| DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立 |
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| 引用本文： | 周虎传,杨劲,曾益军,位全芳,何凤田,赵谦,李劲,刘洋,李杰.DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立[J].现代生物医学进展,2008,8(7):1267-1269. |
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| 作者姓名： | 周虎传 杨劲 曾益军 位全芳 何凤田 赵谦 李劲 刘洋 李杰 |
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| 作者单位： | 1. 第三军医大学基础部生化与分子生物学教研室,重庆,400038
2. 第三军医大学西南医院全军泌尿外科研究所,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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解放军医学科研项目 |
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| 摘 要： | 目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Polι)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,建立DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将带有目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,通过G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆.结果:通过G418筛选筛选出了具有G418抗性的克隆,通过RT-PCR技术检测出高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.结论:建立了高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系.为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | DNA聚合酶iota HEK-293细胞 DNA损伤 DNA修复. 聚合酶链式反应 iota 细胞系 表达克隆 体系 cell DNA polymerase stable 结果 技术检测 逆转录 提取 一步法 抗性 筛选 脂质体 方法 生物学功能 损伤修复 研究 |
| 文章编号： | 1673-6273(2008)07-1267-03 |
| 修稿时间： | 2008年2月10日 |
Establishment of stable over-expression of DNA polymerase iota in HEK-293 cell |
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| ZHOU Hu-chuan,YANG Jin,ZENG Yi-jun,WEI Quan-fang,HE Feng-tian,ZHAO Qian,LI Jin,LIU Yang,LI Jie.Establishment of stable over-expression of DNA polymerase iota in HEK-293 cell[J].Progress in Modern Biomedicine,2008,8(7):1267-1269. |
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| Authors: | ZHOU Hu-chuan YANG Jin ZENG Yi-jun WEI Quan-fang HE Feng-tian ZHAO Qian LI Jin LIU Yang LI Jie |
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