利用甲醛固定的陈旧组织制作常规HE切片方法探讨

经甲醛长期浸泡的组织不仅细胞形态发生改变,组织着色力也明显下降。实验采用碳酸氢钠和FFA固定液(快速混合固定液)双重处理,探讨使经甲醛长期浸泡的组织细胞形态恢复正常及组织着色力增强的方法。     

检测噬菌体DNA法鉴别细菌的溶原性

根据前噬菌体的可诱导性,将细菌培养物经丝裂霉素C诱导,诱导液滤过除菌,经核酸酶处理和聚乙二醇(PEG 6000)浓缩,再用苯酚进行抽提。通过检测抽提物中有无DNA,以确定菌株的溶原性。实验证明从溶原菌诱导液中可提取DNA,同时表明该DNA确为溶原菌诱导出的噬菌体DNA,而非溶原性菌以同样方法不能取得DNAo用此方法,可以作为鉴别细菌溶原性的一个手段。     

利用菌丝渣和中和滤液生产蛋白饲料

选育出了新的菌种K6,并以K6为菌源 ,利用柠檬酸生产过程中的主要副产物菌渣和中和滤液 (废糖水 )为原料生产蛋白饲料 ,经处理后的废糖水完全达到了治污排放标准。     

不同种子预处理对10种沙拐枣植物萌发的影响

为了确定沙拐枣植物种子的萌发特性及最优播前预处理方法,在实验室条件下,对10种沙拐枣植物的种子进行了磨砺、硫酸和热水浸泡、冷藏、种子浸出液处理,然后进行发芽实验研究。萌发实验的结果表明,10种沙拐枣植物对于不同的种子预处理,均表现出相似的萌发反应。磨砺、硫酸浸泡和冷藏处理对种子萌发有明显地促进作用。与对照相比,种子浸出液处理对种子的发芽率、发芽速度均具有明显地抑制作用,并能增强种子的休眠。冷藏处理具有打破有活力的种子休眠、促进种子萌发的作用,但它与热水浸泡处理一样,对有活力种子表现出一定的致死作用。沙拐枣植物的萌发模式在不同种子预处理问均表现出明显的差异性。机械磨擦和硫酸处理能够促进种子的萌发率及发芽势。泡果沙拐枣(Callingonum junceum)在本项实验中表现出很强的萌发能力。     

自絮凝颗粒酵母乙醇连续发酵耦合废液全循环工艺的研究

在以CO2为驱动力的单级悬浮床生物反应器中,进行了自絮凝颗粒酵母乙醇连续发酵耦合废液全循环实验研究。以双酶法制备的玉米粉糖化液为底物,系统连续运行了28 d,每隔5 d将收集到的发酵液集中精馏处理,得到的废糟液直接用于玉米粉调浆制糖。实验数据表明,在稀释率为0.05 h-1条件下,发酵液中乙醇、残还原糖、残总糖质量浓度基本稳定,其平均值为82.97,30.02和40.87 g.L-1。对废液循环工艺过程中,发酵液中的8种高沸点有机酸进行了定量分析,发现发酵液中仅丙酮酸有明显积累,并最终在0.1~0.3 mol.L-1范围内波动。实验结果表明:系统中存在的高沸点副产物不对乙醇发酵产生明显抑制作用,乙醇连续发酵能够在废液全循环条件下良好运行。     

豆豉纤溶酶高产菌株的筛选研究

以中国豆豉为材料,取6个不同来源的样品经富集培养后,用自制血纤维蛋白平板进行初筛;利用LB纤维蛋白平板复筛与血琼脂平板进行体外溶血试验相结合的方法,筛选出安全性良好并有一定纤溶活性的菌株。再对复筛得到的菌株进行摇瓶培养,用纤维蛋白平板法测定并比较不同菌株发酵液的纤溶活性。结果成功地筛选出5株纤溶活性高和通过溶血性实验的芽孢杆菌菌株,其中菌株DC-C4粗酶液的酶活稍高,达到280IU/mL。采用16S-23S rDNA序列分析法及传统的生理生化特征鉴定法对该菌株进行鉴定,确定菌株DC-C4为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。本实验为开发新型溶栓药物及保健食品提供了实验参考依据。     

化学机械法棉秆制浆废液的生物转化条件及转化物的安全性

摘要:【目的】系统研究棉秆制浆废液用于培养具有生物防治功能的枯草芽孢杆菌的适宜条件和转化液的安全性。【方法】以初始pH值、温度、曝气量和接种量作为单因素,通过实验优化培养条件,并以大鼠和大耳兔作为测试动物,对转化液的安全性进行分析。【结果】结果表明,APMP棉秆制浆废液培养枯草芽孢杆菌的最适条件为:初始pH7.0,温度30℃,曝气量16 L/h,接种量0.8 g/L,反应器内加入填料,装填率为30%,在此培养条件下菌株的活芽孢数为6.27×109 CFU/mL,废液COD 转化率达70.4%。生物转化后,转化液的成分含量与转化前相比均有不同程度的下降。经4种毒性试验检测表明,未发现转化液的生物致病性。【结论】APMP 棉秆制浆废液可为枯草芽孢杆菌的生长和代谢提供必要的营养,可用于生物转化,且转化液为无刺激性、无毒性物质。     

FACE系统处理三年后淹水条件下土壤CH4和CO2排放变化

采用淹水培养实验（25（C），在实验室CO2浓度和高CO2浓度（1000μlL^-1）条件下，研究了稻麦轮作FACE系统运行3a后FACE处理和大气CO2浓度（Ambient）处理土壤CO2和CH4排放的差异。实验结果表明：经过FACE处理后，土壤有机碳含量较Ambient处理提高11%。在实验室和高CO2浓度下淹水培育60d，FACE处理土壤CO2累积排放量较Ambient处理土壤分别增加35%和22%，CH4累积排放量分别是Ambient处理土壤的2.6倍和2.3倍。高CO2浓度下培养，显著促进FACE和Ambient处理土壤的CO2排放量（p〈0.01），促进CH4排放量，但未达到统计显著水平（p〉0.05）。由此说明，大气CO2浓度升高可能直接影响土壤有机碳的转化速率和CO2及CH4的排放。     

硫酸盐还原菌固态发酵产品酶活测定方法的建立

为建立生物质固载硫酸盐还原菌（SRB）产品酶活的检测方法,首先确定亚硫酸盐还原酶（SiR）作为SRB胞外酶表征其生物活性的可行性;其次对固态发酵产品制备粗酶液的各种条件进行探讨,研究浸泡介质、浸泡时间、超声功率、超声时间、预处理方式等单因素对酶活的影响;由正交实验确定粗酶液制备的最佳工况。实验结果表明,先浸提后超声处理的酶活值显著高于仅用超声、浸提的结果。为确保酶活值测定不受干扰,排除超声温度对结果的影响,确定实验最佳工况：2g固态发酵产品经磷酸盐缓冲液25mL、浸提60min,酶活值为1．0799U／g。生物质固载SRB酶活检测方法的建立为固态发酵产品活性评价、固态发酵条件优化、可渗透反应墙生化性能评估提供一定的理论依据。     

海水养殖真鲷最小弧菌外毒素的免疫学特性初步研究

按常规方法免疫健康家兔进行外毒素抗体的制备。将制备的兔抗血清与等体积的外毒素混合,37℃下作用1h后,观察毒素的溶血性及细胞毒性,取免疫前家兔血清(零号血清)作阴性对照,用毒素作阳性对照。结果表明,兔抗毒素血清能中和毒素,抑制毒素对人血细胞的溶血性及对Vero细胞的细胞毒性,中和毒素的兔抗毒素血清最高稀释度为1∶256,毒素对照显示出溶血性及细胞毒性。毒素与一定浓度的嗜水气单胞菌HEC毒素抗血清、霍乱肠毒素抗血清在37℃下分别作用1 h后,观察其溶血性及细胞毒性。结果表明,这2种抗血清都不能中和毒素,毒素与这2种抗血清作用后,仍然保持其溶血性及细胞毒性。用浓度为0.2%的福尔马林对浓度为5mg/mL的外毒素进行灭活处理,得到的灭活疫苗为毒素苗。一定稀释度的毒素苗,在初次免疫真鲷2周后利用病原菌对免疫组及对照组的实验鱼进行人工攻毒感染,毒素苗的免疫保护率可达80%,强化免疫后,免疫保护率有所提高。注射免疫的免疫保护率比浸泡免疫的高。     

利用计算机测量心肌收缩功能

本文按照Maxwell心肌模型,在左心室等容收缩期测定心肌收缩功能。应用微电脑技术,将模拟ECG及LVP信号经12位A/D转换器转变成数字量,并自动分析出有关心肌收缩性功能。系统利用R波顶点来确定等容收缩期的起始点,用LVP的导数最大值作为等容期终点,收缩性能的主要指标均在LVP等容收缩期测量,系统能对四道测量信号作实时分析处理,且将四道在原始信号长时间地(可达数小时)不间断地记录在计算机硬盘上待实验完成后,再作详细分析处理。系统运用两种方法得到Vmax值,并作出dp/dL与发展压D.P的心率环图,收缩——舒张环图及有关的30多种重要参数。     

小经验介绍——微波在蛋白质电泳染色和脱色中的应用

经过实验摸索和实践,我们发现一种利用微波处理在10 min内可使聚丙烯酰胺凝胶染色及脱色完成的方法.a 将电泳后的凝胶(厚度0 75 mm)取出,置于培养皿中用蒸馏水冲去残留缓冲液.b 加入染色液将凝胶完全浸泡其中,放入微波炉内高火档照射20 s,停留1 min,再照射10 s. c 取出染色液(回收还可再用2次),用蒸馏水冲去凝胶上残留染色液.d 加入脱色液,高火档照射20 s,取出脱色液,然后加入新鲜脱色液再照射20 s,重复 5～6次,直至背景清晰透明.     

微型计算机控制的颈动脉窦区自动灌流系统

运用自动控制理论,设计出由LDB—M型电子蠕动泵、Apple—Ⅱ微型计算机构成的负反馈闭环自动灌流系统。该系统能自动完成均匀斜坡升、阶梯升、阶梯升降等灌流压曲线。同时对实验动物的平均血压、平均灌流压及心率进行实时数据采集,最后作自动分析统计。     

锌离子对鲜紫花苜蓿叶的护绿效果及技术优选研究

以鲜苜蓿叶为原料,采用硫酸锌常温处理、硫酸锌和醋酸锌高温处理、蒸馏水漂烫后醋酸锌常温浸泡处理,通过样品的外观颜色、过氧化物酶和多酚氧化酶活性、叶绿素含量综合评价不同处理的护绿效果,以筛选锌离子对鲜苜蓿最佳护绿技术.结果显示:(1) 不同浓度硫酸锌常温浸泡24 h后的紫花苜蓿叶绿素含量均显著高于对照,表现出显著护绿效果,并以0.10%浓度最佳,但处理样室温放置时比未处理对照加速褐变;(2)硫酸锌和醋酸锌的高温护色处理中,以0.05%醋酸锌溶液高温热烫2 min的苜蓿叶绿素含量最高.(3)新鲜紫花苜蓿高温漂烫后再用醋酸锌常温浸泡处理,以0.50%醋酸锌的护色液效果最佳,其样品在4℃冰箱中冷藏7个月后颜色仍为绿色,且叶绿素含量极显著高于对照和其它浓度处理. 研究表明,锌离子对紫花苜蓿叶有显著的护绿效果,并且以95℃蒸馏水热烫2 min后再用0.50%醋酸锌护色液常温浸泡24 h效果最好.     

微波在蛋白质电泳染色和脱色中的应用

经过实验摸索和实践 ,我们发现一种利用微波处理在10ｍｉｎ内可使聚丙烯酰胺凝胶染色及脱色完成的方法 .ａ 将电泳后的凝胶 (厚度 0 75ｍｍ)取出 ,置于培养皿中用蒸馏水冲去残留缓冲液 .ｂ 加入染色液将凝胶完全浸泡其中 ,放入微波炉内高火档照射 2 0ｓ,停留 1ｍｉｎ ,再照射 10ｓ.ｃ 取出染色液 (回收还可再用 2次 ) ,用蒸馏水冲去凝胶上残留染色液 .ｄ 加入脱色液 ,高火档照射 2 0ｓ ,取出脱色液 ,然后加入新鲜脱色液再照射 2 0ｓ,重复5～ 6次 ,直至背景清晰透明 .实践中我们认为应注意以下几点 :ａ 盛试剂的培养皿上面应盖一稍大的培养…     

海藻预处理工艺研究

大型海藻是中含有大量的糖分,能被微生物利用进行发酵作用来生产乙醇。为了提高乙醇的产率,优化预处理方法是必要的。本课题主要通过物理研磨法、蒸煮法、酸解法和酶解法处理海藻以优化出糖类溶出量最大的预处理条件。物理研磨法条件为固液比1:20,温度28℃,处理2h;蒸煮法条件为固液比1:30,温度90℃,处理1.5h;酸解法条件为固液比1:30,温度为80℃,处理1h;酶解法条件为酸解液残渣在温度40℃下酶解3h。且酸解后进行酶解的处理方法是糖类溶出量最大的处理方法,条件为80℃的酸解残渣在纤维素酶的作用下40℃酶解3h。     

2种内生细菌对文冠果幼苗矿质元素吸收的影响

为探究前期筛选的具有溶磷、产铁载体、产IAA能力的内生细菌对文冠果(Xanthoceras sorbifolia Bunge)幼苗矿质元素的影响,选取一株假单胞菌属菌株XSB5和一株约克氏菌属菌株GG10作为试验菌株。用菌液浸泡经过层积催芽的文冠果种子,待植株长出第一片真叶后,用等量的菌液和清水处理文冠果幼苗,4个月后分析文冠果植株的生长状况。结果表明:用XSB5菌液处理后,文冠果植株地上和地下生物量均显著增加(P<0.05);GG10菌液处理后,文冠果地上和地下生物量均有所增加,地下生物量增加达显著水平(P<0.05);两种菌液处理后文冠果植株N、P、Mg积累量较对照显著增加(P<0.05),Fe积累量因处理时间不同而有差异;4种矿质元素的转运系数因不同菌液、不同处理时间而有差异;栽培基质中有效态N、P含量较对照显著增加(XSB5-30处理除外),有效态Mg、Fe含量与对照无显著差异。说明接种这2种内生细菌能影响栽培基质中矿质元素含量的变化,提高文冠果植株对矿质元素的吸收,改变矿质元素向上的运输能力,从而促进文冠果植株的生长。该研究可为文冠果促生菌肥的筛选提供一定的理论基础。     

酸溶辅助超声波法提取类球红细菌类胡萝卜素条件优化

通过单因素和正交试验,对类球红细菌3757产类胡萝卜素的提取条件进行了研究。先采用超声波法、酸溶法、研磨法、冻融法、酸溶辅助超声波法和冻融辅助超声波法优化了从类球红细菌3757菌株中提取类胡萝卜素的方法,然后开展了酸溶辅助超声波法的单因素和正交实验,最后进行了重复性实验。结果表明,酸溶辅助超声波法是较优的提取方法,丙酮是较好的提取溶剂。最佳提取条件为料液比110、超声波处理总时间20 min、酸浓度3 mol/L、酸溶时间25 min、超声波振幅40%、超声工作/间隔时间2 min/1 min、酸溶温度27℃,实验重现较好。优化后类胡萝卜素的提取率较优化前提高了74.8%,为其产业化创造了条件。     

鹿茸硫酸软骨素蛋白聚糖的分离纯化研究

报道了用DEAE-纤维素(DE-23)离子交换柱层析从鹿茸二杠中分离、纯化及鉴定硫酸软骨素的方法.首先用适量蒸馏水浸泡鹿茸二杠并将其捣碎,离心取沉淀用盐酸胍浸提,浸提液对尿素液透析后经DEAE-纤维素(DE-23)离子交换柱层析,吸附大量的硫酸软骨素;再用含盐尿素溶液梯度洗脱、分离后,经软骨素酶消化及琼脂糖凝胶电泳, 与硫酸软骨素标准品比较,证实得到的物质为纯的硫酸软骨素蛋白聚糖,其得率约为48.77%.该方法使硫酸软骨素分离纯化一步完成,大大简化了纯化步骤.     

低钾与哇巴因诱发经低温处理的心室肌节律活动

65个猪心室肌标本经24或48h低温处理后,用玻璃微电极进行细胞内动作电位记录。在经低温处理 48h的心室肌上,电刺激均能诱发节律性电活动,而在经低温处理 24h的标本上,节律性电活动的发生率只有8.3％。经24h低温处理后仍无节律性电活动的标本对低钾与哇巴因的反应和新鲜标本不同。低钾(0.35—0.7mM)台氏液能诱导所有低温处理标本的动作电位出现舒张期自动去极化(SD),从而导致节律性电活动。低温处理标本不仅对哇巴因毒性作用的耐受性大大减弱,而且在哇巴因(2×10~(-7)M)作用下,均出现叠加在缓慢 SD上的振荡电位,这种振荡电位的幅度一般小于10mV。低钾(1.4mM)台氏液灌流能使这种振荡电位增大,并在SD基础上导致自发活动。 实验结果提示,钠钾泵活动的抑制可能与心室肌细胞的节律性电活动有关。