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以感染建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)的蝴蝶兰(Phalaenopsis aphrodite)品种‘满天红’为试材,通过筛选蔗糖预培养浓度、预培养时间、PVS2(Plant vitrification solution 2,PVS2)处理时间三个关键因素,建立蝴蝶兰茎尖小滴玻璃化超低温脱毒体系,将再生的茎尖诱导类原球茎,再分化成苗,经RT-PCR检测CymMV的脱除情况,阴性结果的再生植株进行增殖和诱导生根。结果显示:最佳预培养为:BM+0.6 mol·L-1蔗糖处理1~2 d,超低温茎尖的成活率为70%~76.7%,再生率为53.3%~56.7%;PVS2最佳处理时间为60~90 min,超低温茎尖的成活率为73.3%~76.7%,再生率为50.0%~56.7%。再生植株经RT-PCR检测,CymMV的脱除率为50%。该研究为兰科植物脱除CymMV提供了理论和技术基础。 相似文献
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以携带病毒的‘夏波蒂’马铃薯无菌苗为材料,38℃/4h热处理4周,剥离带1个叶原基的茎尖,接种至不同浓度激素组合的24种MS固体培养基上,22℃/16h培养30d后统计茎尖的愈伤组织诱导率和分化成苗率;RT-PCR检测茎尖再生苗3种病毒(PVX、PVY、PLRV)和纺锤块茎类病毒(PSTVd)的脱毒率。结果表明:茎尖分化成苗最适培养基为MS+1.0mg/L ZT+0.2mg/L NAA+2.0mg/L GA3,愈伤组织诱导率为76.25%,分化成苗率为26.25%;再生苗3种病毒PVX、PVY和PLRV的脱毒率分别为69.4%、91.7%和100%,纺锤块茎类病毒PSTVd脱毒率仅为8.3%,二次茎尖剥离后脱毒率增加到20.8%。 相似文献
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对人参果(Solanum muricatum Ait)茎尖进行离体培养及快速繁殖.结果表明:适于外植体生长分化的培养基是不加任何激素或只加0.2 mg*L-1 NAA的MS培养基;用MS 0.5 mg*L-1 NAA培养基能促进组培苗茎尖快速伸长,有利于茎尖的剥离和脱毒培养;适于茎尖愈伤组织形成和分化的培养基为MS 0.2 mg*L-1 NAA 2.0 mg*L-1 6-BA;适于壮苗快繁的培养基为MS 0.5 mg*L-1 NAA 0.1 mg*L-1 PP333.生物学和电镜检测结果表明,利用0.2~0.3 mm茎尖培养的人参果试管苗已脱除病毒. 相似文献
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太子参脱病毒技术研究 总被引:5,自引:1,他引:4
采用茎尖分生组织法、热处理结合茎尖法、病毒唑处理结合茎尖法对6个不同产地的太子参[Pseudostellaria heterophylla (Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.]组培苗进行了脱病毒研究. 经生物检测、 ELISA法和电镜检测表明, 热处理结合茎尖法脱病毒效果最好,脱毒率高达 100%;病毒唑处理结合茎尖法和茎尖分生组织法脱毒率分别为 79.64%和74.29%.不同产地太子参的脱病毒效果不同.根据实验结果提出了太子参的脱病毒繁育程序,其中复壮培养基中PP333的最适浓度为0.5~1.0 mg·L-1,最适生根培养基为1/2 MS 0.3 mg·L-1 NAA. 相似文献
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泡桐微茎尖培养脱除泡桐丛枝病原(MLO)的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
以感染丛枝病原(MLO)的泡桐组培苗为试材,大量切取长度在0.3mm~0.5mm范围内的微茎尖,在MS和附加0.1mg/LIBA和1~7mg/L6-BA的培养基上进行脱毒试验。根据外植体培养过程的病状有无.病源MLO的DAPI荧光显微镜和电子显微镜检查结果,证明微茎炎培养能够获得脱除泡桐丛枝病原MLO的试管苗,其脱毒率在14.29~28.57%之间。脱毒的两个无性系试管苗经连续继代培养一年以上,其生长性状正常且稳定。试验还显示了微茎炎培养脱毒率受采用的茎尖大小、切割技术、培养基中的激素比例及无性系的不同等因素的影响较大。 相似文献
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以3个芋品种(‘石川早生’、‘虾籽芋’、‘叶用芋)球茎茎尖为外植体,进行脱病毒和快繁的结果表明,外植体表面灭菌的最佳方法是剥鳞片→乙醇→新洁尔灭→剥幼叶→氯化汞;适宜茎尖分化的培养基为MS+1.0-2.0mg·L^-16-BA+0.2mg·L^-1 NAA。生物学方法和电镜观察显示:连续3代0.5-0.7mm茎尖剥离培养对芋花叶病毒(DMV)的脱毒率达100%。在培养基MS+0.2mg·L^-1 NAA中,适量添加6-BA和TDZ,三品种芋的试管苗增殖效果好;附加KT,试管苗生长健壮且利于生根:添加20-100mg·L^-1的精胺(spm),可促进不定芽的发生,与KT配合使用可促使继代增殖和成苗一步完成。完整植株在草炭土:蛭石=1:1的基质中,移栽成活率超过97%,且苗生长健壮。 相似文献
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葡萄是世界上栽培面积和总产量都占第一位的果树。有关葡萄茎尖培养、侧芽培养和无 病毒苗的试管繁殖都有报道。但是试管苗移栽成活率一般较低而且很不稳定,这就使葡萄试管苗(特别是脱病毒试管苗)快速繁殖在生产上的应用受到很大限制。本试验利用光自养培养获得的葡萄试管苗生长发育正常,移栽前练苗时培养基不易污染,可适当延长练苗时间,并且,此试管苗对移栽后的环境条件具有很强的适应能力,成活率高,生长速度快。我们 相似文献
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感染病毒的香石竹组培苗于(38.5±1)℃条件下热处理29d后,切取0.1~0.2mm的茎尖生长点无菌培养成苗后,经DAS-Elisa检测获得脱除香石竹斑驳病毒(Carnation mottle virus,CarMV)的香石竹脱毒苗,取脱毒苗与非脱毒苗的叶片,测量叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素、丙二醛(MDA)、干物质含量几种生理生化指标。结果表明,脱毒苗与非脱毒苗相比:(1)叶绿素和类胡萝卜素含量增加,具有较强的光合效率;(2)与抗性生理有关的MDA含量下降,衰老减缓;(3)光合物质的形成与积累增多,干物质含量增加。 相似文献
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香蕉离体茎尖超低温保存研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以香蕉(Musaspp.)试管苗为试材,对其离体茎尖小滴玻璃化法超低温保存的影响因素进行了研究。小滴玻璃化法和玻璃化法超低温保存后再生率的差异表明,香蕉更适合用小滴玻璃化法进行超低温保存。香蕉小滴玻璃化法超低温保存的方案如下:试管苗在60g/L蔗糖的MS培养基上培养1~2个月,剥离带有1~2片叶原基的茎尖,室温下装载30m in(可延长至4h),0℃下PVS2处理40~50m in。6个基因型的14个品种的再生率平均为46.9%。通过SSR分子标记检测,再生植株的遗传稳定性没有发生改变。该结果为香蕉种质资源的长期保存提供了理论依据和技术支撑。 相似文献
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吊钟花的组织培养技术研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以吊钟花(Enkianthus quinqueflorus Lour.)茎尖及带腋芽的茎段为外植体进行组织培养.结果表明,改良B5培养基(B5大量元素和钙盐+MS有机物、铁盐、微量元素)最有利于吊钟花的培养,外植体在改良B5+2,4D- 1 mg L-1的培养基中,愈伤组织诱导率可达100%.在含BA 1~2 m L-1+NAA0.1~0.5 mg L-1培养基中,可诱导产生不定芽.继代培养以改良B5+BA 1 mg L-1+NAA0.5 mg L-1培养基的增殖系数最高.生根培养基以1/2MS+IBA2 mg L-1为最佳,生根率可达80%以上.试管苗移栽成活率为90%以上. 相似文献
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花卉茎尖培养脱毒与检测 总被引:5,自引:0,他引:5
花卉的病毒病是花卉栽培和球茎生产中的大问题 ,由于采用扦插、分株等繁殖方法 ,都有可能感染 1种或数种病毒 ( Virus)或类病毒 ( Viroids)。长期无性繁殖 ,使病毒积累 ,危害加重 ,使切花质量变劣 ,产花量降低 ,花色不纯 ,生长势削弱 ,如兰花、菊花、香石竹和唐菖蒲等 ,都有去除病毒的问题。病毒脱除技术 ,通常采用热处理和茎尖培养来实现。有些病毒经热处理 ,即植株种植在35~ 38℃条件下 2个月可达到使病毒失活的去毒效果。有些病毒用热处理难以奏效 ,须通过茎尖培养实现。1 茎尖培养的原理开创这一繁殖方法的是法国人 Morel。他在 196… 相似文献
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盾叶薯蓣试管株芽的诱导 总被引:10,自引:0,他引:10
以盾叶薯蓣(Dioscoreazingiberensis)试管植株为材料,选取带芽茎段为外植体,转接到株芽诱导培养基上15d后,原茎段基部开始产生株芽突起,30d后每一茎段可产生3-5个已生根的株芽,株芽诱导率为100%,株芽诱导数为180个/40株,其移栽成活率可达90%以上。株芽形成的适宜培养条件:温度为26±2℃,光照时间14hd-1,光照强度为1500-2000lx;适宜培养基组成为:MS+6-BA4.0mgL-1+IBA1.0mgL-1+蔗糖6%-9%+活性炭0.5%+琼脂7%。离体诱导的盾叶薯蓣试管株芽能直接发育为新植株,为盾叶薯蓣的快繁提供了一种新的方法。 相似文献
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以三倍体枇杷为材料, 研究了不同消毒方式、MS培养基浓度、植物生长调节剂及浓度配比对茎尖培养及诱导生根的影响。结果表明, 初代培养时, 选择生长饱满、健壮的顶芽及适宜的消毒方式, 外植体剥离长度0.5-0.8 cm, 能显著提高茎尖培养的成活率; MS培养基浓度的变化对外植体的褐化没有明显的影响; 最适茎尖的启动培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA, 成活率高达84.8%; 最适组培苗生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L-1 NAA+0.01 mg·L-1 IAA+0.3%活性炭, 生根率达66.7%, 每株平均生根2.83条。该研究结果将为三倍体枇杷再生体系的建立及利用转基因技术对三倍体无籽枇杷进行遗传改良奠定基础。 相似文献
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成年态南丰蜜橘试管嫁接育苗技术研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为探索适合成年态南丰蜜橘[Citrus reticulata Blanco‘kinokuni’(Tanaka)H.H.Hu]的快速繁殖技术,对其试管茎尖微嫁接育苗进行研究。结果表明,最好的砧木是苦柚种子苗,以腹接方式的成活率最高。嫁接苗接种在MS+GA3 1 mg L–1+蔗糖75 g L–1的培养基中,暗培养7 d后转入光周期下培养,嫁接成活率达67.78%。不同移栽基质对嫁接苗的成活率影响不显著。嫁接苗与成年态南丰蜜橘再生芽在形态和POD、CAT及SOD同工酶分子表达上均无明显差异。这表明通过试管茎尖微嫁接技术可保持其遗传稳定性。 相似文献