水稻齿叶矮缩病毒Segment 9 dsRNA的序列分析及其在大肠杆菌DE3中的…

通过有机试剂抽提,ＣＦ－１１纤维素柱层析,从感染水稻齿叶矮缩病毒菲律宾分离株（ＲＲＳＶ－Ｐ）的水稻植株中获取该病毒的全基因组,即获得从Ｓｅｇｍｅｎｔ １到Ｓｅｇｍｅｎｔ １０（Ｓ１－Ｓ１０）的１０条双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）,然后设计合适的引物,用ＲＴ－ＰＣＲ方法得到Ｓ９的ｃＤＮＡ并将其克隆到ｐＵＣ１１９质粒上扩增,以双链测序法测定该ｃＤＮＡ的全序列。同时又将此ｃＤＮＡ克隆到大肠杆菌表达质粒ｐＧＥＸ     

水稻齿叶矮缩病毒Segment 9 dsRNA的序列分析及其在大肠杆菌DE3中的表达

通过有机试剂抽提,ＣＦ－１１纤维素柱层析,从感染水稻齿叶矮缩病毒菲律宾分离株（ＲｉｃｅＲａｇｇｅｄＳｔｕｎｔＶｉｒｕｓ,Ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｉｓｏｌａｔｅ,简称ＲＲＳＶ－Ｐ）的水稻植株中获取该病毒的全基因组,即获得从Ｓｅｇｍｅｎｔ１到Ｓｅｇｍｅｎｔ１０（Ｓ１－Ｓ１０）的１０条双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）,然后设计合适的引物,用ＲＴ－ＰＣＲ方法得到Ｓ９的ｃＤＮＡ并将其克隆到ｐＵＣ１１９质粒上扩增,以双链测序法测定该ｃＤＮＡ的全序列。同时又将此ｃＤＮＡ克隆到大肠杆菌表达质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ上,在大肠杆菌菌株ＤＥ３中用ＩＰＴＧ诱导表达,经超声波破菌、离心、Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析,得到纯化的分子量为６４ｋＤ的融合蛋白。     

植物转基因方法及进展

本文从技术原理和方法进展着手,着重在土壤农杆菌系统、植物病毒系统和DNA直接导入法中阐述了植物转基因载体的选择和构建;以及各种方法的适用范围、应用上的例子和进展,并且比较了相互的优缺点。另外,本文还探讨了转导入植物细胞的外源基因的组织方式及其转录表达效率。     

水稻齿裂矮缩病毒PS9蛋白的定位及在昆虫传毒中的功能

利用大肠杆菌融合表达系统表达并纯化水稻齿裂矮缩病毒（ＲＲＳＶ）Ｓ９编码蛋白ＰＳ９。以ＰＳ９的融合蛋白的抗体为一抗，胶体金标记的ｐｒｏｔｅｉｎＡ为二抗，进行ＰＳ９在ＲＲＳＶ病毒颗粒上的免疫标记和定位，从而证明ＰＳ９是病毒突起的一个组分。病毒媒介昆虫—褐飞虱的传毒实验结果表明ＰＳ９可以抑制昆虫的传毒作用，提出在病毒颗粒进入昆虫细胞时，可能需要ＰＳ９与细胞表面的病毒受体的结合和作用。     

水稻齿裂缩病毒PS9蛋白的定位及在昆虫传毒中的功能

利用大肠杆菌融合表达系统表达并纯化水稻齿裂矮缩病毒（ＲＲＳＶ）Ｓ９编码蛋白ＰＳ９。以ＰＳ９的融合蛋白的抗体为一抗,胶体金标记的ｐｒｏｔｅｉｎＡ为二抗,进行ＰＳ９在ＲＲＳＶ病毒颗粒上的免疫标记和定位,从而证明ＰＳ９是病毒突起的一个组分。病毒媒介昆虫一褐飞虱的传毒实验结果表明ＰＳ９可以抑制昆虫的传毒作用,提出在病毒颗粒进行入昆虫细胞时,可能需要ＰＳ９与细胞表面的病毒受体的结合和作用。     

豚鼠生长激素受体cDNA的克隆

报道了豚鼠肝生长激素受体（ＧＨＲ）的ｃＲＮＡ克隆和编码区序列。它由１８９９ｂｐ组成,编码６１０个氨基酸。此外,还报道豚鼠ＧＨＲ的结构特征和同源性比较的结果。