通过和玉米杂交诱导硬粒小麦单倍体

硬粒小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｄｕｒｕｍ Ｄｅｓｆ．）ＤＲ１４７授以超甜玉米（Ｚｅａ ｍ ａｙｓ Ｌ．） ｓｓ ７７００的花粉后,在８３．４％ 的柱头上观察到花粉萌发及花粉管长入胚囊,有９．９％ 的子房发生了卵细胞的单受精,１．９％ 的子房发生了中央细胞的单受精,３２．７％ 的子房发生了双受精。尽管双受精后可同时形成胚和胚乳,但胚乳往往发育迟缓,甚至败育。硬粒小麦×玉米形成的杂合子核型高度不稳定,在最初的几次细胞分裂中,来自父本玉米的染色体逐步被排除,最后形成硬粒小麦单倍体胚。在授以玉米花粉４ ｈ 后用１００ ｐｐｍ ２,４－Ｄ溶液浸蘸硬粒小麦穗部,可以有效地促进幼胚在缺乏胚乳或胚乳败育情况下的生长和发育。授粉９—１３ ｄ 后由５３３个硬粒小麦子房解剖出２５个胚,得胚率为４．７％ 。通过幼胚拯救获得１１棵正常植株,植株获得率为２．１％ 。根尖细胞染色体计数表明,它们为单倍体（２ｎ＝ ２ｘ＝ １４）。     

谷氨酰胺和天冬氨酸对无融合生殖大黍胚性疏松愈伤组织和悬浮细胞生长状态的影响

已有研究表明:L-脯氨酸对玉米疏松易碎胚性愈伤组织的诱导及悬浮细胞系的建立起着重要的作用,而谷氨酰酶和天冬氨酸对愈伤组织和悬浮细胞生长状态的影响报道不多。本研究发现,谷氨酰胺和天冬氨酸适当的浓度和比例对保持类型Ⅱ愈伤组织和悬浮细胞的生长状态具有明显的作用。取不太典型的疏松胚性愈伤组织在含2.0mg/L、2,4-D、146mg/L 谷氨酰胺,150mg/L 天冬氨酸的 M 固体培养基上增殖后转移至含2.0mg/L 2,4-D 及0、75、150、300、600mg/L 谷氨     

利用酵母双杂交系统筛选水稻类受体激酶OsWAK50胞内域相互作用蛋白

细胞壁连接的类受体激酶(wall-associated kinase,WAK)是植物细胞中一类特有的类受体激酶基因亚家族,因其胞外域与细胞壁紧密相连而得名．水稻中共有125个OsWAK基因,OsWAK50编码的蛋白质具有胞外域、跨膜域和激酶域,呈现典型的WAK样受体激酶特征．首先通过对OsWAK50-GFP融合蛋白的观察发现OsWAK50定位于细胞膜并且与细胞壁偶联．进而通过酵母双杂交系统筛选到了20个可能与OsWAK50胞内域相互作用的候选蛋白,并通过一对一酵母转化验证了OsSK4、OsSWIB和OsSWI3C全长均可与OsWAK50胞内域相互作用．进一步分析显示,OsSWIB能够直接与OsWAK50激酶域互作,而OsSK4和OsSWI3C与OsWAK50胞内域的互作是依赖于OsWAK50 C端的．研究还表明,OsSK4和OsSWIB亦能与OsWAK50同源基因OsWAK53a结合,而OsSWI3C则不能与OsWAK53a结合．双分子荧光互补实验证明,OsSK4与OsWAK50和OsWAK53a能够在植物体内发生互作．以上结果为阐明OsWAK50发挥功能的分子机制提供了重要线索．     

水稻中一个油菜素内酯不敏感突变体的图位克隆

油菜素内酯(brassinosteroid, BRs)是一类重要的植物激素,在植物的生长发育过程中发挥重要的调节作用。BRs的信号转导研究在双子叶植物拟南芥中已取得重大进展,但在单子叶植物水稻中,BRs的信号转导途径尚不很清楚。本研究从水稻T-DNA插入突变体库中筛选出一个叶片直立突变体el(erect leave mutant)。该突变体与野生型植株相比,叶夹角减小。遗传分析显示,el的突变性状由一对显性基因控制。该基因经图位克隆定位于水稻第5染色体引物InDel3和InDel4之间,物理距离为700 kb。本研究明确了一个水稻BRs不敏感突变体的表型特征及遗传规律,为进一步研究水稻BRs信号转导调控机制奠定基础。     

百脉根的组织培养和体细胞胚胎发生的细胞组织学观察

百脉根是重要的豆科牧草之一,具有营养丰富,抗逆性强、牲口食用安全等特点。百脉根的组织培养已有报道,但有关体细胞胚胎发生的研究及其细胞组织学观察未见报道。本文通过细胞组织学观察详细描述了体细胞胚胎发生过程,同时比较了几种激素对芽的分化和形态建成的影响。百脉根种子用浓硫酸浸泡5分钟,无菌水冲洗5次接种于1/2 MS 培养基上,一周后待苗高1—2cm 时即可使用。将无菌苗子叶切成两半,下胚轴和根切成0.3—0.5cm 长的世段     

烟草激活标签突变体库的创制和突变表型的初步鉴定

突变体库在烟草功能基因组研究中具有重要的作用,本研究建立了快速、高效农杆菌介导的烟草遗传转化体系,目前已经创制了3万份激活标签( pSK1015)突变体.利用PCR扩增对突变体库进行阳性检测,扩增结果表明其阳性率接近90％.大田T1代可视突变表型调查结果表明,在团棵期具有可视突变表型的概率为5.4％,在现蕾期具有可视突变表型的概率为3.6％.