三倍体虹鳟性转换及性腺发育的研究

用高温刺激法获得三倍体虹鳟幼鱼。从开始投饵起,分别投喂含有不同浓度17β-雌二醇(0～60μg/μg)的饵料,持续60天,获得了93%～100%的高三倍体雌性率(对照组的雌性率为52%)。三倍体雄鱼可观察到其精子形成,但性腺成熟度较相对的二倍体差;三倍体雌鱼的生殖细胞多停留在偶线期到粗线期,未发现有性成熟个体。实验结果推测,三倍体虹鳟雌鱼的不育现象看来不是由于雌雄基因组的组成差异而致,更可能是由于三组染色体造成对虹鳟卵巢发育更大的阻力。雌二醇处理对三倍体虹鳟幼鱼的生长和成活没有明显的影响。     

白鲫（♀）×红鲫（♂）异源四倍体鱼的倍性操作及其生殖力的研究

采用热休克调控技术诱导出103尾第一代白鲫（♀）×红鲫（）异源四倍体鱼,并对其生殖力进行了研究。1或2龄的四倍体雄鱼能产生精子,而雌鱼不能产生正常的卵。将异源四倍体雄鱼与二倍体白鲫雌鱼交配产生倍间三倍体鱼,染色体检查证明是整三倍体（3N＝150）,但其受精率很低（11．4—51．3％,平均32．4％）．网箱养殖结果表明,倍间三倍体白鲫的生长速度比白鲫快30％以上,雌雄均不育．并用冷休克处理回收异源四倍体4N（）×白鲫2N（♀）受精卵的第二极体产生了新的四倍体鱼．文中还对第一代异源四倍体鱼的批量生产、生殖能力以及异源三倍体鱼的生产应用进行了讨论．     

大阪鲫鱼（Carassius Auratus cuvieri Temminck et．Schlegel）雌性特异血清蛋白生化特性及免疫细胞化学定位的研究

雌性特异血清蛋白存在于成熟雌性大阪鲫鱼血清中,雄鱼则无。注射雌二醇可诱导雄鱼及成熟雌鱼合成这种蛋白质并引起鱼肝细胞粗面内质网增加,糖元颗粒减少。从诱导的大阪鲫鱼血清中分离出电泳纯的雌性特异血清蛋白的分子量为４６６０００±４０００（ｎ＝１０）,电泳谱带有３条,用纯的雌性特异血海蛋白制备的兔抗鱼抗血清不与雄鱼血清发生免疫反应,而与正常成熟雌鱼及诱导鱼的血清形成１条免疫沉淀线。免疫细胞化学定位诱导及成熟雌鱼的肝细胞核外细胞质有阳性颗粒,在卵母细胞外围有成团的阳性颗粒分布。     

水产厅将审议5项染色体操作的鱼贝类和放流试验

水产厅将于7月22日召开第二届水产高技术研讨会,重新审议5项染色体操作的鱼贝类的利用问题。水产高技术研讨会是为听取专家意见而召开的。水产厅规定确认了利用适合染色体操作鱼贝类的“三倍体鱼类水产生物利用纲领”。 这次审议的有鸟取水产试验场的雌性比目鱼等5项(参照表)。其中引人注目的是广岛水产试验场培育的3倍体牡蛎的种苗生产、养殖和北海道立水产孵化场的全雌3倍体樱鳟的种苗生产、养殖以及放流试验。     

催产时黄鳝性类固醇激素含量变化的研究

本文首次报道哺乳动物促黄体生成素释放激素类似物（ＬＨＲＨ－Ａ）诱导黄鳝排卵过程中,血浆雌二醇（Ｅ２）、孕酮（Ｐ）和睾酮（Ｔ）含量变化的规律。根据１７２尾黄鳝血样放射免疫测定结果,试验组雌鱼于排卵前相继出现Ｅ２和Ｐ浓度高峰（Ｐ〈０．０１）;雄鱼于催产后２４ｈ出现Ｔ浓度峰值（Ｐ〈０．０１）;试验组雌鱼的Ｔ含量与对照组无显著差异（Ｐ〉０．０５）。在对照组,雄鱼的Ｅ２和Ｐ浓度及雄鱼的Ｔ含量差异不显著（Ｐ〉     

虎纹蛙促性腺激素释放激素分泌调节的离体研究

利用离体静态孵育系统和放射免疫测定法,研究了性成熟的虎纹蛙雌蛙离体的视前－下丘脑－正中隆起（P－H－ME）片段促性腺激素释放激素（GnRH)的分泌调节。结果表明：γ－氨基丁酸（GABA）对成熟前期蛙离体P－H－ME片段的哺乳类GnRH（mGnRH)的释放有显著的刺激作用;随着GABA作用浓度的增加,刺激作用逐渐增强。100μmol/L的多巴胺（DA）及1μmol/L和10μmol/L的雌二醇(E2）则显著抑制鸡ⅡGnRH(cGnRH-Ⅱ)的释放。10μmol/L和100μmol/L的睾酮（T）以及10μmol/L的E2显著刺激冬眠期蛙P－H－ME片段mGnRH的释放。这些结果表明,GABA,DA及E2和T对虎蚊蛙GnRH的释放有直接的调节作用。     

17β-雌二醇诱导斑点叉尾鮰雌性化研究

研究以人工配合饲料为17β-雌二醇(17β-estradiol, 17β-E₂)载体, 对斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)开口仔鱼连续饲喂27d进行雌性性别诱导, 探究斑点叉尾鮰XY雄鱼雌性化的合适17β-E₂剂量。60日龄测量并统计各组试验鱼的生长数据、存活率, 解剖观察性腺结构, 结合遗传性别鉴定结果计算性逆转率, 并通过组织切片分析各组试验鱼中XX和XY雌鱼卵巢发育情况。270日龄检测XY雌鱼和对照组雌鱼的鳃、心脏、肝脏、肾脏、卵巢和肌肉等组织中17β-E₂含量。研究进一步地采用qRT-PCR检测270日龄雌雄性别分化基因foxl2和dmrt1在XX和XY雌鱼卵巢中的表达水平。结果显示: 各组XY雌鱼的比例和卵母细胞数量均随17β-E₂剂量的提高而增加, 且核仁数量也随之增多, 而核质比相应减小; 各组XY雌鱼的体重和体长随着17β-E₂剂量的提高先增加后减小, 但存活率没有显著性变化; 各组XY雌鱼与对照组雌鱼的鳃、心脏、肝脏、肾脏和肌肉组织中17β-E₂含量均无显著性差异, 卵巢中17β-E₂含量与添加剂量呈正相关; 雌性性别分化基因foxl2在XY雌鱼中的表达量显著升高, 雄性性别分化基因dmrt1在XY雌鱼中的表达量显著降低。研究建立了17β-E₂诱导XY雄性斑点叉尾鮰雌性化方法, 为后续全雄斑点叉尾鮰新品种的培育奠定基础。     

精子性别化对奶牛性别控制的试验

本试验获得牛犊雌性控制率达８１．８％（Ｔａｂｌｅ１）。十头母牛产犊十一头：二雄,九雌,其中一头产异性双犊。于１．０８－１．１０蔗糖密度梯度之间,可以清楚地观察到Ｙ精子能被荧光素染色（Ｔａｂｌｅ２）;Ｈ－Ｙ抗血清处理能改变Ｙ精子的荧光染色,说明对Ｙ精子有抑制作用（Ｔａｂｌｅ３）．制备有一定纯度和效价的Ｈ－Ｙ抗血清ＩｇＧ用以性别化处理精子;通过人工受精技术、使母牛得到受处理的精子而正常受胎．本试验结果对奶牛性别控制的前景是美好的。     

大豆黄酮对大鼠肌肉生长和几种内源激素水平的影响

给雄性、雌性和雄性去势大鼠皮下注射大豆黄酮［３ｍｇ／（１００ｇ体重·天）］１６天。结果：雄性大鼠日增重提高１４．７％（Ｐ＜０．０５）,耗料与增重比降低１２．０％,后腿肌重和后腿肌总ＲＮＡ含量显著增加,而总ＤＮＡ含量无显著变化;血清脲氮水平显著下降,血清睾酮、雌二醇、生长激素和β－内啡肽含量显著提高。雄性去势大鼠日增重、后腿肌重无显著变化,血清睾酮、生长激素和β－内啡肽水平虽显著高于对照组,但睾酮水平仅为同等条件下完整大鼠的８％左右。雌性大鼠日增重降低１９．０％（Ｐ＜０．０１）,耗料与增重比提高１７．８％,血清睾酮、雌二醇和生长激素水平显著降低。试验结果表明：大豆黄酮对大鼠肌肉生长和几种内源激素水平的影响呈现性别差异,对雄性大鼠肌肉生长的促进作用依赖于睾丸的内分泌机能。     

性腺甾体激素对雌,雄大鼠下丘脑血管升压素mRNA水平的影响

实验用１０－１１周龄经阉割的雌、雄Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠进行。以３末端异羟基洋地黄毒甙标记的２６个碱基长的寡核苷酸作为检测探针,用核酸斑点杂交技术检测大鼠下丘脑血管升压素ｍＲＮＡ水平。在假手术对照组,雄性大鼠下丘脑ＡＶＰｍＲＮＡ水平经雌性大鼠高４５％（Ｐ〈０．０５）,血浆渗透压高于雌性大鼠（Ｐ〈０．０５）。摘除卵巢的大鼠下丘脑ＡＶＰｍＲＮＡ深恶痛绝经假手术组雌性大鼠高３０％（Ｐ〈０．０５     

硬头鳟与溪红点鲑杂交三倍体育种技术的初步研究

为了获得同时具有杂交及三倍体优势的鲑鳟鱼苗种,开展了利用6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)诱导硬头鳟(Oncorhynchus mykiss)、溪红点鲑(Salvelinus fontinalis)正反杂交受精卵的实验。杂交结果,溪红点鲑(♀)×硬头鳟(♂)实验组卵子在受精10 min后全部死亡,而硬头鳟(♀)×溪红点鲑(♂)组的受精卵正常,可以进行6-DMAP三倍体诱导实验。6-DMAP诱导受精卵结果,起始诱导时间在12~15 min,受精卵的发眼率最高,为75.87%~76.64%,在5个起始诱导时间梯度内,受精卵的孵化率在86.44%~90.31%之间,苗种三倍体率在92.45%~95.55%之间,差异不显著(P0.05)。诱导持续时间为10~15 min时,受精卵发眼率达到最高,为74.28%~76.81%,在5个诱导持续时间梯度内,受精卵孵化率在87.28%~90.24%之间,苗种三倍体率在93.67%~96.25%之间,变化不显著(P0.05)。药物诱导浓度为120~150 mg/L时,受精卵的发眼率达到最高,为73.57%~76.27%,在5个不同的药物浓度梯度内,受精卵孵化率在88.57%~90.03%之间,苗种三倍体率在92.56%~96.38%之间,变化不显著(P0.05)。结果表明,利用6-DMAP诱导受精卵制备杂交三倍体苗种的方法是可行的,实验最佳方法为硬头鳟(♀)×溪红点鲑(♂)卵子受精后12~15 min内,利用浓度为120~150 mg/L的6-DMAP溶液诱导,持续时间为10~15 min,然后放入孵化桶内正常孵化,获得苗种的三倍体率可达92.56%~96.38%,可满足正常生产的需要。     

萼花臂尾轮虫有性生殖、种群增长和休眠卵产量间的关系

利用种群指数增长和Logistic增长模型,通过计算机模拟研究了萼花臂尾轮虫有性生殖发生的频率,后代中的混交雌体发率对种群增长和休眠卵产量的影响。在所模拟的参数范围内,随有性生殖发生频率由100％减小到20％,获得了大休眠卵产量所需的混交雌体百分率由9％增大到69％,随密度制约作用的增大（环境容纳量K值由1000减小到100）,该混交雌体百分率由18％增大到69％,休眠卵产量由1072．10降低至133．67,种群的内禀增长率与获得最大休眠卵产量所需的混交雌体百分率间呈曲线相关。当有性生殖发生得越频繁,种群增长所受的密度制约作用较小时,后代中10％－30％的个体为混交雌体时的种群中休眠卵产量较大。     

武汉东湖浮游动物对浮游细菌的牧食力研究

利用３５μｍ、６４μｍ、９０μｍ和３６０μｍ等不同大小孔径的筛绢网过滤湖水进行了浮游动物对浮游细菌牧食力的研究。结果表明，东湖浮游动物对浮游细菌总滤过率为１８０．１９ｍｌｌ￣（－１）ｈ￣（－１）．摄食率为０．４０μｇＣｌ￣（－１）ｈ￣（－１）。９０μｍ以下的个体为原生动物和轮虫，它们组成了群落总生物量的７５％，其对细菌的牧食力占总牧食力的４４．８％，大于３６０μｍ的浮游动物（主要是甲壳动物）的牧食力占总牧食力的３５．１％。大于９０到小于３６０μｍ的浮游动物其牧食力最小，只占总牧食力的２０％。文中分别用滤过率、摄食率和特定摄食率对各浮游动物组分进行了比较，甲壳动物的特定摄食率比原生动物和轮虫的特定摄食率之和大。文中并讨论了可能影响浮游动物对浮游细菌牧食力的有关因素。     

内毒素引起的乳鼠心肌细胞血红素加氧酶—1基因的表达

为了探讨在内毒素作用下的乳鼠心肌细胞（neonatal rat cardiomyocytes,NRCMs）血红素加氧酶－1（heme oxygenase-1,HO-1）基因的表达及其在细胞损伤中的作用,分别用10、30及50μg/ml的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）,10μg/ml LPS 10μmol/ml锌原卟啉Ⅸ（Zn-protoporphyrin-Ⅸ,ZnPPⅨ）和单纯10μmol/ml ZnPPⅨ与培养的NRCMs共同孵育6h,以及10μg/ml LPS与NRCMs共同孵育9h和18h。分别观察细胞HO－1 mRNA表达、MDA含量、LDH释放量与台盼蓝摄取率的变化。结果显示,同样与细胞孵育6h,LPS10μg/ml时HO－1 mRNA表达比对照组增加81.2％,30μg/ml时表达量增加126.3％,50μg/ml时表达量增加92.8％;LPS为10μg/ml时,孵育9h后HO－1 mRNA的表达量比对照组增加93.6％,孵育18h后一增加105.8％。LPS30、50μg/ml,10μg/ml LPS＋10μmol/ml ZnPPⅨ与细胞孵育6h及LPS 10μg/ml孵育18h后,细胞MDA含量、LDH释放量与台盼蓝摄取率明显增加（P＜0.01）;单纯10μg/ml LPS与单纯10μmol/ml ZnPPⅨ孵育6h后,上述指标均无明显升高。结果表明,LPS可诱导NRCMs HO－1 mRNA的表达,且在较低LPS剂量范围内具有时间依赖性和浓度依赖性;NRCMs HO-1 mRNA的表达可减低LPS引起的细胞损伤,这可能是细胞产生的一种自身保护性反应。     

无籽枸杞新品种选育研究

采用组织培养技术与化学诱变相结合及幼胚培养等育种手段,初步选育出优良三倍体株系99－3。99－3三倍体株系与目前生产中最优栽培品种宁杞1号（二培体）相比,总糖含量高37．59％,多糖含量高20．00％,氨基酸含量高9．50％,千粒果重高8．60％,且含籽数降低58．70％,饱籽数降低88．80％,第一年产量略高于宁杞1号。通过上述指标综合评定,三倍体枸杞99－3是一个理想的枸杞深加工品系。     

鲤鱼生长激素基因的改造及其在大肠杆菌中的表达

用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）改造了锂鱼生长激素基因,扩增出编码锂鱼生长激素成熟肽的序列,并将此序列克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ Ⅱ ＫＳ质粒中,序列分析后,亚克隆到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０中。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和薄层扫描,结果表明锂鱼生长激素基因已大肠杆菌中获得表达。锂鱼生长激素成熟肽的分子量为２２０００道尔顿,表达率占细胞总蛋白的１８％以上％。     

三倍体白鲫的生物学特性

由人工诱导的异源四倍体白鲫雄鱼与正常的二倍体白鲫雌鱼交配获得的异源三倍体白鲫,其主要生物学特性同二倍体白鲫进行比较研究表明,三倍体白鲫具有体形较大、相对体高和相对尾柄高较高、侧线上下鳞数目较多的形态特征,仍保留着二倍体白鲫以浮游植物为主的植食性营养方式,雌雄均不育,比二倍体生长快,网箱养殖１１２天后,体重比二倍体平均增加３２．３８％。试验证实三倍体白鲫是一个具有养殖生产前景的新对象。     

同时而非先后一雌多雄交配增加不同温度下食蚜瓢虫的适合度（英文）

【目的】尽管一雌多雄在瓢虫科中常见,但各研究中获得的数据不足以解释雌虫多次交配和一雌多雄的一般适应性意义或适合度后果。本研究以温度为胁迫因子,旨在评价一雌多雄的某些益处（如增加的适合度）是否可传递给后代。【方法】本研究检测了黄斑盘瓢虫Coelophora saucia (Mulsant) 3种交配处理中的适合度：一雌一雄（与同一雄虫交配5次,1次/d）,先后一雌多雄（与5头不同的雄虫依次交配5次,即每天与新的雄虫交配1次）,以及同时一雌多雄（放进5头雄虫,任由雌虫选择雄虫,交配5次,1次/d）。观察了各交配处理不同温度下（25, 27和 30℃）繁殖力、卵的育性、后代发育和存活。【结果】结果表明,经历一雌多雄然后进行交配选择或竞争的雌性的繁殖能力最强,后代能在更广温度范围内最好地适应发育和存活。但先后一雌多雄交配的雌性与一雌一雄交配的雌性的繁殖能力相似。【结论】结果说明,在无交配选择或雄性竞争的条件下,一雌多雄的益处不明显。这可能是由于在依次射精的雄性间存在精子竞争,或由于雌性的隐性选择。据我们所知,本研究中观察发现的无交配选择时不表现一雌多雄的益处的现象,之前在昆虫中未观察到过。     

甲胺磷和17β－雌二醇对萼花臂尾轮虫实验种群动态的影响

对暴露于不同浓度的甲胺磷(0.01、0.1、1.0、10.0、100.0、1 000.0和10 000.0 μg·L-1)和17β-雌二醇(0.001、0.01、0.1、1.0、10.0、100.0、和1 000.0 μg·L-1)溶液中的萼花臂尾轮虫的种群动态进行了研究.结果表明:甲胺磷和17β-雌二醇对轮虫种群动态的影响存在差异.甲胺磷和17β-雌二醇对实验期间轮虫的平均种群增长率均有显著影响,但对轮虫种群中的混交雌体受精率的平均值无显著影响;甲胺磷对实验期间轮虫种群中的携卵雌体数/非携卵雌体数和混交雌体百分率的平均值均有显著影响,而17β-雌二醇则无显著影响;甲胺磷对实验期间轮虫的休眠卵总产量无显著影响,而17β-雌二醇的影响较显著.与对照相比,10.0～10 000.0 μg·L-1的甲胺磷和100.0 μg·L-1的17β-雌二醇均使轮虫的平均种群增长率显著提高;0.1～10 000.0和10.0 μg·L-1的甲胺磷分别显著地降低了实验期间轮虫种群中的携卵雌体数/非携卵雌体数和混交雌体百分率的平均值;1 000.0 μg·L-1的17β-雌二醇显著降低了轮虫的休眠卵总产量.在实验浓度范围内,轮虫平均种群增长率(Y,d-1)与甲胺磷浓度(X,μg·L-1)之间的关系为Y=-2×10-8X2 0.0002X 0.3474.种群增长率可用于监测和评价甲胺磷对轮虫种群动态的影响.     

邻苯二甲酸酯类物质对萼花臂尾轮虫种群增长和有性生殖的影响

以萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflourus)为受试动物,以17β-雌二醇(E2)为阳性对照,运用3d种群增长和4d休眠卵产量实验方法研究了不同浓度的邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)和邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)对轮虫种群增长和有性生殖的影响。结果显示,与空白对照组相比,0.05-5000μg/L的E2和500μg/L的BBP显著提高了轮虫种群增长率,而0.5和5000μg/L的DBP以及0.05和0.5μg/L的BBP使轮虫种群增长率显著降低;0.5-500μg/L的E2、50和500μg/L的DBP、0.005和500μg/L的DEHP和500μg/L的BBP显著提高了轮虫的休眠卵产量,而5000μg/L的DBP和0.05μg/L的BBP却与其相反;5和500μg/L的E2、50和500μg/L的DEHP以及500μg/L的DBP和BBP均使轮虫混交率显著上升,而0.005和0.05μg/L的E2、5000μg/L的DBP和DEHP及0.5μg/L的BBP显著降低了轮虫种群中混交雌体受精率;除5000μg/L的E2显著降低轮虫种群中的混交雌体数/非混交雌体数之外,其它所有处理组均对其无显著性影响;5、500和5000μg/L的E2、5000μg/L的DBP和5-5000μg/L的DEHP均使轮虫种群中的带卵雌体数/不带卵雌体数显著升高,而BBP对其无显著影响。在实验设置浓度范围内,轮虫种群中的混交雌体数/非混交雌体数与E2浓度间、轮虫种群中的混交雌体受精率和种群增长率与DBP浓度间、轮虫休眠卵产量与DEHP浓度间、轮虫混交率与BBP浓度间均具有显著的效应-剂量关系