the effect of the three amino acid residues on regulatory function of PurR protein 5 different kinds of tRNA suppressor genes, Su3, Su4, Su6, Su7 and Su9 were used for creating the PurR protein variants with single amino acid substitution. The results indicated that Cys, Glu, Gly, His and Arg which substituted Trp-147 respectively all could not recover the regulation function of PurR. It confirmed that Trp-147 is a critical amino acid for the PurR function. Gln-292 substituted respectively by the same amino acids also could not recover the PurR function, demonstrating that Gln-292 is also an important amino acid residue in PurR.     

地高辛标记探针检测Vero细胞狂犬病疫苗残余Vero细胞DNA含量

地高辛标记Vero细胞DNA,并制备成DNA探针,以此探针进行点杂交,确定探针的工作浓度,特异性及灵敏度,并用此法监测Vero细胞狂犬病疫苗浓缩原液纯化工艺的Vero细胞DNA去除率,测定精制Vero细胞狂犬病疫苗成品中残余Vero细胞DNA含量,结果明显,该法特异性强,重复性好,快速简便,灵敏度高,检测值可达5pg/剂量,可用于精制ero细胞狂犬病疫苗纯化工艺的质量控制和半成品检定。     

宽纹豆芫菁Epicauta watwerhousei

宽纹豆芫菁Epicauta watwerhousei属鞘翅目,芫菁科,豆芫菁属,是豆类作物及蔬菜的食叶害虫。豆芫菁属昆虫的成虫分泌的斑蝥素,早在李时珍的《本草纲目》中已记载有起泡、利尿、壮阳等作用,近年来在中国医学上亦用于治疗某些癌症。 摄影买国庆 （中国科学院动物研究所）     

纯净水对健康影响的定性循证研究

目的：检索国内外相关文献，综合分析饮用纯净水对于人体健康的影响，为科学饮水提出建议。方法：在PubMed、Embase、Medline、Cochrane、中国生物医学文献服务系统、中国知网和万方数据知识服务平台等7个数据库检索自1998年1月-2020年1月国内外公开发表的相关研究文献，纳入以人为研究对象的研究，排除重复、不完整、无法获得全文的文献等。语种限定为中文和英文。结果：从5 277篇文献中筛选出14篇纳入本研究的分析，其中2篇系统综述、3项实验性研究、1项横断面研究证明饮用纯净水与心血管疾病风险呈正相关；1项系统综述、1项横断面研究、1项实验性研究证明饮用纯净水与骨健康呈负相关；1项横断面研究、3项纵向研究、1项实验性研究证明饮用纯净水与尿路结石呈负相关。结论：选择纯净水或矿物质水应当根据自身情况。对于膳食中缺乏矿物质的人群，日常饮水时不推荐饮用纯净水。而针对泌尿系结石的患者，纯净水可能有一定保护作用。     

互花米草浸提液对中肋骨条藻的化感效应

以互花米草凋落物为化感供体材料,研究不同浓度的互花米草凋落物浸提液(0、0.02、0.04和0.10 mg·L~(-1))对中肋骨条藻生长及生理生化特征的化感效应,分离鉴定互花米草浸提液中的抑藻化感物质成分。结果表明:互花米草凋落物浸提液对中肋骨条藻生长的抑制作用随着浸提液质量浓度的增大而增强,当质量浓度为0.10 mg·L~(-1)时,互花米草凋落物浸提液对中肋骨条藻的抑制率达到69.2%;各实验处理组的中肋骨条藻细胞内的叶绿素a含量和抗氧化酶活性均低于对照组,而丙二醛的含量高于对照组;对互花米草凋落物浸提液进行抑藻化感物质的分离鉴定,其化感物质主要为长链脂肪酸,主要成分为十六烷酸、亚油酸、油酸。     

慢性肾功能不全对中老年非瓣膜性房颤患者全因死亡、心脑血管疾病死亡及血栓终点事件的影响

目的：探讨中老年非瓣膜性房颤患者全因死亡、心脑血管疾病死亡及血栓终点事件的危险因素及慢性肾功能不全是否为其独立危险因素。方法：纳入未应用抗凝药物的中老年非瓣膜性房颤患者825例,平均年龄为76.52±11.80岁,其中女性占18.91%,75岁以上患者占64.73%,记录基线特征及各终点事件发生情况。通过Cox生存分析,探讨肾功能不全对各终点事件的影响。结果：入选患者中位数随访时间为33.5个月,随访期间发生全因死亡209例、心脑血管疾病死亡61例及血栓终点事件139例。合并慢性肾功能不全的房颤患者各终点事件发生率均显著高于对照组,在校正CHA₂DS₂-VASc评分危险因素及其他传统危险因素后,慢性肾功能不全仍是全因死亡、心脑血管疾病死亡及血栓终点事件的独立危险因素。结论：慢性肾功能不全是未服用抗凝药物的中老年非瓣膜性房颤患者全因死亡、心脑血管疾病死亡及发生血栓事件的独立危险因素之一。     

固定对免疫组织化学反应的影响

为在组织固定过程中最大程度地减少固定剂对抗原性和组织结构的破坏,使免疫组织化学反应清晰可靠,我们观察研究了１０％中性缓冲福尔马林（ＮＢＦ）、酒精－甲醛（ＡＦ）、甲醛钙（Ｆｃａ）、Ｃａｒｎｏｙ氏液、Ｂｏｕｉｎ氏液、Ｋａｒｎｏｖｓｋｙ氏液和Ｈｅｌｙ氏液,分别对ＡＢＣ法显示基底膜Ⅳ型胶原,ＳＰ法显示血管内皮第Ⅷ因子和小肠固有层浆细胞的影响。结果表明用同一免疫组织化学方法显示不同固定剂固定的同一抗原物质可出现明显差异。本文还简要阐述了有关固定剂的作用机理与免疫组织化学染色的相关性。为观察研究组织和细胞的某种或某些抗原物质,而准确选择适当固定剂提供了一定依据