β淀粉样肽引起的自由基与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病 (Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＤ)是一种中枢神经系统退行性疾病 ,主要病理特征是大脑皮层和海马区域出现斑块及神经元纤维缠结 ,斑块以淀粉样肽 (β ａｍｙｌｏｉｄｐｅｐ ｔｉｄｅ ,Ａβ)为核心成分。近年来研究证明Ａβ与ＡＤ的发病直接相关。1 .淀粉样蛋白质前体与Ａβ结构和生物功能中枢神经系统神经元、星形细胞、小胶质细胞、少突胶质细胞和内皮细胞均能表达淀粉样蛋白质前体 (ａｍｙｌｏｉｄｐｅｐｔｉｄｅｐｒｅｃｕｒｓｏｒ,ＡＰＰ)。ＡＰＰ基因位于 2 1号染色体的长臂中段部分 (2 1ｑ2 1 .2 ) ,它编码一组…     

胆固醇与阿尔茨海默病

胆固醇与心血管病的关系已众所周知 ,但胆固醇在阿尔茨海默病 (ＡｌｚｈｅｉｍｅｒＤｉｓｅａｓｅ ,ＡＤ)中的作用 ,还未引起人们的重视。最近Ｍａｒｘ在 2 0 0 1年 1 0月 2 6日《科学》(Ｓｃｉｅｎｃｅ ,Ｖｏｌ2 94:50 8)上发表了一篇简单的综述 ,从细胞、动物实验到临床 ,用降胆固醇药他丁类(ｓｔａｔｉｎｓ)观察了胆固醇与 β淀粉样肽 (β ａｍｙ ｌｏｉｄｐｅｐｔｉｄｅ ,Ａβ)多肽形成的关系 ,证实高胆固醇是ＡＤ的危险因素。1 0年前法医病理学家Ｓｐａｒｋｓ发现在意外死亡者的尸体中 ,凡是有心脏病者 ,在脑内都有含淀粉样变异的斑块 …     

胱天蛋白酶（caspase）的前结构域

胱天蛋白酶 (ｃａｓｐａｓｅ)是白细胞介素 1β转化酶(ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ 1βｅｎｚｙｍｅ ,ＩＣＥ)家族的总称 ,Ｃａｓｐａｓｅ(ｃｙｓｔｅｉｎｅａｓｐａｒｔａｔｅ ｓｐｅｃｉａｌｐｒｏｔｅａｓｅｓ)的含义是该类蛋白酶的活性部位为极为保守的半胱氨酸 (ｃｙｓｔｅｉｎｅ)残基 (取第一个字母“ｃ”) ,又特异性切割底物的天冬氨酸 ,用“ａｓｐａｓｅ”表示 ,简称ｃａｓｐａｓｅ ,该酶在细胞凋亡过程中起关键作用 ,是目前研究的热点。现已发现的ｃａｓｐａｓｅ有 14种 ,它们均以无活性的酶原的形式存在 ,包括一个Ｎ末端前结构域 (ｐ…     

老年痴呆症研究新进展—与Aβ蛋白形成相关的两个蛋白水解酶的发现

老年痴呆症 (Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＤ)是一种神经退行性疾病 ,是人生中、老年期最常见的痴呆病症。据估计 ,7%～ 1 0 % 6 5岁以上、40 % 80岁以上的老年人患有该病[1,2 ] 。对ＡＤ的研究 ,阐明其致病机制 ,是科学家们不懈努力的方向。越来越多的证据表明 ,Ａβ蛋白 ( β ａｍｙｌｏｉｄｐｒｏｔｅｉｎ)在ＡＤ致病分子机制中处于中心位置[3 ] 。在ＡＤ的致病机理中 ,与Ａβ蛋白形成直接相关的两个蛋白水解酶———β及γ 分泌酶 ( β ｓｅｃｒｅｔａｓｅ和γ ｓｅｃｒｅｔａｓｅ)是何物 ,一直是个悬而未决的问题。然而 ,…     

stNI同功酶限制 修饰系统基因的表达检测和定位分析

鉴定了Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１和ＪＭ１１０的部分遗传标记,作为受体菌分别用于ＢｓｔＮＩ同功酶限制－修饰系统中限制性内切酶（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ,简称Ｒ）基因和甲基化酶（Ｍｅｔｈｙｌａｓｅ,简称Ｍ）基因表达的检测。用外切酶ＩＩ单向删切含ＲＭ基因的ＤＮＡ片段,获得２３个缺失突变亚克隆。通过检测各亚克隆表达的Ｒ酶和Ｍ酶活性,将Ｒ和Ｍ基因分别定位在距克隆位点ＰｓｔＩ的０２→１４ｋｂ和１５→３．３ｋｂ范围内。分析表明：该系统属于Ｉ类限制修饰系统,两个基因受控于不同的启动子;该系统与Ｅ．Ｃｏｌｉ染色体编码的胞嘧啶ＤＮＡ甲基转移酶（Ｄｃｍ）的识别序列相同,后者的甲基化作用也能阻止Ｒ酶的切割。Ｒ＋Ｍ－的重组质粒对Ｄｃｍ＋和Ｄｃｍ－的宿主都是致死性的,这说明在进化过程中,与Ｒ基因紧密连锁的Ｍ基因对系统的存在至关重要     

RNA酶对前列腺癌生长的影响

最近科学家在研究有数名男子罹患前列腺癌的家族中 ,鉴定了一个位于 1号染色体的肿瘤抑制基因 .虽然最近才发现这个与前列腺癌相关的基因 ,但对该基因的研究从 2 0世纪 70年代就开始了 .该基因编码 1个称为ＲＮａｓｅＬ的酶 ,其降解ＲＮＡ .该基因的缺陷与前列腺癌的关系是首例与ＲＮＡ有关的肿瘤抑制事件 .研究者称自 1996年以来 ,他们一直在追踪遗传性前列腺癌的基因 .现在已找到该基因位于 1号染色体上 .研究者已经在受前列腺癌困扰的 2个家族中找到ＲＮａｓｅＬ的基因遗传突变 .现在将他们的发现披露于 2 0 0 0年 2月的ＮａｔｕｒｅＧｅ…     

竞争性PCR检测MLC_2-糜酶融合基因在转基因小鼠中的组织特异性表达

 用竞争性 Ｐ Ｃ Ｒ 方法定量检测了大鼠肌球蛋白轻链 ２ 启动子（ｍ ｙｏｓｉｎ ｌｉｇｈｔ ｃｈａｉｎ ２ ｐｒｏｍ ｏｔ ｅｒ, Ｍ Ｌ Ｃ２） 糜酶（ｃｈｙｍ ａｓｅ）融合基因在转基因小鼠不同组织中的表达情况,发现 Ｍ Ｌ Ｃ２ ｃｈｙｍ ａｓｅ融合基因在转基因小鼠的心脏中有较高水平的表达,在骨骼肌中表达水平较低,在肾脏中有微弱表达;而在肝脏和肺中未检测到．表明 Ｍ Ｌ Ｃ２ ｃｈｙｍ ａｓｅ 融合基因改变了野生型 ｃｈｙｍ ａｓｅ 在生物体内的表达特性,不仅提高了表达效率,而且赋予了一定的心脏组织特异性,为进一步研究 ｃｈｙｍ ａｓｅ 基因在心脏中的功能奠定了基础．     

前列腺癌基因的发现

长期以来 ,科学家鉴定前列腺癌的基因未获成功。而去年在费城举行的美国人类遗传学会大会上 ,宾夕法尼亚大学医学院的ＴｉｍｏｔｈｙＲｅｂｂｅｃｋ与ＭｙｒｉａｄＧｅｎｅｔｉｃｓ的ＳｅａｎＴａｖｔｉｇｉａｎ报告了他们新发现前列腺癌相关基因的研究。Ｍｙｒｉａｄ的研究者对犹他州摩门教信徒家族进行了ＤＮＡ分析 ,在这个罕见的家族中有许多成员罹患前列腺癌 ,他们在这些前列腺癌患者中鉴定了一个基因 ,该基因在前列腺癌患者中发生突变 ,而在非前列腺癌者中则不发生突变。该基因所表达的蛋白质的特征提示其可以与ＤＮＡ相结合 ,甚至可以…     

突变和修饰β淀粉样蛋白与阿尔茨海默病

淀粉样蛋白级联假说是阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)病因学的核心,但在过去几年中,靶向淀粉样斑块并未实现成功的免疫治疗.最近几年,不同形式的β淀粉样蛋白(Aβ)引起人们的关注.本文总结了关于早发性AD患者大脑中不同Aβ突变体和散发性AD患者大脑中已经鉴定出的经过酶切及修饰产生的不同形式Aβ的...     

匙叶翼首花的化学成分

从药用植物匙叶翼首花（Ｐｔｅｒｏｃｅｐｈａｌｕｓ ｈｏｏｋｅｒｉ）中分离了７个化合物。通过波谱分析及已知物数据对照,分别鉴定为ｓｏｎｇｏｒｏｓｉｄｅＡ⑴,ｌｏｇａｎｉｎ⑵,软脂酸（ｐａｌｍｉｔｉｃ ａｃｉｄ,３）,乌索酸（ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ,４）,齐墩果酸（ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ,５）,β－谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ,６）,β－龙胆二糖（β－ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ,７）,其中２是     

抗胃癌鼠单抗3Gg轻链可变区基因的克隆和序列分析

本文报导了用ＰＣＲ方法（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ）从抗胃癌单抗３Ｇｇ杂交瘤细胞的基因组ＤＮＡ中,扩增出３３３ｂｐ的轻链可变区基因,克隆至ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ Ⅱｋｓ ＋／－载体上,筛选到阳性克隆。核苷酸序列分析表明：有５３％的核苷酸序列与抗体基因库中的一般序列相符。证明已获得抗胃癌单抗轻链可变区基因。     

抗胃癌鼠单抗3G_9轻链可变区基因的克隆和序列分析

本文报导了用ＰＣＲ方法（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ）从抗胃癌单抗３Ｇ９杂交瘤细胞的基因组ＤＮＡ中,扩增出３３３ｂｐ的轻链可变区基因,克隆至ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡｋｓ十／一载体上,筛选到阳性克隆。核苷酸序列分析．表明：有５３％的核苷酸序列与抗体基因库中的一般序列相符。证明已获得抗胃癌单抗轻链可变区基因．     

酶解淀粉样前体蛋白的β分泌酶研究进展

β淀粉样蛋白（β－Amyloid,Aβ）是阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD)病人脑中老年斑（senile plagues,SP)的主要成分。β分泌酶（β－secretase)是水解淀粉样前体蛋白（amyloid protein precursor,APP)产生β淀粉样蛋白所必须的。多年来众多科学家一直在寻找β分泌酶。最后三个研究组通过不同的研究途径各自独立发现了具有β分泌酶活性的酶,该酶很可能就是寻觅已久的β分泌酶。β分泌酶的发现不仅为药物设计提供了依据,而且为β淀粉样蛋白的生物学研究提供了线索。     

点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶基因克隆与序列测定

点状产气单胞菌点状亚种（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｐｕｎｃａｔａ ｓｕｂｓｐ．ｐｕｎｃｔａｔａ）具有脯氨酰内肽酶（ｐｒｏｌｙｌ ｅｎｄｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ ＰＥＰ）活性。将其染色体ＤＮＡ有Ｅｃｏ ＲⅠ部分酶切后回收８－１６ｋｂ的ＤＮＡ片段,与ＥｃｏＲⅠ消化载体ｐＵＣ１８连接后转化Ｅ．ｃｏｉｌ ＤＨ５α,用该酶的专一性底物Ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ－Ｇｌｙ－β－ｎａｐｈｔｈｙｌａｍｉｄｅ从质粒库中     

水青树和昆栏树茎皮的化学成分

用化学和波谱分析方法从水青树（Ｔｅｔｒａｃｅｎｔｒｏｎ ｓｉｎｅｎｓｅ Ｏｌｉｖ．）茎皮中分离鉴定了５个化合物,分别为丁香甙（ｓｙｒｉｎｇａｎｉｄｅ）、儿茶素（ｃａｔｅｃｈｉｎ）、β－谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ）、胡萝卜甙（ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ）和白桦脂醇（ｂｅｔｕｌｉｎ）,均为从该种植物中首次分得。从昆栏树（Ｔｒｏｃｈｏｄｅｎｄｒｏｎ ａｒａｌｉｏｉｄｅ Ｓｉｅｂ．ｅｔＺｕｃｃ．）茎皮中     

缺铁胁迫的铁转运激活蛋白—AFT1

酵母（Ｘｃｃｈａｒｏａｐｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓ功ｅ）是一种优良的研究许多真核细胞的基础代谢过程的模式生物。１９９５年,美国科学家（Ｙａｍａｐｏｃｈｉ－ｌｗａｉｅｔａｌ）利用筛选铁代谢异常的酵母突变体方法,克隆并鉴定了铁转运激活蛋白（ＡｎｆｆｅｈＶａｔＯＦＯｆｆＣＩＴＯＵＳｔａｐｏｆｔ,ＡＦＴＩ）ｌ‘］。将酵母ｆｒｅｌ的５’上游区融合到ｈｉｓ３基因上,由于铁对ｆｒｅｌ启动子的影响,这种结构在铁充足的条件下,不能表达,转化到不含有ｈｉｓ３的酵母细胞中后,细胞在高铁缺组氨酸的培养基上死亡,将少数存活的突…     

浑球红细菌Rhodobacter sphaeroides吸氢酶（hup）基因簇的分离 …

以Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ ｃａｐｓｕｌａｔｕｓ的ｈｕｐＳ‘Ｌ基因ＤＮＡ片段为探讨,通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,从构建的Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ ６０１基因库中调取ｈｕｐ基因。阳性克隆Ｃｏｓｍｉｄ１可与Ｈｕｐ突变株ＪＰ９１,ＲＣＣ８以及ＢＳＥ８互补,而Ｃｏｓｍｉｄ３和Ｃｏｓｍｉｄ９只能与ＢＳＥ８互补。试验所产生的接合转移子均恢复了吸氢酶的活性和自养生长能力。     

用基因枪法将GUS基因导入烟草脱外壁花粉及其瞬间表达

以β－葡糖苷酸酶（β－ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ,ＧＵＳ）基因作为报告基因,用基因枪法将其导入烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）脱外壁花粉和作为对照系统的完整花粉,探讨了启动子及不同轰击条件对外源基因瞬间表达的影响,比较了二者的转化频率。结果表明：玉米花粉特异启动子能启动ＧＵＳ基因在脱外壁花粉和完整花粉中表达,而ＣａＭＶ３５Ｓ启动子则不能。靶距离越近,着弹率越高,ＧＵＳ基因瞬间表达频     

与提高糖尿病危险率相关的基因

科学家新近鉴定了一个称为ＣＡＰＮ10的基因 ,该基因发生某些普遍的变异 ,便明显提高了成年发作型 ,即ＩＩ型糖尿病的危险性。该基因位于第 2号染色体上 ,它编码钙蛋白酶 10 ,该酶是蛋白水解酶 ,目前对它了解甚少。在 2 0 0 0年 10月份的ＮａｔｕｒｅＧｅｎｅｔｉｃｓ上 ,科学家报道了在墨西哥 美国人中 ,ＣＡＰＮ10的变异可能使糖尿病的危险率提高 3倍。ＣＡＰＮ10的变异可以产生 3个特异性变异的译本 ,或在基因ＤＮＡ序列内部含有单个核苷酸多态性 (ＳＮＰｓ)。4年前 ,科学家检查墨西哥 美国人中 346对患有糖尿病的同胞兄弟姐妹的染色…     

耐碱性真菌纤维素酶生产菌的筛选及酶学性质的初步研究

从造纸厂碱性土样中分离到２４株能够产生纤维素酶的真菌,经过摇瓶昨筛,选出一株耐碱性纤维素酶产生菌Ｓ６０７。经过鉴定。该菌株为黑色葡萄装穗霉（Ｓｔａｃｈｙ－ｂｏｔｒｙｓ ａｔｒａ）。通过对其粗酶液的性质进行测定,该菌所产纤维素酶粗酶液中的ＦＰＡ、ＣＭＣａｓｅ和β－葡萄糖苷酶的最适ｐＨ分别为６．０,６．０和６．５,其中内切酶在ｐＨ９．０时仍能保持最高酶活力的５０％以上,实验表明该菌株所产纤维素酶具有较