多巴胺、雌二醇及睾酮对虎纹蛙离体脑垂体促性腺激素分泌的影响 EFFECTS OF DOPAMINE，ESTRADIOL AND TESTOSTERONE ON GONADOT ROPIN RELEASE FROM THE PITUITARYFRAGMENTS OF Rana rugulosa

为了解虎纹蛙促性腺激素分泌的调节机理，用离体静态培育系统和放射免疫测定法，研究了多巴胺(DA)、雌二醇(E[2])和睾酮(T)对雌性虎纹蛙离体脑垂体薄片促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)分泌活动的影响。结果表明：0.1-10 μmol/L的DA对成熟前期和冬眠期虎纹蛙离体脑垂体薄片的LH及FSH的释放都有抑制作用，并且随着DA浓度的增加，抑制作用逐渐增强。1和10 μmol/L的E[2]显著刺激成熟前期蛙LH的释放，而0.1-10 μmol/L的E2显著抑制其FSH的释放；T对其FSH的释放无显著影响，但10 μmol/L的T显著抑制其LH释放。0.1-100 μmol/L 的E[2]或T对冬眠期蛙LH和FSH的释放均无显著影响。这些结果说明，多巴胺和性类固醇激素在脑垂体水平上对虎纹蛙LH和FSH的释放有直接的调节作用，而性类固醇激素的作用可能与性腺的发育阶段(季节)有关。     

多巴胺能药物对虎纹蛙GnRH和LH分泌活动的影响

利用在体注射实验和放射免疫测定法,研究了多巴胺能药物对性腺处于再发育期虎纹蛙的促性腺激素释放激素（GnRH)及促黄体激素（LH)分泌活动的影响。结果是：多巴胺（DA）及其激素剂阿扑吗啡（APO）可显著降低血浆LH水平;而多巴胺的拮抗剂－地欧酮（DOM）可显著增加垂体LH含量。DA对脑中cGnRH-Ⅱ的合成有抑制作用,而OM对其mGnRH的释放有一定的刺激作用。结果表明：DA可在脑及垂体水平分别抑制虎纹蛙GnRH和LH的释放,DA对LH释放的抑制作用很可能是通过D2受体实现的。     

睾酮对日本鳗鲡离体下丘脑-脑垂体复合物GtH合成与分泌的影响

用离体孵育的方法研究了睾酮（T）对日本鳗鲡（Anguilla japonica)完整的正丘脑-脑垂体复合物（hypothalamus-pituiary complex,HPC)、分离的下丘脑（hypothalamus,H)加脑垂体（pituitary,P)以及单独的脑垂体（pituitary,P)促性腺激素（GtH)合成与释放的影响,在不加T的孵育液中孵育,HPC组的孵育液及其脑垂体中的GtH含量最高,H P组次之,而P组最低,表明下丘脑通过GnRH直接刺激脑垂体GtH的合成与释放,在加入T的孵育液中孵育,P组的孵育液及脑垂体中的GtH含量显著增加,并且和孵育液中的T呈剂量依存的正反馈作用,当T和H与P一起孵育时,低浓度的T（0.1和1μmol/L)刺激HPC组和H P组的GtH释放,呈现正反馈作用,而高浓度的T（10μmol/L)则抑制HPC组和H P组的GtH释放,表现负反馈作用。这些结果直接证明日本鳗鲡下丘脑对脑垂体GtH分泌的调控以及性类固醇激素（如雄鳗的睾酮）对脑垂体GtH分泌的反馈作用。     

几种神经内分泌因子对鲤促性腺激素释放激素(GnRH)释放的调节作用:离体研究

用离体静态培育系统进行的初步研究表明 ,在幼鲤 ,多巴胺 (DA)显著刺激下丘脑片段和脑垂体碎片释放GnRH ,并且是剂量依存的 ;促甲状腺素释放激素 (TRH)和γ -氨基酸丁酸 (GABA)对GnRH的释放没有影响。在成鲤 ,DA抑制下丘脑片段和脑垂体碎片释放GnRH ,而TRH和GABA刺激GnRH的释放 ;DA对GABA刺激的GnRH释放也具有抑制作用 ;TRH和GABA的协同作用对下丘脑和脑垂体GnRH释放活动的影响明显低于TRH和GABA的单独作用 ,表明TRH和GABA之间可能存在着某种GnRH释放的相互消竭作用。     

GABA对大鼠下丘脑正中隆起LHRH释放调节的研究

本研究应用大鼠下丘脑正中隆起(ME),观察 γ-氨基丁酸(GABA)和去甲肾上腺素(NA)对下丘脑促黄体生成激素释放激素(LHRH)神经元末梢分泌作用的影响。结果发现:GABA(10~(-6)mol/L)可显著促进 ME 的 LHRH 和 NA 的释放,即 LHRH 释放量由27.3±2.5pg/100ul 增加至150.4±27.9pg/100μl;NA 释放量由50.9±4.2pg/100μl 增加至105.5±19.1pg/100ul,两者与对照组相比有显著差异(P<0.01)。GABA 这些作用可被受体拮抗剂荷包牡丹碱(Bicuculline)所翻转。当荷包牡丹碱和 GABA(10~(-6)mol/L)同时存在于 ME 的培灌液中,LHRH 的分泌量下降为18.2±1.9pg/100μl,而 NA 分泌量下降为43.9±3.4pg/100μl。在内源性 NA 被利血平耗竭时,LHRH 的释放量仅增加26.5%,而 GABA 能使正常大鼠 LHRH 释放量增加451.9%。本研究提示:GABA 可促进下丘脑 ME 释放 LHRH,这一作用可能通过 NA 中介。     

β3肾上腺素受体介导多巴胺对大鼠远端结肠运动的抑制作用

目的研究多巴胺（DA）对大鼠结肠运动影响的机制。方法采用离体组织灌流方法记录大鼠远端结肠自发性节律运动,观察DA的作用以及阻断剂的影响,再用反转录实时多聚酶链反应（real time RT-PCR）检测受体基因的表达。结果DA（≥1.0×10-5mol/L）对结肠远端（紧接肛门淋巴结近端）离体纵行肌条（2.0 mm×10 mm）的运动具有抑制作用,多巴胺受体阻断剂（D1受体阻断剂SCH23390,1.0×10-7mol/L,D2受体阻断剂Sulpide,1.0×10-7mol/L）不能阻断多巴胺的抑制效应,但加入β3受体抑制剂cyanopindolol（7.5×10-7mol/L）,DA的抑制作用显著减弱。real time RT-PCR检测发现β1、β2、β3受体mRNA在远端结肠均有表达。结论DA可通过β3受体发挥对远端结肠运动的抑制作用。     

促性腺激素释放激素及多巴胺对斜带石斑鱼生长激素分泌及其mRNA表达的调控

研究斜带石斑鱼生长激素分泌及其mRNA表达的调控规律对于性别分化的控制、临床药物的选择,以及石斑鱼的增养殖等均具有重要的理论意义和实践意义。本文应用静态孵育系统,采用放射免疫测定法和化学发光液相杂交实验,研究GnRH和DA对斜带石斑鱼GH分泌、GHmRNA合成的调控作用。100nmol／LsGnRH作用斜带石斑鱼脑垂体碎片1也4h,明显促进GH的释放和GHmRNA的合成,并具有时间依存性;10nmol／L～1μmol／LsGnRH作用1h能明显促进斜带石斑鱼脑垂体释放GH,促进GHmRNA的合成,表现出明显的剂量效应。100nmol／L、1μmol／LmGnRH作用1h以一定的剂量依存方式促进GH的释放、促进GHmRNA的合成,但mGnRH的效应比相应剂量的sGnRH的作用弱。APO为DA受体的非选择性激动剂,不同剂量APO对斜带石斑鱼脑垂体碎片的作用结果显示,10nmol／L-1μmol／L APO以剂量依存方式促进斜带石斑鱼脑垂体碎片释放GH、促进GHmRNA的合成：1μmol／LAPO作用12h以上明显促进GH的释放和GHmRNA的合成,并随时间的延长而增加。与sGnRH对斜带石斑鱼GH释放、GHmRNA合成的作用相比,APO的作用较弱。本文研究结果证实GnRH和DA能促进斜带石斑鱼脑垂体GH释放和GHmRNA合成。     

促肾上腺皮质激素释放激素对人早期胎盘组织绒毛膜促性腺激素释放的调节作用

为探讨人早期胎盘组织产生的促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）的生物学作用及其绒毛膜促性腺激素（hCG）合成和释放的调控机制,在人早期胎盘组织体外孵育模型上研究了CRH及其拮抗剂（α－HelicalCRF9-41）对hCG基础分泌和由GnRH刺激的hCG分泌的影响。结果表明,10-10～10-7mol／L的外源性CRH可明显抑制hCG的基础释放（P＜0.05）,而以10-7mol／L作用最显著（P＜0．001）;加入10-7mol／L的CRH4小时后,hCG释放量开始有所下降,但尚无统计学差异,到加药后8小时,CRH组已明显低于相应的对照组（P＜0．05）,以加药后16小时抑制作用最明显（P＜0．001）,到24小时抑制作用趋于减弱,但与同期对照相比仍有显著差异（P＜0．05）;10-7mol／L和10-5mol／L的α-HelicalCRF9-41可明显刺激hCG的分泌（P＜0.001）;2×10-7mol／L和2×10-6mol／L的α－HelicalCRF9-41可完全逆转CRH对hCG释放的抑制作用;2×10-9～2×10-7mol／L的CRH对由GnRH诱导的hCG释放有明显的抑制作用。这些结果提示,由胎盘的合体滋养层产生的CRH,通过受体介导机制,不仅对hCG基础分泌,且对由GnRH诱导的hCG分泌都有明显的抑制作用,且这种作用具有特定的时间依赖性和剂量依赖性．CRH可能是参与hCG分泌调控的生理性负调节团子之一.     

k-银环蛇毒素敏感的烟碱受体激活引起的去甲肾上腺素释放参与烟碱诱导的长时程增强样反应

烟碱可以增强学习记忆功能,但其相关机制仍不清楚。海马长时程增强被认为是学习记忆的细胞机制。本研究室以往研究表明,当单脉冲的强度为诱发80％最大群体锋电位时,烟碱（10μmol/L）可以在海马CA1区诱导长时程增强样反应。本文通过细胞外记录离体海马脑片CA1区锥体细胞层群体锋电位,探讨烟碱诱导长时程增强样反应所涉及的烟碱受体亚型与相应的神经递质释放。结果显示,烟碱诱导的长时程增强样反应可以被美加明（mecamylamine,1μmol／L）或K-银环蛇毒素（K．bungarotoxin,0．1μmol／L）阻断,但不被dihydro-β-erythtroidine（DHβE,10μmol／L）阻断。烟碱诱导的长时程增强样反应可以被普萘洛尔（propranolol,10μmol/L）阻断,但不被酚妥拉明（phentolamine,10μmol／L）或阿托品（atropine,10μmol／L）阻断。以上结果提示,K-银环蛇毒素敏感的烟碱受体激活引起的去甲肾上腺素释放参与烟碱诱导的海马CA1区长时程增强样反应。     

一氧化氮在血管紧张素Ⅱ激活蛋白激酶C中的作用

实验在培养新生大鼠心肌细胞中检测NO前体L－精氨酸（L－Arg）和NO供体硝普钠（SNP）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）激活蛋白激酶C（PKC）的作用,以探讨心肌细胞PKC水平的信号转导途径,实验结果如下：（1）无血清DMEM培养心肌细胞24h后加入AngⅡ,PKC活性呈剂量依赖性增高;（2）培养基中加入L－Arg,PKC活性呈剂量依赖性降低;（3）用L－Arg100μmol/L进行预处理,30min后分别加入AngⅡ0.1μmol/L或PMA10μmol/L,PKC活性均明显降低,与单纯AngⅡ组和单纯PMA组相比均有显著性差异;用NOS抑制剂L－NAME预处理后,再加入L－Arg,可明显阻断L－Arg对上述两个效应的影响;（4）培养液中加入NO供体SNP,PKC活性呈剂量依赖性地降低;（5）用SNP10μmol／L预处理心肌细胞,5min后分别加入AngⅡ或PMA,PKC活性分别与单纯AngⅡ和单纯PMA组相比均明显降低。以上结果表明,AngⅡ能剂量依赖性激活PKC,而NO可剂量依赖性抑制PKC活性;NOS参与L－Arg抑制AngⅡ或PMA激活PKC的作用。这些观察提示,NO抑制AngⅡ对心肌细胞的作用可能是通过抑制PKC活性实现的,PKC可能是NO和AngⅡ在心肌细胞内信号转导的交汇点（cross talk）。     

NO在CCK—8减轻肿瘤坏死因子诱导兔肺动脉反应性变化中的作用

为探讨八肽胆囊收缩素（CCK－8）缓解内毒素休克时肺动脉高压的作用机制,应用离体血管环张力测定技术及一氧化氮合酶（NOS）检测方法,观察了一氧化氮（NO）在CCK－8减轻肿瘤坏死因子－α（tumor necrosis factor-al-pha,TNF-α）的抑制肺动脉内皮依赖性舒张反应中的作用。结果显示：TNF－α（4000U／ml）孵育2h时,肺动脉对10^-6mol/L苯肾上腺素(phenylephrine,PE）和10^-6mol/L乙酰胆碱（ACh）的收缩反应及内皮依赖性舒张反应均无明显变化。TNF－α孵育7或14h时,肺动脉对10^-6mol/L ACh介导的内皮依赖性舒张反应降低,CCK－8（0.5μg/ml）可逆转TNF－α的上述作用,CCK－8本身对正常肺动脉反应性无明显影响。TNF－α、CCK－8对PE引起的收缩反应无显著影响。L－精氨酸（L－Arg）可使TNF－α7h内皮依赖性舒张作用恢复。氨基胍（AG）不影响各组肺动脉对10^-6mol/L ACh的内皮依赖性舒张反应,而使TNF－α组肺动脉环对10^-6mol/L PE的收缩反应显著增加。L－硝基精氨酸（L－NNA）使各组肺动脉环对10^-6mol/L ACh反应由舒张变为收缩,对10^-6mol/L PE的收缩反应显著增强。检测7h各组NOS活性,TNF－α组、TNF－α＋CCK－8组均较对照组显著增加,CCK－8组与对照组比较无显著差异。上述结果提示,CCK－8可逆转TNF－α对内皮依赖性舒张反应的抑制作用,此作用可能与NO有关。     

心钠素在GABA调节下丘脑正中隆起LHRH释放的介导作用研究

已证明脑神经递质GABA可促进下丘脑正中隆起LHRH神经元末梢的释放功能,这一作用可能通过抑制某些抑制性神经递质或调质释放而实现。本研究旨在观察作为体内循环调节肽的心钠素在大鼠脑内的分布,对LHRH释放的影响及对GABA调节LHRH释放的中介作用。实验结果发现:(1)雄性大鼠不同脑区心钠素的含量不同,其中以下丘脑正中隆起组织含量最高;(2)不同浓度的心钠素(10~(-8)-10~(-6)mol/L)可显著抑制LHRH从下丘脑正中隆起释放,并呈现剂量反应关系。(3)GABA(10~(-6)mol/L组)可显著抑制心钠素的释放;GABA的这一抑制作用可被GABA受体拮抗剂荷包牡丹碱(Bicuculline)完全反转。上述结果提示心钠素参与调节下丘脑正中隆起(ME)LHRH神经元末梢的释放机能,它亦可能介导GABA对下丘脑正中隆起LHRH的调节作用。     

α2-肾上腺素受体对大鼠肠系膜动脉床降钙素基因相关肽释放的调节作用

降钙素基因相关肽（CGRP）从感觉神经末梢的释放受多种机制的调节。本文在离体灌流的大鼠肠系膜动脉床组织上,利用药理学工具药,研究了α2-肾上腺素受体对CGRP的基础和内毒素刺激后释放的作用。结果发现,α2-受体激动剂UK14304（3×10－6mol／L）可以显著抑制CGRP的基础释放和内毒素（1～5μg／ml）刺激后的释放,抑制幅度为22％～42％;用α2-受体拮抗剂Yohimbine（10－5mol／L）可以完全阻断UK14304的作用。结果表明突触前α2-受体对CGRP从外周阻力血管组织的释放,尤其是内毒素刺激后的释放具有抑制作用,在内毒素休克晚期,α2-受体功能减低可能介导了外周组织CGRP的过量释放。     

白细胞介素-2引起离体大鼠主动脉环舒张及其作用机制

本文旨在研究白细胞介素－2（interleukin-2,IL-2）以离体大鼠胸主动脉环收缩张力的作用及其可能机制。采用累积加药法,检测IL－2对去氧肾上腺素（PE）和KCl预收缩的胸主动脉环收缩张力的影响。结果表明,IL－2（1、10、100、1000U／ml）对PE（10μmol/L）预收缩的内皮完整血管环产生浓度依赖性的舒张作用,而对KCl (120mmol/L）预收缩的血管无作用,去除内皮后,IL－2的舒张作用被取消。用一氧化氮合酶抑制剂L－NAME（0.1mmol/L）和鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝（10μmol/L）预处理,均可阻断IL－2的舒张血管作用。用环氧合酶抑制剂吲哚美辛（Indo,10μmol/L）预处理可阻断IL－2的血管舒张作用。从上述观察结果推论,IL－2通过NO－鸟苷酸环化酶和环氧合酶途径产生内皮依赖的血管舒张作用。     

花鳗鲡脑cDNA文库的构建及GnRH基因克隆与表达分析

以花鳗鲡脑组织为材料,提取总RNA,应用CloneminerTM文库构建试剂盒构建cDNA文库。经检测,文库的滴度为4.3×106 cfu/mL,总容量为5.16×107 cfu/mL,阳性克隆率为99.6%,插入片段0.43－3.2kb之间,平均插入片段大小为1532bp。以文库为模板,克隆获得花鳗鲡两种类型的促性腺激素释放激素（mGnRH和cGnRH-II）cDNA序列。序列分析表明,花鳗鲡mGnRH cDNA开放阅读框(ORF)包含276个碱基,编码91个氨基酸,其中包括22个氨基酸的蛋白质前体信号肽（1－22位氨基酸）、mGnRH十肽（23－32位氨基酸）、一个三肽裂解位点（33－35位氨基酸）和56个氨基酸的GnRH相关肽（36－91位氨基酸）;花鳗鲡cGnRH-II cDNA开放阅读框包含264个碱基,编码87个氨基酸,其中包括24个氨基酸的蛋白质前体信号肽（1－24位氨基酸）、cGnRH-II十肽（25－34位氨基酸）、一个三肽裂解位点（34－36位氨基酸）和50个氨基酸的GnRH相关肽（37－87位氨基酸）。序列同源性分析表明,花鳗鲡mGnRH、cGnRH-II cDNA与日本鳗鲡之间的相似性率高达98%;与鲑形目、鲈形目、鲽形目鱼类的相似率为73%－78%;而与鲤形目鱼类的相似性相对较低（63%－67%）。采用RT-PCR 方法分析了两种GnRH基因在花鳗鲡雌雄个体中的表达,结果表明该两基因在雌雄个体的组织表达模式无明显差异;但mGnRH基因在雌雄个体内表达部位多于cGnRH-II的。     

N—硝基精氨酸抑制海马神经元兴奋机制

研究N－硝基精氨酸（L－NNA）在青霉素诱发的培养海马CA1区神经元细胞兴奋过程中的抑制机制。用激光扫描共聚焦显微镜观察发现4000IU／ ml的青霉素可诱发一氧化氮（NO）的快速合成模式。L-NNA(0-10μmol/L）呈剂量依赖性抑制NO的合成和青霉素刺激15min后谷氨酸水平的二次升高。同时发现1μmol/L和10μmol/L剂量的L－NNA可显著抑制甲硫氨酸脑啡肽的水平,而10μmol/L剂量的L－NNA还显著升高强啡肽－B的水平。对L－NNA抑制谷氨酸水平二次升高效应,100μmol/L的甲硫氨酸脑啡肽受体抑制剂β－funaltrexamine(β-FNA）可显著协同,而100μmol/L的强啡肽－B受体抑制剂norbinaltorphimine(nor-BIN)则显著逆转。以上结果提示：L－NNA抑制4000IU／ml的青霉素诱导的NO合成,并进而通过抑制氨酸脑啡肽水平,升高强啡肽－B水平来抑制谷氨酸水平,调节神经元的兴奋性。     

青霉素和苯巴比妥钠对小鼠全脑切片积聚~3H-GABA的影响

本文应用同位素示踪、脑片离体培育和侧脑室注射的方法,在体外和体内研究了惊厥剂青霉素和抗惊厥剂苯巴比妥钠对小白鼠全脑切片积聚~3H-GABA的影响。结果表明:(1)在含6.70—13.40×10~(-4)mol/L的苄青霉素钾(PG)100μl或19.60—39.20×10~(-4)mol/L的苯巴比妥钠(PhB)50μl的培育液(2ml)中,小鼠全脑切片对~3H-GABA的积聚作用明显降低(P<0.05)。6.70×10~(-4)mol/L的PG100μl和39.20×10~(-4)mol/L的PhB50μl同时注入培育液(2ml)时,脑片对~3H-GABA的积聚比PG单独试验时稍有升高。(2 )小鼠侧脑室注射20μl的 3.35×10~(-2)mol/L的PG可引起强烈的惊厥,脑片上的~3H-GABA积聚减少(P>0.05);脑室内注射10μl的3.88×10~(-2)mol/L的PhB能抗惊厥,也使~3H-GABA在脑片上的积聚减少(P>0.05);脑室内同时注射PG和PhB,使~3H-GABA在脑片上的积聚恢复正常。以上结果提示:青霉素可通过竞争突触后膜和神经末梢上的GABA受体,阻断GA-BA的突触后抑制效应及抑制GABA释放,显示惊厥作用;苯巴比妥钠也可和突触后膜上的GABA受体结合,产生GABA样作用或激活GABA受体,起抗惊厥作用。     

γ-氨基丁酸对小白鼠离体胃标本胃酸分泌的促进效应

为了探索γ-氨基丁酸(GABA)对小白鼠离体胃标本胃酸分泌(GAS)的影响及机制,在体外37℃缓冲液中培育离体、胃腔灌流并维持胃内12 cm水柱压力的全胃标本,用pHS-3型精密酸度计测定灌流液的pH。结果表明：γ-氨基丁酸(GABA)(1～10×10-7mol/L)和巴氯芬(Bac, 0.6～9.6×10-7mol/L)以一种浓度依赖的方式显著地促进胃酸分泌(GAS),而西咪替丁(Cim, 2～20×10-7mol/L)以一种浓度依赖的方式有力地抑制GAS。印防已毒素(Pic, 3×10-7mol/L)不影响基础胃酸分泌(BGAS)和GABA促进GAS的效应,而番氯芬(Phac, 0.6×10-7mol/L)能完全阻断GABA的促进效应。Cim不能完全消除GABA和Bac对GAS的促进效应。以上结果提示,在小鼠中GABA可以通过激活胃中GABAB受体促进离体胃标本的GAS,可能胃壁胆碱能神经元和非神经细胞,如壁细胞及某些内分泌细胞上都存在GABAB受体,GABA可直接或简接地剌激胃壁细胞分泌酸。     

多马胺能药物对鲇鱼促性腺激素（GtH）分泌活动的影响

以珠江流域鲇鱼（silurus asotus)为实验材料,研究了多巴胺（DA）能药物（DA及其D－2型受体拮抗物 ,DOM）对鲇鱼促性腺激素（GtH)释放的影响,结果表明,在性腺发育的各个时期,单独注射DOM（5ug/g)均不能显著提高鲇鱼血液基础GtH水平,当DOM与LHRH－A联合注射时能显著增强LHRH－A刺激GtH释放的作用;DA只能抑制GnRH诱导的GtH释放,对基础GtH释放无抑制作用,这种生殖内分泌调节方式与鲇形目的革胡子鲇（Clarias gariepinus)和大鳍Hu（Mystus macropterus)相似,而与鲤形目的鲁科（Cyrpindiae)鱼类不同。     

ERK1／2信号通路对黄芪苷Ⅳ抗H2O2诱导H9c2细胞氧化损伤的作用

目的：研究黄芪苷Ⅳ（AST）是否通过细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）通路发挥对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用。方法：用200μmoL／L的H2O2处理细胞6h,采用MTT法检测细胞存活率,建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型;比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性、总超氧化物歧化酶（T—SOD）和锰超氧化物歧化酶（Mn—SOD）活力以及丙二醛（MDA）含量;Western blot检测H9c2细胞ERK1／2蛋白的磷酸化水平。结果：在H2O2浓度为200μmol／L作用6h条件下,细胞存活率降低程度适中,实验结果重复性好,确定后续实验采用200μmol／L H2O2作用6h建立模型。与H2O2组比较,10mg／L及20mg／L AST均显著提高细胞存活率（P〈0．01）,使细胞培养液中LDH活性显著降低（P〈0．01）,T—SOD及Mn—SOD活力显著提高（P〈0．01）,MDA含量显著降低（P〈0．01）。10mg/L及20mg/L AST均显著增加H2O2损伤的H9c2细胞p—ERK1／2蛋白的表达（P〈0．01）,当用PD98059（ERK1／2的抑制剂）预处理后,AST的作用则被取消。结论：黄芪苷Ⅳ可以通过ERK1／2通路发挥对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用。