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1.
目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Polι)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,建立DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将带有目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,通过G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆.结果:通过G418筛选筛选出了具有G418抗性的克隆,通过RT-PCR技术检测出高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.结论:建立了高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.  相似文献   
2.
1)生、熟,河、海虾壳;生、熟,河、海蟹壳,除去残留肉质及污物,用水洗净、晾干;2)盐酸(工业级或化学纯);3)氢氧化钠(化学纯);4)冰醋酸(分析纯或化学纯);5)乙醇(化学纯);6)一氯乙酸(化学纯)。  相似文献   
3.
Polι与移行细胞癌发生关系的实验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:检测DNA聚合酶■(Pol■)在膀胱肿瘤细胞株及移行细胞癌组织中的表达,探讨Pol■在移行细胞癌组织中表达的意义。方法:培养膀胱肿瘤细胞株BIU87细胞、T24细胞株,利用RT-PCR方法检测Pol■在膀胱肿瘤细胞株中的表达;收集人膀胱粘膜正常组织、临床膀胱肿瘤和肾盂癌的移行细胞癌组织标本,利用RT-PCR方法检测组织标本中Pol■的表达。结果:Pol■在膀胱肿瘤细胞株中丰富表达,显著高于膀胱正常粘膜组织(P<0.01);Pol■在膀胱肿瘤及肾盂癌组织的表达显著高于膀胱正常粘膜组织的表达(P<0.01),且与移行细胞癌的分级相关。结论:Pol■在移行细胞癌组织中的高表达可能与膀胱肿瘤的发生、发展相关,为进一步研究Pol■在膀胱肿瘤中表达的意义打下基础。  相似文献   
4.
秤锤树的组织培养和快速繁殖   总被引:6,自引:0,他引:6  
1植物名称秤锤树(Sinojackia xylocarpa). 2培养材料当年生枝条的腋芽或茎尖. 3培养条件芽萌动启动培养基:(1)改良的MS(除钙盐外,其余大量元素用MS的3/4量) 6-BA 1.5mg·L-1(单位下同) TDZ 0.05 IBA 0.1;(2)改良的MS 6-BA 1.0 TDZ 0.05 IBA 0.1.分化培养基:(3)改良的MS 6-BA 1.0 TDZ 0.05 IBA 0.05;(4)改良的MS 6-BA 0.5 TDZ 0.05 IBA 0.05;(5)改良的MS 6-BA 0.5 TDZ 0.05 IBA 0.1.生根培养基:(6)1/2MS IBA 0.3;(7)1/2MS IBA 0.5;(8)1/2MS IBA 1.0;(9)1/2MS IBA 0.3 NAA 0.5;(10)1/2MS IBA 0.5 NAA 0.3.以上培养基含3%食用白糖(其中生根培养基加2%食用白糖)、0.7%卡拉胶,pH 5.8~6.0.培养温度25~28℃,光照时间12 h·d-1,光照度2 000 lx.  相似文献   
5.
目的:构建重组人PCNA突变体(mutant PCNA,mPCNA)的真核表达质粒,并建立稳定高表达该目的蛋白的宫颈癌细胞系Hela.为进一步研究PCNA在DNA损伤修复中重要的生物学功能奠定基础.方法:将舍有定点突变的PCNA cDNA序列克隆到T载体中,然后再亚克隆到真核表达栽体pCDNA3.1/V5-His A上,构建真核表达载体质粒pCDNA3.1/V5-His A-mPCNA,稳定转染到Hela细胞中;Western Blotting法检测蛋白的表达情况;白细胞记数法测定细胞的生长速率.结果:真核表达质粒pCDNA3.1/V5-His A-mPCNA经酶切、测序分析与实验设计的序列完全一致;稳定建系后,Western Blotting结果显示在相应位置可见清楚的目的条带;稳定高表达mPCNA的细胞系与野生型细胞相比两者的生长速率基本一致.结论:成功构建了真核表达质粒pCDNA3.1/V5-His A-mPCNA;建立了稳定高表达该突变体的Hela细胞系;PCNA突变体的高表达不影响Hela细胞的正常生长.  相似文献   
6.
目的探讨螺旋CT在急性肠梗阻的诊断中的作用。方法 65例明确诊断的急性肠梗阻病例,回顾性分析其CT表现。结果 65例肠梗阻,其中完全性22例,不完全性43例;绞窄性为4例;肠肿瘤22例,肠扭转16例,腹内外疝5例。CT显示梗阻点位于小肠31例,结肠23例,小肠结肠均有11例;梗阻近段肠腔扩张,而远端肠腔萎陷;扩张的肠腔内可见气液平。靶征、鸟嘴征、缆绳征等具有诊断价值。增强后梗阻段肠壁异常强化。结论螺旋CT可以判断有无急性肠梗阻、梗阻部位、梗阻病因以及是否绞窄,是诊断急性肠梗阻的最重要的方法之一。  相似文献   
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