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动物克隆技术的研究进展 总被引:11,自引:0,他引:11
胚胎发育过程是核质之间、细胞与细胞及细胞与胞外基质按严格的时空秩序相互作用的结果。从全能或多能胚胎干细胞分化为具有独特功能的体细胞,完全取决于基因在时间与地点上的选择性表达。对细胞分化和发育来说,最重要的不是个别基因的表达,而是整个基因网络在时间和空间上的紧密联系和配合。组成包括人体在内的高等动物机体的亿万个细胞,都是由一个受精卵发育而来的。像胚胎干细胞一样,分化了的体细胞仍然具有一整套完整的遗传信息。过去人们认为,细胞的分化程度越高,它指导早期胚胎发育成新个体的能力就越低,高度分化的体细胞甚至完全不具… 相似文献
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豚鼠生长激素受体及其突变体在哺乳动物细胞中的功能性表达 总被引:1,自引:1,他引:0
采用RT PCR克隆得到豚鼠生长激素受体cDNA。序列同源比较显示生长激素受体的一些功能性保守氨基酸在豚鼠生长激素受体中被其他氨基酸所取代。例如 ,哺乳动物生长激素受体中保守的第 170位组氨酸和第 333位酪氨酸分别是受体二聚化和生长激素刺激蛋白质合成及脂生成所必需的 ,但在豚鼠生长激素受体中分别被酪氨酸和丝氨酸所取代。为此 ,采用定点突变法得到了突变体gpGHRY16 8H和 gpGHRS332Y ,并构建了表达质粒 pcDNA3 gpGHR ,pcDNA3 gpGHRY16 8H和pcDNA3 gpGHRS332Y。借助COS 7和CHO细胞 ,研究了豚鼠生长激素受体及其突变体的生物活性。实验表明转染了pcDNA3 gpGHR的COS 7细胞对牛生长激素具有高亲和性 [Ka=1.3× 10 9(mol/L) -1],并且用鼠抗生长激素受体单克隆抗体mAb2 6 3可检测到一分子量约 92kD的蛋白质。在CHO细胞中 ,虽然两个氨基酸的定点突变不影响受体与配体的结合 ,但都提高了生长激素刺激的蛋白质合成而降低生长激素刺激的脂肪生成。蛋白质印迹实验揭示突变体 gpGHRY16 8和gpGHRS332Y分别降低和提高了生长激素诱导的JAK2酪氨酸磷酸化。因此 ,报道了豚鼠生长激素受体在生长激素代谢功能中的调节作用以及受体中保守氨基酸的取代导致配体结合后信号转导的变化。 相似文献
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胰岛素B链C端及B29Lys氨基在胰岛素促生长功能中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
利用结晶紫测定细胞生长的方法,在96孔板培养的小鼠乳腺癌细胞GR2H6中,建立了胰岛素促细胞生长活力的测定体系。该方法具有灵敏度高,重复性好,操作简便,周期短及便于大量样品分析测试的优点。利用该方法研究了胰岛素B链C端延长与缩短的类似物和胰岛素侧链氨基对胰岛素促生长活性的影响。结果显示,胰岛素B链C端在胰岛素的促生长活性中有重要作用;B链29Lys氨基对促生长活性也有较大贡献。 相似文献
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经1×10-6mol/L视黄酸诱导的P19细胞体外可向神经方向分化,接种于多聚赖氨酸(polyDlysine)和纤连蛋白(fibronectin)包被的玻片后,细胞逐渐聚集成团,此时细胞的贴壁性较差,进行原位分子杂交时容易脱落。我们尝试在细胞表面覆盖一层明胶,减少了细胞的脱落,又比较了蛋白酶K和胃蛋白酶对细胞蛋白质的消化作用,确定胃蛋白酶可较温和地消化细胞蛋白质,使探针有效地透入结合,杂交后细胞亦能较完整地保留于玻片上。 相似文献
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老年痴呆症研究新进展—与Aβ蛋白形成相关的两个蛋白水解酶的发现 总被引:4,自引:0,他引:4
老年痴呆症 (Alzheimer′sdisease ,AD)是一种神经退行性疾病 ,是人生中、老年期最常见的痴呆病症。据估计 ,7%~ 1 0 % 6 5岁以上、40 % 80岁以上的老年人患有该病[1,2 ] 。对AD的研究 ,阐明其致病机制 ,是科学家们不懈努力的方向。越来越多的证据表明 ,Aβ蛋白 ( β amyloidprotein)在AD致病分子机制中处于中心位置[3 ] 。在AD的致病机理中 ,与Aβ蛋白形成直接相关的两个蛋白水解酶———β及γ 分泌酶 ( β secretase和γ secretase)是何物 ,一直是个悬而未决的问题。然而 ,… 相似文献
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Fmoc固相方法合成人胰岛素B链及人胰岛素的半合成 总被引:2,自引:0,他引:2
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不同种属动物血清转铁蛋白促癌细胞生长作用的比较史民景乃禾1冯佑民(中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室,上海200031;1中国科学院上海生物化学研究所,上海200031)关键词血清转铁蛋白;细胞增殖;小鼠乳腺癌细胞转铁蛋白(tran... 相似文献