转录增强子对yellow基因发育特异性表达的调控

从果蝇基因组文库中分离和克隆了yellow基因上游调控区DNA.应用重组DNA技术在体外构建了一种含yellow基因和调控元件的载体,通过转基因技术将其整合入果蝇基因组中.进而用FIP / FRT和Cre/LoxP双重位点特异性重组体系,在基因组同一位置上完成两个重组反应, 获得两种yellow基因突变体,即两种yellow等位基因.等位基因的遗传学分析表明,转录增强子直接调控yellow基因的发育特异性表达.研究结果进一步表明了两种等位基因之间存在相互作用,这种作用明显影响了yellow基因的表达水平,而这种效应可能也是由转录增强子所介导的.     

pSP6—LUC融合质粒的构建、鉴定和制备

以pSP64为载体,插入荧光素酶基因片断构成pSP6-LUC融合质粒,并将其转化E.ColiHB101鉴定后大最制备融合质粒。     

植物脱水素研究进展

植物脱水素是八十年代末发现的一个大的蛋白质家族,它在植物抗逆和种子形成过程中发挥着重要的作用,本文就脱水素的组织和亚细胞定位、结构、表达及作用机理等方面做了简要介绍。     

克隆基因转入植物细胞的一般方法

本文介绍一种能将任何克隆基因转入植物细胞的方法,而不论其基因末端或中间的限制酶切点如何。已经构建了一种寄主范围很广的中间载体pGV1117,在其兰曙红着色的pTiC58质粒右端T-区片段含有Hind Ⅲ-23。利用EcoRI甲基化酶和EcoRI接头的连接在胞内所起的保护作用、将带有兔子β-珠蛋白基因的一段染色体DNA插入pGV1117质粒。转移到根瘤病土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中以后,通过体内重组把该基因插入pTiC58的T-区。受损伤的烟草幼苗被感染后,导致完整的珠蛋白基因作为T-DNA的一部分而转入植物基因组。虽然,在组织培养期间,这个基因能被稳定保留,但是在转化植株细胞中没有检测到β-珠蛋白特异的转录本。     

ATP的生物发光与清洁

北京人居环境生态条件已有明显改善,但若干中小型食品生产加工单位饮食摊点、公共服务部门场所设施的微观清洁卫生水平离"世界城市"要求还有很大差距。发达国家(欧盟、北美、日本等)均已将ATP生物发光检测方法列入相关卫生标准检测方法并建立与其对应的卫生"评价体系"和"卫生基准值制度"。     

An Accurate Model for the Expression of the Antisense RNA Block Gene:the Firefly Luciferase Gene-Xenopus Oocyte System

The plasmid p~(SV-Luc20)or the mRNA of luciferase gene transcribed from p~(SP64-Luc12)was introduced intothe nucleus or cytoplasm of Xenopus oocytes at stages 5-6 by microinjection.Then the injectedoocytes were incubated in MB medium at 18℃ for definite periods,and the crude enzyme ofluciferase was prepared.Results indicated that the luciferase gent and its mRNA could be transcribedand translated into the enzymatic protein of luciferase with high biological activity,and could alsocatalyze the substrates to emit light.If different ratios of firefly lucifcrasc gene and its antisense RNA were introduced together into thenucleus or cytoplasm of Xenopus oocytes,then the expression of firefly luciferase gone was severelyblocked.Since the lucifcrasc activity can be measured rapidly and quantitatively and the Xenopusoocytes obtained easily,the firefly luciferase gene-Xenopus oocyte system is an excellent model forrevealing quantitatively how the antisense RNA can block gene expression.     

萤火虫荧光素酶的研究及开发利用

萤火虫荧光素酶的研究及开发利用蒋宇扬,金振华（中科院发育研究所１０００８０）萤火虫荧光素酶（ＦｉｒｅｆｌｙＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ;ＥＣＩ．１３．１２．７）简称虫光素酶,是一种能将化学能转变为光能的活性蛋白质,即生物催化剂。由于它能把诸如ＡＴＰ（三磷酸腺苷）一类生化物质转变成易于检测的先信号。因此,它能构成极好的生物传感器（Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓ）。     

反义基因操作及反义分子的设计原则

和突变不同,反义基因操作能在不破坏目标基因的前提了调控基因的表达。因此,它既是阐明基因功能的新手段,又拓宽了通过基因工程改变植物品质和治疗疾病的途径。受天然反义RNA调控机理的启示,人们已能设计出更有效的人工反义分子。     

再谈基因转移

新基因能被引入小鼠的生殖细胞,但是,要使转移基因在小鼠以及它们的后代中表达仍比较困难。 Mintz在最近的一次无性繁殖基因,在发育过程中表达的工作会议上曾说过:“令人惊讶的是外源遗传物质竟能如此容易地掺入哺乳动物的基因组。”这方面研究快速发展的明显标志,是建立了在其生殖细胞中携带外源基因并适于发育研究的小鼠新品系。