核酸靶序列的体外选择和扩增技术

核酸靶序列的体外选择和扩增技术王成济（第四军医大学生化教研室,西安７１００３２）关键词寡聚核苷酸,体外选择,ＰＣＲ基因表达的转录水平调控很大程度上依赖于基因的顺式调控元件（ｃｉｓ－ａｃｔｉｎｇｅｌｅｍｅｎｔｓ）与反式调节因子（ｔｒａｎｓ－ａｃｔｉｎｇ...     

玉米反式因子基因分离初报

发育是一个严格有序的选择性基因表达过程。在这一过程中,序列特异的反式因子（ｔｒａｎｓａｃｔｉｎｇｆａｃｔｏｒｓ）通过与基因调控序列中顺式调控元件（ｃｉｓａｃｔｉｎｇｅｌｅｍｅｎｔｓ）的互作启动基因转录,因此,它们又被称为转录因子［１］。基于这类因...     

植物基因表达调控的机制：核因子作用

植物基因表达调控的机制：核因子作用邵宏波（四平师范学院生物工程研究所四平１３６０００）１引言真核生物的转录启始是由顺式作用的ＤＮＡ基序（ｅｔｓ－ａｃｔｉｎｇＤＮＡｍｏｔｉｆ）与反式作用的蛋白质因子（ｔｒａｎｓ－ａｃｔｉｎｚｎｒｏｔｅｉｎｆａｃｔｏｒ）...     

抗σ因子

Ｔ4噬菌体的ＡｓｉＡ可以抑制大肠杆菌的σ70 因子 ,因而称为抗σ70 因子 ,调节Ｔ4噬菌体早期基因的转录。细菌中的ＦｌｇＭ ,是抗σ2 8因子在细菌鞭毛形成过程中起调控作用。ＦｌｇＭ比较特殊 ,天然形式是未折叠的。枯草杆菌(Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ)的ＳｐｏＩＩＡＢ可抑制芽孢形成过程的专一性σ因子σＦ 和σＧ。该菌中的另一个抗σ因子是ＲｓｂＷ可以抑制应急反应中基因转录所需的σＢ 因子。此外 ,在真细菌类中 ,发现一类新的具内膜接合特性的抗σ因子 ,调控着具有胞外功能蛋白的基因表达 ,因而被分作抗σ因子的细胞外因子 …     

氧化应激与cfos和cjun转录和AP－1激活

激活剂蛋白－１（ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ－１,ＡＰ－１）是近年来受到关注的与氧化应激基因表达调控有关的转录因子,文章就氧化应激与ｃｆｏｓ和ｃｊｕｎ基因表达,ＡＰ－１的激活,ＡＰ－１对氧化应激反应的调控,ＡＰ－１与亲电子反应元件等有关内容作了简要的综述。     

细胞内信号传递与转录调控的研究进展

综合近年来有关细胞内信号传递与转录调控的研究进展,总结出３个细胞内信号传递系统－ＭＡＰ激酶途径、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ途径和ＮＫ－ｋＢ途径,细胞外信号分别通过以上３种途径,在细胞核、细胞膜、细胞浆中激活转录因子,调控基因表达,其中可逆性磷酸化对转录因子活性的调节起着重要的作用。     

SOST基因的表达调控

硬化蛋白(Sclerostin, SOST)主要由骨细胞特异性表达, 是骨形成的负性调节因子。甲状旁腺激素和雌激素抑制SOST基因表达, 转录因子Osterix、Runx2和Mef2c促进SOST基因表达, 而转录因子Sirt1负调控SOST表达。此外, SOST基因表达还受DNA甲基化和microRNA等表观遗传学调控。SOST基因突变可引起骨硬缩症和Van Buchem病, 与骨质疏松症相关联。Wnt和BMP是骨代谢调节的两个重要信号途径, SOST可通过结合BMP的Ⅰ型或Ⅱ型受体和Wnt的共受体LRP5/6分别抑制BMP和Wnt信号途径来调控成骨细胞分化和骨形成。抑制SOST为骨质疏松症的治疗提供了新的途径。文章综述了SOST基因的结构、功能、表达调控、与人类疾病的关系、调节骨代谢的机制及其临床应用前景。     

转录辅调节因子在剪接过程中的作用

细胞通过基因表达调控来应对外界刺激,其中对基因转录起始和pre-mRNA剪接的调控是基因表达调控的重要环节。越来越多的实验显示基因转录和pre-mRNA剪接这两个过程在时空上密切相关。基因转录能调节剪接模式的选择性,反之剪接过程也影响基因转录。近年来研究发现转录辅调节因子在联系转录和剪接过程中扮演着重要角色。转录辅调节因子对基因表达的调控不仅在于影响转录产物的量,还可以调控pre-mRNA的选择性剪接并产生不同的剪接体,从而翻译出具有不同生物学功能的蛋白质。本文主要阐述了基因转录与剪接之间的关系以及它们之间相互作用的机制,有利于更深入理解基因表达调控的过程。     

肽基脯氨酰异构酶在细胞核内的功能

有许多酶具有调节转录因子的功能,例如蛋白激酶、磷酸酯酶和乙酰转移酶等。目前Ｌｅｖｅｒｓｏｎ等提出一种新的酶调节机制：肽基脯氨酰异构酶（Ｐｅｐｔｉｄｙｌ－ｐｒｏｌｙｌｉｓｏｍｅｒａｓｅｓ,ＰＰＩａｓｅ）参与调节转录因子的活性［１］。转录因子ｃ－Ｍｙｂ结...     

黄曲霉毒素生物合成代谢相关的基因组信息挖掘和转录调控因子研究进展

黄曲霉毒素生物合成调控机制的研究已成为研究真核生物次级代谢过程的模式系统,真菌基因组学及其他组学技术的快速发展为我们挖掘基因组信息、获取基因表达谱继而为黄曲霉毒素生物合成调控网络及其他真菌次级代谢机制的研究提供基础。真菌次级代谢基因的表达需要不同类型的转录因子进行调控,包括通路特异性转录因子、全局性转录因子及应答各种环境信号的广泛转录因子等,对这些转录因子功能的研究加快了对黄曲霉毒素生物合成代谢调控机制的认识。     

低氧诱导因子-1的转录活性调控及其信号传导

低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是氧平衡调控相关的转录因子.依赖HIF-1的基因表达调控系统广泛影响葡萄糖代谢、细胞增殖、凋亡和血管发生,与机体低氧适应、胚胎发育、各种缺血性疾病及肿瘤相关.HIF-1自身活性调节是低氧应答基因表达调控的中心环节.调控主要发生在源于Ras的两条信号途径：Ras/Raf/MEK介导的HIF-1反式激活功能调控,PI(3)K/Akt依赖的HIF-1alpha蛋白稳定性调控.这两个信号传导途径分别独立又协调地调控着HIF-1的转录活性.     

研究基因转录的RT-PCR技术

ＤＮＡ模板序列的转录调控是基因表达多级调节过程的关键 ,细胞周期中基因转录水平的改变应激细胞发育、分化及正常生理功能的多种信号转导。疾病或其它因素也应激转录水平变化 ,从而改变各种ｍＲＮＡｓ的稳定性。因此基因的ｍＲ ＮＡ水平分析 ,在基因调控研究领域是必不可少的。ｍＲＮＡ的常规分析方法是Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｓ、ＲＮＡｄｏｔ/ｓｌｏｔｂｌｏｔ、核酸酶保护法(ｎｕｃｌｅａｓｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ)和原位杂交 (ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ)。而ＰＣＲ技术的应用开创了ｍＲＮＡ分析新方法[1 -3] :ＲＮ…     

小鼠ob基因启动子中葡萄糖和胰岛素反应元件的鉴定

为了解葡萄糖和胰岛素调控小鼠ob基因表达调控的机制,应用荧光素酶报告基因、凝胶迁移率变动分析（ｇｅｌ ｍｏｂｉｌｉｔｙ ｓｈｉｆｔ ａｓｓａｙｓ,ＧＭＳＡ）、ＤＮａｓｅ Ｉ足迹分析和突变分析技术对小鼠ｏｂ基因启动子－１７１９～－１４５２ｂｐ之间存在负调控元件、ＧＬＲＥ和ＩＲＥ。ＧＭＳＡ结果显示葡萄糖和胰岛素抑制转录因子与顺式元件。ＤＮａｓｅ Ｉ足迹分析和突变分析显示此结合区这ＡＧＣＡＡＡＡ,位于ｏｂ     

促红细胞生成素介导的脑缺血保护

促红细胞生成素 (ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ ,ＥＰＯ)是肾调节造血的一种细胞因子 ,它会在脑氧化应激之后产生。缺氧诱导的转录因子 1(ＨＩＦ 1)能在缺氧刺激后上调ＥＰＯ。ＭｕｒａｔＤｉｇｉｃｕｙｌｉｏｇｌｕ报道 ,ＥＰＯ预处理能保护神经元的缺血性损伤 ,神经元ＥＰＯ受体 (ＥＰＯＲｓ)的激活阻止ＮＭＤＡ(Ｎ ｍｅｔｈｙｌ Ｄ ａｓｐａｒｔａｔｅ)或ＮＯ诱导的细胞凋亡。其保护机制是通过激发Ｊａｎｕｓｋｉｎａｓｅ 2 (Ｊａｋ2 )和ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ ｋＢ(ＮＦ κＢ)两种信号途径的对话实现的。具体地说 ,ＥＰＯ受体激活…     

Nodal/Smad2靶基因的系统鉴定及其在早期胚胎发育中的功能机制

Nodal/Smad2信号通路在脊椎动物胚胎中内胚层诱导及其背腹分化中发挥着主导作用,但是在胚胎早期发育中,Nodal/Smad2信号调控哪些靶基因表达,这些靶基因如何在Nodal/Smad2信号下游发挥作用,人们仍然所知甚少。以国家自然科学基金委员会"细胞编程与重编程的表观遗传机制"重大研究计划为依托,王强实验室在全基因组水平上对斑马鱼胚胎原肠早期Nodal/Smad2信号通路的靶基因进行了系统鉴定,并通过分析Smad2结合区域的其他转录因子保守的结合序列的出现频率,鉴定了一批潜在的Smad2的协同转录因子。研究发现,Nodal/Smad2的靶基因主要由转录因子、发育相关基因及重要信号通路的调控因子组成,其中F-actin捆绑蛋白Fascin1a和鸟核苷酸交换因子Net1分别通过调控受体内吞与Smad2转录活性反馈调控Nodal信号转导和中内胚层形成,而BPTF做为Smad2协同转录因子,通过调节核小体滑动来调控wnt8a表达,在中枢神经系统后部化过程中发挥重要作用。相关研究工作构建了Nodal/Smad2信号在斑马鱼中内胚层诱导及体轴建立中的分子网络,为理解脊椎动物早期胚胎发育过程中的基因表达调控机制提供了有意义的线索。     

c—fos原癌基因的研究进展

目前,原癌基因的正常生理功能愈来愈引起重视。ｃ－ｆｏｓ原癌基因属瞬息基因,其编码的产物位于核内并具有转录因子的特异结构。参与基因的表达调控。本综述了ｃ－ｆｏｓ原癌基因的结构特点、生物功能,尤其是在基因表达调控中的进展。     

转录因子与microRNA在基因表达调控中的功能联系及差异

转录因子和微RNA(microRNA)是最大的两类反式作用因子,它们是基因表达调控的重要调控因子.它们协调发挥调控作用,精细调控基因的表达,在细胞分化和动物生长发育过程中发挥重要的作用.随着对转录因子和microRNA研究的深入,人们发现转录因子和microRNA在基因表达调控网络中关系紧密,它们的分子作用机制有许多相似之处,两者都通过各自的顺式作用元件调控基因表达,且作用的方式类似.但转录因子和microRNA也存在不同之处,转录因子既可以激活基因表达,也可抑制基因表达,而microRNA主要是抑制基因表达.另外,转录因子调控区的复杂性一般高于microRNA的调控区域.本文综述了转录因子和microRNA的异同点,并提出了未来转录因子和microRNA的研究方向.     

细胞信号转导分子在TNF—α诱导c—jun基因表达中的作用

前期研究表明ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）通过磷酸化心肌细胞增强因子２（ｍｙｏｃｙｔｅ ｅｎｈａｎｃｅｒ ｆａｃｔｏｒ２,ＭＥＦ２）转录因子家族成员调节ｃ－Ｊｕｎ蛋白表达。ｃ－ｊｕｎ的启动子区存在ＭＥＦ２位点,ＭＥＦ２转录因子家族成员以同源或异源二聚体形式与其结合。研究了ｐ３８和ＢＭＫ１（ｂｉｇ ＭＡＰ ｋｉｎａｓｅ１）在ＴＮＦ－α诱导ｃ－ｊｕｎ基因表达中的调控作用。ｐ３８上调ＭＥＦ２Ａ的转     

Forskolin对放射性转化细胞TGF基因及部分癌基因表达的影响

＾３Ｈ－ＴｄＲ放射性转化细胞经１×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ Ｆｏｓｋｏｌｉｎ处理２４ｈ后,ＴＧＦａ,ｃ－ｍｙｃ,ｃ－Ｋ－ｒａｓ基因的ｍＲＮＡ表达下降;ＴＧＦβ,ｃ－ｆｏｓ基因表达无明显变化。非转化细胞经相同条件处理,ＴＧＦａ,ＴＧＦβ,ｃ－ｍｙｃ及ｃ－Ｋ－ｒａｓ基因表达无显著改变。提示：Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ介导的转化细胞的生长抑制作用与ＴＧＦａ,ｃ－ｍｙｃ,ｃ－Ｋ－ｒａｓ基因的转录表达下降有关。