8种甜荞的种子消毒及愈伤组织诱导和增殖条件

8 种甜荞种子表面消毒所适用的消毒剂和处理时间有所不同。10%H₂O₂ 溶液处理150min, 对榆3-3、黎麻道、浦江荞、龙山荞和富源红花荞的种子有很好的消毒作用, 并且处理以后种子仍具有很高的萌发率。8621、B 大粒和美国荞种子的消毒以0.1%的HgCl2 处理12min 效果为好。在无菌苗子叶和下胚轴外植体脱分化形成愈伤组织的过程中, 2, 4-D 起主要作用, BA 起独特的作用。BA 与2, 4-D 配合使用对于愈伤组织的诱导和增殖具有良好的促进作用。高浓度的2, 4-D 或低浓度的2, 4-D 与BA 配合使用都可抑制愈伤组织分化根。     

8种甜荞的种子消毒

8种甜荞种子表面消毒所适用的消毒剂和处理时间有所不同。10%H2O2溶液处理150min,对榆3-3、黎麻道、浦江荞、龙山荞和富源红花荞的种子有很好的消毒作用,并且处理以后种子仍具有很高的萌发率。8621、B大粒和美国荞种子的消毒以0.1%的HgCl2处理12min效果为好。在无菌苗子叶和下胚轴外植体脱分化形成愈伤组织的过程中,2,4-D起主要作用,BA起独特的作用。BA与2,4-D配合使用对于愈伤组织的诱导和增殖具有良好的促进作用。高浓度的2,4-D或低浓度的2,4-D与BA配合使用都可抑制愈伤组织分化根。     

大叶紫花苜蓿愈伤组织原生质体再生植株

大叶紫花苜蓿下胚轴诱导的愈伤组织在继代培养基上生长快速,易于分散。继代第１２ｄ的愈伤组织原生质体的得率为６．５×１０７／ｇ鲜重。原生质体培养基为ＳＨ基本培养基,含有１．０ｍｇ／Ｌ２,４－０、０．５ｍｇ／ＬＢＡ、２．０ｇ／ＬＣＨ、２％蔗糖、６％葡萄糖、５ｍｍｏｌ／ＬＭＥＳ,培养密度为１．０×１０５／ｍＬ。培养至第１２ｄ时的原生质体再生细胞植板率为３．７％。由原生质体形成的小愈伤组织在含２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ固体培养基上大量增殖。增殖的愈伤组织转移至２．０ｍｇ／Ｌ２－ｉｐ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ的Ｂ５培养基上,形成体细胞胚并发育成完整植株。     

小麦叶片愈伤组织及其再生植株的诱导

小麦幼苗基部外植体在补加２,４－Ｄ的ＭＳ、Ｎ６、ＢＡ１（３）培养基上均可诱导出愈伤组织,２,４－Ｄ的最适浓度为２．０ｍｇ／Ｌ;愈伤组织的增殖速度与切段部位及基本培养基有关,其中在以ＭＳ补加２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的培养基上诱导出的愈伤组织增长速度最快;最后讨论了小麦愈伤组织幼苗诱导率低的原因及可能解决的方法。     

扁蓿豆体细胞胚的诱导和植株再生

扁蓿豆实生苗的根、下胚轴、子叶、叶片和叶柄外植体,在含２,４—Ｄ２—０．２５ｍｇＬ－１与ＫＴ０．２５－２ｍｇＬ－１及２,４—Ｄ０．５ｍｇＬ－１与ＺＴ０．５ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．５ｍｇＬ－１与ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ琼脂培养基上均可产生愈伤组织．愈伤组织在含２,４—Ｄ０．５—０．１ｍｇＬ－１与ＫＴ０．５—０．１ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．２５＋ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ培养基上可诱导分化出体细胞胚．体细胞胚在无激素的培养基上发育成完整植株．用海藻酸钠包襄体细胞胚制成人工种子,其发芽率和植株转换率分别为９５％和５３％．     

百脉根愈伤组织原生质体再生植株

百脉根无菌苗幼茎在含２．０ｍｇ／Ｌ－,２,４－Ｄ,０．１ｍｇ／Ｌ２－ｉｐ的ＭＳ培养基上诱导和继代培养愈伤组织。选取绿色松散颗粒愈伤组织分离原生质体。原生质体培养在调整珠ＫＭ８Ｐ,Ｖ－ＫＭ,ＭＳ和ＳＨ培养基上「含３００ｍｇ／Ｌ,ＣＨ,２％ＣＷ,２％蔗糖,６％葡萄糖,２．０ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ,０．５ｍｇｇ／Ｌ,ＢＡ,５ｍｍｏｌ／Ｌ ＭＥＳ」,原生质体再生细胞均能分裂,并形成小愈伤组织,但以ＫＭ８０为     

云南红豆杉愈伤组织诱导和组织培养

云南红豆杉愈伤组织的诱导频率为Ｗｈｉｔｅ〉ＭＳ〉Ｂ５,其中最高达８０％,叶片和种子之间差异不大,但不同时期的叶片差异较大,以嫩叶诱导为佳,激素配比以２,４－Ｄ２．０－３．０ｍｇ／Ｌ,ＢＡＰ０．５－１．０ｍｇ／Ｌ为宜,在继代培养阶段,Ｂ５比Ｗｈｉｔｅ和ＭＳ更适合细胞的快速生长、繁殖,并且有利于克服组织的褐化,适合于细胞生长的激素配比也以２,４－Ｄ２．０－３．０ｍｇ／Ｌ,ＢＡＰ０．５－１．０ｍｇ／Ｌｏ     

红豆草耐盐愈伤组织的筛选及植株再生

将红豆草种子在含１．２％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基上萌发以消除盐敏感的幼苗,把存活的幼苗下胚轴切段在含１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ、０．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ及１．２％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织,通过连续筛选得到可耐受１．８％ＮａＣｌ的愈伤组织,在有０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ和１ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ存在下该愈伤组织分化出芽,待幼,待幼苗长至３ｃｍ左右时转至含２ｍｇ／ＬＮＡＡ和或ＩＢＡ的１／２ＭＳ培养基上生根。对对照     

青Qian愈伤组织在继代培养中的分化能力及染色体稳定性研究

青Ｑｉａｎ胚性愈伤组织在改良５９附加２,４－Ｄ及Ｋｔ及１ｐｐｍ的培养基上继代３年（每月继代１次）,仍具有旺盛的增殖能力,在胚性愈伤组织转入１／２改良５９并附加ＡＢＡ１ ｐｐｍ的分化基上,约３个月左右可分化出大量体细胞胚,体细胞胚分化率达０％以上,经继代３年的胚性愈伤组织细胞的染色体倍性十分稳定,其染色体数及核型为２ｎ＝２４＝１６ｍ（６ｓｃ）＋８ｓｍ＋２Ｂ。这一结果与由实生苗根尖压片所得结果基本一致     

碱蓬茎段培养再生植株的研究

将碱蓬（ＳｕａｅｄａＦｏｒｓｋ）种子经消毒后分别接种在４种不同ｐＨ值的培养基上,两天后观察发现以ｐＨ７培养基上的种子出苗最快,出苗率最高。６ｄ时观察,在ｐＨ９的培养基上也有较高的出苗率。用上述无菌苗茎段为外植体,分别接种在４种不同生长素的培养基上均能产生愈伤组织,除含有２,４Ｄ的培养基外,其它３组愈伤组织的诱导频率均达到１００％。把愈伤组织移到添加ＢＡＰ与ＩＡＡ的分化培养基上,三个星期后由愈伤组织分化出不定芽,分化频率为１２５％。当不定芽长至１５ｃｍ～２ｃｍ时转入生根培养基,两个星期后长出白色的根,获得完整植株。     

激素对枸杞体细胞胚发生及可溶性蛋白质含量和组分的影响

以宁夏枸杞无菌苗叶片为材料,对体细胞胚发生过程中激素作用、可溶性蛋白质变化及体细胞胚发生频率进行了研究。发现不同激素处理、可溶性蛋白质含量、组分和体细胞胚发生频率均有一定的差异,三者之间存在着相关性。结果如下：（１）ＭＳ＿１、ＭＳ＿２和ＭＳ＿３三种培养基上继代的愈伤组织难以诱导形成体细胞胚,为非胚性愈伤组织;而从ＭＳ＿１、ＭＳ＿２和ＭＳ＿３分别转到ＭＳ＿０和ＭＳ＿４培养基上的愈伤组织体细胞胚发生频率高,属于胚性愈伤组织。其中以ＭＳ＿３转至ＭＳ＿０后的体细胞胚发生频率最高。（２）可溶性蛋白质ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：非胚性愈伤组织有特异性蛋白质６７ｋＤ,胚性愈伤组织有特异性蛋白质３５ｋＤ和４４ｋＤ;蛋白质３３ｋＤ和６７ｋＤ受２,４－Ｄ调控,蛋白质４９ｋＤ、５７ｋＤ受６ＢＡ调控,而蛋白质３７ｋＤ、５１ｋＤ受２,４－Ｄ和６ＢＡ协同调控。     

在1／3海水培养基上筛选豆瓣菜耐盐变异体

系统地研究了豆瓣菜（ＮａｓｔｕｒｔｉｕｍｏｆｆｉｃａｉｎａｌｅＲ．Ｂｒ）茎段外植体对６－ＢＡ,ＮＡＡ和２,４－Ｄ的反应,确定了ＭＳ培养基附加６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ０．２ｍｇ／Ｌ为豆瓣菜愈伤组织诱导,继代培养基;ＭＳ培养基附加６－ＢＡ４．０ｍｇ／Ｌ为芽再生培养基;ＭＳ基本培养基为植株的生根的扦插繁殖培养基,将３２５个豆瓣菜茎切段外植体接种到含１／３海水的愈伤组织诱导培养基上,１７块外植体     

中麻黄悬浮培养体系的建立

本文用中麻黄无菌苗为外植体,其切段培养在附加２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ　６　ＢＡ的ＭＳ培养基上,全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋４％蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养,培养基为附加０．２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２％蔗糖的ＭＳ液体培养基,得到分散性好,细胞形状接近圆形,细胞大小均一,细胞团多由２－３０个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为０．３５ｇ·ｆｗ／２０ｍｌ·ｄ,细胞有丝分裂指数为１１．２％。条件培养和高密度接种可缩短延迟期,条件培养不能提高分裂指数,１ｇ／１０ｍｌ接种密度可使分裂指数提高至２１．２％。     

沙葱的组织培养和植株再生

１植物名称沙葱（Ａｌｌｉｕｍｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ），又名蒙古韭。种子来源于中国科学院沙漠研究所宁夏沙坡头沙漠试验站。２材料类别幼苗的叶片。３培养条件（１）愈伤组织诱导培养基：ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＫＴ０．２＋ＣＨ（水解酪蛋白）５００＋蔗糖３％；（２）分化培养基同（１），但２，４－Ｄ为０．５；（３）生根培养基：１／２ＭＳ＋１ＢＡ１．０＋蔗糖３％。上述培养基均加０．７％琼脂粉固化，ｐＨ调至５．８～６．２。培养温度（２５±２）℃。愈伤组织诱导阶段为暗培养，分化阶段每日光照１２…     

海甘蓝愈伤组织再生植株的研究

海甘蓝种子在附加有２～５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０１ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基上,幼苗生长健壮。幼苗的下胚轴和子叶柄在ＭＳ＋１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的培养基上可以获得较好的愈伤组织。将来源于下胚轴的愈伤组织培养于含有０５ｍｇ／ＬＮＡＡ,２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的ＭＳ培养基上分化出的丛生芽状态最好。最佳生根培养基为１／２ＭＳ＋０５ｍｇ／ＬＢＡ。     

硬粒小麦单倍体原生质体培养及植株再生

由硬粒小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｄｕｒｕｍ Ｄｅｓｆ．）×玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓＬ．）建立的单倍性胚性愈伤组织,在继代培养４ 个月后置于含２．０ ｍ ｇ／Ｌ２,４－Ｄ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ液体培养基中进行悬浮培养,４ 个月后形成了生长迅速、由大小不同（０．５ ～５ ｍ ｍ ）的愈伤组织块组成的愈伤组织悬浮系。酶解试验表明,２．０％ 纤维素酶ＲＳ和０．５％ 的离析酶效果最好,而液体悬浮培养物和固体培养的愈伤组织（在酶解时用锋利的解剖刀片切成１ ｍ ｍ 左右的小块）都能释放出大量原生质体,但悬浮培养物释放出的原生质体状态较好,胞质更浓厚,用ＫＭ８ｐ 培养基以琼脂糖包埋培养方式培养时分裂频率可达５％ 左右。由原生质体再生的小愈伤组织经增殖、筛选后可获得胚性愈伤组织,将其转移至分化培养基Ⅰ（０．２ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ、１．０ ｍ ｇ／Ｌ ＢＡＰ、０．１ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ 水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ固体培养基）和Ⅱ（不含２,４－Ｄ,其它成分同Ⅰ）上进行分步分化培养可再生出完整植株,分化频率约为２０％     

外源激素对金钱松胚外植体愈伤组织的诱导及其器官发生的调节作用

金钱松胚外植体在培养过程中由于外源激素的种类和配比的不同而存在着几种发育途径：直接从胚外植体表面分化不定芽;先诱导愈伤组织,再从愈伤组织分化不定芽;还可由愈伤组织分化出胚状体。激素ＢＡ对外植体不定芽的诱导起着关键作用。激素２,４－Ｄ则诱导愈伤组织,ＢＡ与２,４－Ｄ配比恰当诱导的愈伤组织分化出体细胞胚状体。　ＬＰ’附加低浓度的ＢＡ或ＫＴ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）促进不定芽茎的伸长;　ＬＰ’附加浓度的ＩＢＡ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）诱导不定根的发生。愈伤组织在基本培养基浓度为　×ＬＰ’或１×ＬＰ’的分化培养基上不定芽诱导率相似。     

深山含笑的组织培养和快速繁殖

组织培养深山含笑的实验结果表明：利用休眠芽和种子萌发时实生苗的上胚轴及下胚轴为外植体均能诱导出愈伤组织和不定芽,其中无菌实生苗的上胚轴最易诱导出不定芽,无菌实生苗的下胚轴最易诱导出愈伤组织。外体植体在ＭＳ＋１．０－２．０ｍｇ Ｌ＾－１ ２,４－Ｄ培养基上只产生愈伤组织;在ＭＳ＋３．０ｍｇ Ｌ＾－１ ＢＡ＋０．２ｍｇ Ｌ＾－１ ＮＡＡ培养基上产生较多的不定芽和较多的愈伤组织;在ＭＳ＋２．０ｍｇ Ｌ＾     

2,4—D对野生稻未成熟胚离体培养的影响及其其再生植株的田间表现（简报）

２,４－Ｄ浓度的高低同时影响野生稻未成熟胚愈伤组织的诱导率和其内在质量。２－８ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ适于稻种中未成熟胚Ｈ型与Ｋ型愈伤组织的形成,并能最大程度地减少Ｓ型愈伤组织的发生。Ｈ型愈伤组织再生个体的性状变异较Ｋ型的大,且与种子植株有显著差异。     

一品红离体培养诱导体细胞胚的研究（简报）

一品红的嫩茎离体培养在附加不同浓度的２,４－Ｄ和６－ＢＡ的ＭＳ培养基上,２．４Ｄ浓度为１．０～２．０ ｍｇ· Ｌ~（－１）的愈伤组织生长量最大。这些愈伤组织转移到ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ ｍｇ·Ｌ~（－１）＋ＮＡＡ０．１ ｍｇ·Ｌ~（－１）的分化培养基上后,产生了胚性愈伤组织,观察到大量不同时期体细胞胚。带有体细胞胚的愈伤组织进一步转移到无激素 ＭＳ培养基上,便发育成小植株。