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相似文献
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1.
日本血吸虫26kD抗原基因在BCG中的表达   总被引:5,自引:0,他引:5  
研究了外源基因日本血吸虫26kD抗原(Sj26GST)在卡介苗(bacilusCalmete-Guerin,BCG)、耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)和大肠杆菌(E.coli)中的表达.运用重组DNA和聚合酶链反应(PCR)等分子生物学技术,以表达Sj26GST的E.colipGEX衍生质粒为模板,经PCR得到编码Sj26GST的全长cDNA片段.将其按正确的阅读框顺序,克隆到人结核杆菌热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70的启动子下游,再将HSP70启动子和Sj26GST基因一起亚克隆到E.coli-分枝杆菌穿梭质粒pBCG-2000中,得到E.coli-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG-Sj26.pBCG-Sj26电转化入BCG和M.smegmatismc2155中表达Sj26GST抗原,所表达的天然重组Sj26GST(rSj26GST)为可溶性蛋白,在SDS-PAGE上分子量为26kD处可见明显的表达蛋白带.其表达量分别占BCG和M.smegmatis菌体总蛋白的15%和10%.可见,Sj26GST基因能在BCG中高效表达.  相似文献   

2.
南方鲇碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质的研究   总被引:13,自引:0,他引:13  
用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀,DEAE-纤维素和Sephacryl S-200柱层析,从南方鲇(Silurus meridionalis Chen)肠粘膜中提取出碱性磷酸酶(AKP)。提纯倍数为39.50倍,比活为68.35μ/mg蛋白,提取酶液经PAGE和SDS-PAGE只呈现一条区带。该酶的分子量为132 140,N末端氨基酸为门冬氨酸,最适pH为10.10,7.5>pH>11.5时不稳定,最  相似文献   

3.
系统感染TMV (tobacco m osaic virus)的番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)叶胞外蛋白提取液经冰冻干燥浓缩、- 20℃丙酮沉淀、CM-Sephadex C-25离子交换层析、DEAE-Sephadex A-25离子交换层析和Sephadex G-75凝胶层析纯化,获得PAGE均一的β-1,3-葡聚糖酶.SDS-PAGE证明,它包含分子量为36 kD 和27 kD的两个同工酶.以昆布多糖为底物,酶的最适pH 在4.8—5.2之间,在pH 4—8稳定;酶的最适温度在30—40℃之间,在40℃保温1h 后酶活性不变;Km 值为9.2 m g/m L.在系统感染TMV 的番茄叶胞外蛋白提取液中,有分子量为22 kD、27 kD和36 kD的3个β-1,3-葡聚糖酶同工酶  相似文献   

4.
TWONEWSPECIESFROMTRICHOSANTHES(CUCURBITACEAE)YuehChun-hsiHuangLu-qiChengChing-yung〔ABTRACT〕TrichosanthesreferactaYuehetL.Q.H...  相似文献   

5.
豆薯(Pachyrrhizuserosus)种子经磷酸盐缓冲液抽提,S-SepharoseFastFlow柱,DE-52纤维素柱和SephadexG-75柱层析,提取出两种高纯度的蛋白成分,命名为PachyrinⅠ和Ⅱ.SDS-PAGE测得其分子量分别为33kD和14.5kD,但HPLC分子筛的结果显示PachyrinⅡ的分子量为28kD,无论在还原条件下,还是在非还原条件下,PachyrinⅡ电泳的结果都完全相同,表明该蛋白的亚基不是以二硫键相连。两种蛋白的等电点分别为4.5和6.5.用酸解法测定了它们的氨基酸组成。在无细胞体系中,它们对蛋白合成有较弱的抑制活性,显示它们可能是核糖体失活蛋白(RIPs)家族中的新成员。  相似文献   

6.
柞蚕林生物生产力和干物质转化研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
柞蚕林生物生产力和干物质转化研究温达志,杨思河(中国科学院华南植物研究所,广州510650)(中国科学院沈阳应用生态研究所,110015)姜波(辽宁省蚕业科学研究所,凤城118101)BioproductivityandDryMatterTransferofTussah-FeedingOakForest¥WenDazhi(SouthChinaInsti-tuteofBotany,AcademiaSinica,Guangzhou510650),YangSihe(InstituteofAppliedEcology,A-cademiaSinica,Shenyang110015),JiangBo(InstituteofSericulturalScience,Fengcheng,LiaoningProvince113100).ChineseJournalofEcology,1993,12(1):5-10.ThepresentstudydealswiththebioproductivityanddrymattertransferofChineseTussah-feedingoakforestinhillyareaofe  相似文献   

7.
豆薯种子中两种蛋白质的分离纯化及其性质研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
豆薯(Pachyrrhizuserosus)种子经磷酸盐缓冲液抽提,S-SepharoseFastFlow柱,DE-52纤维素柱和SephadexG-75柱层析,提取出两种高纯度的蛋白成分,命名为PachyrinI和II,SDS-PAGE测得其分子量分别为33kD和14.5kD,但HPLC分子筛的结果显示PachyrinⅡ的分子量为28kD,无论在还原条件下,还是在非还原条件下,PachyrinI  相似文献   

8.
沈阳市东陵区景观生态潜力研究   总被引:6,自引:1,他引:5  
沈阳市东陵区景观生态潜力研究赵羿,吴彦明(中国科学院沈阳应用生态研究所,110015)邓百祥(辽宁省水利水电勘测设计研究院,沈阳110006)EcologicalPotentialofLaudscapeinDonglingDistrictofShenyang¥ZhaoYi;WuYanming(InstituteofAppliedEcology,AcademiaSinica,Shenyang110015),DengBaixiang(LiaoningAcademyofWaterCon-servancyandWaterPowerSureeyingandDesigning,Shenyang110006).ChineseJournalofEcology,1993,12(5):1-8。Ecologicalpotentialoflaudscapeconsistsofitsproductivepotential,ecologicalpotentialandpricelesspo-tential.Throughcalculatingdifferentproductivepotentials(photosyntheticpot  相似文献   

9.
用一株基因工程菌E.coli2426/pMN表达了麦芽糖结合蛋白-人神经生长因子融合蛋白.菌体超声破碎后,上清液经直链淀粉亲和柱一步即可获SDS-PAGE纯融合蛋白(55kD),为麦芽糖结合蛋白(42kD)与人神经生长因子(13kD)的络合物,产率约10%.产物用鸡胚背根神经节检测生物活性,1BU不大于10ng,与小鼠颌下腺β神经生长因子具有类似生物活性  相似文献   

10.
通过有机试剂抽提,CF-11纤维素柱层析,从感染水稻齿叶矮缩病毒菲律宾分离株(RiceRaggedStuntVirus,Philippineisolate,简称RRSV-P)的水稻植株中获取该病毒的全基因组,即获得从Segment1到Segment10(S1-S10)的10条双链RNA(dsRNA),然后设计合适的引物,用RT-PCR方法得到S9的cDNA并将其克隆到pUC119质粒上扩增,以双链测序法测定该cDNA的全序列。同时又将此cDNA克隆到大肠杆菌表达质粒pGEX-3X上,在大肠杆菌菌株DE3中用IPTG诱导表达,经超声波破菌、离心、Glutathione-sepharose4B亲和层析,得到纯化的分子量为64kD的融合蛋白。  相似文献   

11.
经DEAE-Sephacel、UltrogelAcA 34、Heptylam ine-Sepharose 和Bio Scale Q2等四步层析从牛脑皮层膜中同时纯化出抑制型G 蛋白(inhibitory G protein, Gi)和O型G蛋白(other G pro-tein, Go).对Go 的选择性激活使Gi 和Go 的分离大为简化,并使二者的大量制备成为可能.纯化的G 蛋白的SDS-PAGE银染显示单一蛋白带,其结合[35S]GTPγS的活性分别提高68倍和124倍.用圆二色光谱法(CD)测量了纯化的G蛋白的二级结构.  相似文献   

12.
地衣芽孢杆菌1Baciuus Licheniformis)BL-306产生的胞外β-甘露聚糖酶经硫酸铵分级盐析,DEAE-纤维素柱层析。Sephadex-G100柱凝胶过滤和DEAE-纤维素柱再层析分离纯化,得到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)均一样品。用SDS-PAGE测得纯化后β-甘露聚糖酶分子量为26000道尔顿。用凝胶等电聚焦电泳(PAGEIEF)测得等电点PI为5.0。该酶  相似文献   

13.
用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀,DEAE-纤维素和SephacrylS-200柱层析,从南方鲇(Silurus meridionalis Chen)肠粘膜中提取出碱性磷酸酶(AKP)。提纯倍数为39.50倍,比活为68.35μ/mg蛋白,提取酶液经PAGE和SDS-PAGE只呈现一条区带。该酶的分子量为132140,N末端氨基酸为门冬氨酸,最适pH为10.10,7.5>pH>11.5时不稳定,最适温度为40℃左右,对热不很稳定,以磷酸苯二钠为底物其K_m值为1.72×10~(-3)mol/L。Mg~(2+)、Mn~(2+)为该酶的激活剂,KH_2PO_4、L-CyS、ME、DFP、EDTA-Na_2为抑制剂。选用KH_2PO_4和DFP作抑制类型的判断,结果表明,KH_2PO_4属竞争性掏剂,其抑制常数为2.3mmol/L;DFP为非竞争性抑制剂,抑制常数为1.05mmol/L。  相似文献   

14.
丝瓜(Luffacylindrica)种籽,经捣碎、抽提、硫酸铵分级沉淀,CM-52离子交换层析,Sephacry1S-100分子筛,阳离子交换FPLC等步骤,分离到两种单链蛋白质生物合成抑制蛋白:Luffin-A和Luffin-B。它们都是等电点接近10的碱性蛋白,SDS-PAGE测定分子量分别约为27kd和28kd,氨基酸组成分析表明两者具很大同源性,但免疫双扩散及ELISA检测证明两者的免疫原性有差异。Luffins对兔网织红细胞裂解液的蛋白质生物合成有强烈的抑制作用,IC50分别为1.4×10-11mol/L和2.0×10-11mol/L,比TCS的2.9×10-10mol/L低得多。因而,Luffins很有可能成为肿瘤导向药物的高效"弹头"。  相似文献   

15.
从皖南尖吻蝮蛇(Agkistrodonacutus)毒液中经DEAE-Sepharose和SephacrylS-200两步凝胶柱层析首次纯化出一种中分子量出血毒素(简称AaHⅣ).经SDS-PAGE和等电聚焦凝胶电泳测定其分子量为44kD,等电点为pH5.0.从500mg粗毒中可获得20mgAaHⅣ纯品.AaHⅣ有较强的出血活性,最小出血剂量(MHD)为0.4μg.  相似文献   

16.
鲁西北平原高产夏玉米生育模式董振国,鲁全国(中国科学院地理研究所,北京100101)DevelopmentMOdelofHighYieldingSummerCornonNortbwestSkandongPlain¥DongZhenguo;LuQuanguo(InstituteofGeography,ChineseAcademyofSciences,Beijing100101),ChineseJournalofE-colegy,1993,12(2):69-72.Erectandplanevarietiesofcornhavealeafinclinationof65°and50°andtheiroptimumplantingdensitiesare75000-82000and52500-60000stems·ha ̄(-1).Theleafareaindexatearsproutingstageandleafareaday(LAD)fortheformerarerespectively5.5-6.0and360-400,whilethoseforthelatterare3.5-4.0and260-300.TheL  相似文献   

17.
枯草芽孢杆菌中性内切β-甘露聚糖酶的纯化及性质   总被引:14,自引:0,他引:14  
三草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BM9602产生的中性内切β-甘露聚糖酶(endo-β-1,4-D-mannan mannanohydrolaes,EC,3.2.1.78)经硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素(DE22)离子交换柱层析,得到电泳纯的样品,提纯了45.5倍,收率为5.9%。用SDS-PAGE测得该酶的分子量为35kD。用PAGEIEF测得其等电点pⅠ为4.5。酶反应的  相似文献   

18.
洞庭湖滨湖湿地平原农村生态工程初步研究严斧,游有林,刘劲凡,卢源德,周为民(中国科学院生态环境研究中心系统生态室沅江课题组,大庸市416600)RuralEcologicalEngineeringonWetlandPlainofDongtingLakeside¥.YanFu;YouYoulin;LiuJinfan;LuYuande;ZhouWeimin(YuanjiangResearchGroup,ResearchCenterforEco-environmentalScience,A-cademiaSinica,Dayong416600).ChineseJournalofEcology,1993,12(2):45—48.AccordingtothemaintypesofresourcecombinationsonwetlandplainofDongtinglakeside,severaleco-logicalengineeringsincludinglakesidereed-forest,lowlandrice-fish-ramie,rnanure-forage-fuel,fish-pig-duckandf  相似文献   

19.
L—山梨糖脱氢酶的纯化及性质的研究   总被引:12,自引:2,他引:10  
从5L罐发酵L-山梨糖的Gluconibacter oxydans SCB329和Bacillus thuringiensis SCB933混合菌株中差速离心收集SCB329菌体,破碎,离心获得无细胞抽提液,硫酸铵分级沉淀蛋白后依次经DEAE Cellulose 52和Q Sepharose FF柱层析分得到了L-册梨糖脱氢酶(SDH),它能将L-册梨糖脱氢氧化为L-册梨酮,SDS-PAGE电泳测  相似文献   

20.
利用APAGE,荧光原位杂交技术和RFLP标记,对导入黑麦(SecalecerealeL.)多小穗等性状创制的小麦新种质10-A进行了分子标记检测,APAGE分析发现,10-A与其他1RS/1BL易位系一样,含有1RS的醇溶蛋白标记位点Gld1B3。以黑麦基因组总DNA作探针,用中国春(Triticumaestiumcv.ChineseSpring)基因组DNA作封阻,与10-A根尖细胞有丝分裂染  相似文献   

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