小经验介绍——微波在蛋白质电泳染色和脱色中的应用

经过实验摸索和实践,我们发现一种利用微波处理在10 min内可使聚丙烯酰胺凝胶染色及脱色完成的方法.a 将电泳后的凝胶(厚度0 75 mm)取出,置于培养皿中用蒸馏水冲去残留缓冲液.b 加入染色液将凝胶完全浸泡其中,放入微波炉内高火档照射20 s,停留1 min,再照射10 s. c 取出染色液(回收还可再用2次),用蒸馏水冲去凝胶上残留染色液.d 加入脱色液,高火档照射20 s,取出脱色液,然后加入新鲜脱色液再照射20 s,重复 5～6次,直至背景清晰透明.     

水稻抗白叶枯病与光呼吸乙醇酸代谢无关

本文探讨水稻抗白叶枯病的能力与Ｈ2 Ｏ2 及光呼吸乙醇酸代谢之间的关系。以水稻 (Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａ)感病品种玉梅 1 5 3、抗病品种中二占 (均由广东省农业科学院水稻研究所提供 )为材料。水稻种子以 0 .1 %ＨｇＣｌ2 消毒 5ｍｉｎ后 ,用蒸馏水冲洗4次 ,再用蒸馏水浸种 1ｄ ,置于培养皿中 ,放入人工气候箱中 ( 2 8℃ ,光照度 30 0 0ｌｘ)萌发 ,1周后盆栽 ,在网室内培养 2个月 ,取水稻叶龄一致的倒数第二片叶。白叶枯菌液 (由本校植保系提供 )接种当天配制成 1 0 8ｃｆｕ·ｍｌ- 1 浓度的菌液 ,采用剪叶法接种。光呼吸测定参考Ｓｔｅｗ…     

微激光照射肥大细胞对胞内钙离子浓度的影响

目的:研究850 nm波长微激光对肥大细胞照射后胞内钙离子浓度的影响。方法:实验前12 h,将肥大细胞接种于激光共聚焦专用培养皿中,然后用D-Hank’s液洗涤3次,加入2 m L D-Hank’s液,按照照射时间不同共分六组(Control,1 min,2 min,2.5 min,3 min,4 min),其中,空白对照组不进行激光照射处理;激光照射后,弃去D-Hank’s液,加入含有Fluo-3/AM的D-Hank’s液1 m L,放入培养箱中孵育30 min后,用D-Hank’s液洗涤3次去除胞外多余的Fluo-3/AM,再加入含有10%FBS的D-Hank’s液2 m L,置激光扫描共聚焦显微镜检测。结果:空白对照组中细胞内未见荧光,说明此时胞内无钙离子,但从1 min开始在细胞中发现荧光,而且发现随着照射时间的加长,其荧光强度越来越强,这可能与微激光照射时间越长从而刺激胞内出现更多的钙离子有关。从上面的实验说明850 nm微激光能作为仿灸仪器的光源。     

以龙胆紫染硫酸酯多醣类的组织化学意义

甲、方法:1)固定于任何固定液皆可,但以酒精为最合适。石蜡切片,厚3微来。切片脱蜡,降酒精,至蒸馏水。2)以龙胆紫(gentian violet)水溶液1∶250,000或1∶1,280,000染色24小时(即0.25毫升0.1%龙胆紫贮存液加入100毫升蒸馏水内;或以0.1毫升0.1%龙胆紫液加入128毫升蒸馏水内)。3)滤纸吸干切片,然后在亚尼林二甲苯(anilinc-xylene)1∶1或1∶2液内脱色及脱水约5分钟(或稍长),直至紫色不再从切片上脱下为止。以二甲苯洗2—3次,用树胶封片。若染透明质酸(hyaluronic anid)可以甘油封片。     

细菌鞭毛染色中几种制片方法比较

细菌鞭毛染色是微生物学实验教学内容之一,也是对细菌进行分类鉴定的重要实验之一。但由于在染色过程中鞭毛常脱落,而且背景上也堆积了染料沉淀,给镜检观察造成困难。为此,我们采用鞭毛染色实验常用菌种,用几种制片方法进行比较,发现用液体培养菌种或菌悬液为材料,用适当方法制片,然后再进行染色观察,可较好地克服上述困难。具体方法及结果如下：１　材料１．１　菌种　苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）１．２　鞭毛染色液１）Ａ液：单宁酸：５ｇ;ＦｅＣｌ３：１．５ｇ;蒸馏水：１００ｍｌ;福尔马林（…     

不同培养方法对木槿原生质体培养的影响

本文研究了不同培养方法对木槿 (Ｈｉｂｉｓｃｕｓｓｙｒ ｉａｃｕｓ)原生质体培养的影响。种子采自本校校园 ,原生质体分离按朱启忠[1] 和Ｎｏｍｕｒａ[2 ] 的方法。培养方法有 :(1)液体浅层 (培养皿中加入 3ｍｌ培养液 ) ;(2 )固液双层 (固体层用 0 .4 %的琼脂及 0 .3%琼脂糖     

果蝇唾腺染色体的观察和制片方法的改进

几年来我们在教学中进行了多方面的实验探索,在果蝇唾腺制片方法上加以改进,采用加蔗糖液保色,树脂胶封边,制备一种半永久制片标本。操作过程如下: 1.取出唾腺,在其上加2滴(37℃)蒸馏水低渗处理10～20分钟,使唾腺细胞涨大有利于染色体的分散。 2.用滤纸吸去蒸馏水,加1滴1N HCl解离8～15分钟(时间随当时的温度而定),吸去解离液,用蒸馏水轻轻冲洗2～3次,将水吸净。     

腔内大量盐水灌洗辅助取出乳房内聚丙烯酰胺水凝胶临床应用

目的：探讨聚丙烯酰胺水凝胶注射隆胸后取出新方法.方法：对48例注射聚丙烯酰胺水凝胶隆胸患者术前行双乳MRI或彩超检查结合触诊准确定位.全麻小切口开放直视下吸出水凝胶,再用大量生理盐水反复灌洗所有腔隙,直至手感探测不到硬结,盐水中无水凝胶为止.结果：48例患者术后无继发感染和出血等并发症.术前诸症状体征消失,无明显乳房变形,乳房形态术后恢复满意.术后双乳MRI复查未见明显异物残留.术后1 ～12月（6.2±0.3月）45例随访复查MRI亦未见异物残留,乳房修复完好.结论：注射隆乳后腔内大量盐水灌洗辅助取出水凝胶具有创伤小、出血少、操作简单、费用低廉的优点,是一种较好的、值得推广的凝胶取出术式.     

杉叶毒蛾核型多角体病毒的分离鉴定

杉叶毒蛾 (Ｄａｓｙｃｈｉｒａｔｈｗａｉｔｅａｉ) ,又名大茸毒蛾 ,属鳞翅目 ,毒蛾科[1] 。在我国广东 ,广西及西南等省区均有分布 ,贵州省全省杉木产区均有发生 ,主要危害杉木、茶、油茶、枫香和华山松等 ,1 995年于贵州省黄平采集到自然病死幼虫 ,经分离鉴定 ,该病原物为一种核型多角体病毒。1　材料与方法1.1　ＤｔＳＮＰＶ多角体的分离纯化取自然病死虫体充分捣碎 ,以 50 0ｒ/ｍｉｎ离心 5ｍｉｎ ,去除细胞碎片和沉淀 ,取上清于 4 0 0 0ｒ/ｍｉｎ离心 30ｍｉｎ。用蒸馏水悬浮沉淀 ,重复上述方法差速离心 2次 ,所得多角体较为纯净 ,置冰…     

水螅神经网永久标本制片法

一、麻醉将一条水螅放入盛有蒸馏水的培养皿内(水以刚没过水螅为准),静等水螅斜着伸展,水螅触手也伸展自如后,用10毫升的注射器,吸取自配盐酸丁卡因0.3％麻醉液(注1),将注射针头直接对准水     

水杨酸对NaCl胁迫下绿豆和赤豆萌发生长的影响

基于水杨酸能诱导植物产生抗盐性状的认识和报道 ,本文测定了ＮａＣｌ胁迫下 ,水杨酸对绿豆和赤豆萌发和幼苗生长的影响。挑选籽粒大小均匀的绿豆 (Ｐｈａｓｅｏｌｕｓｒａｄｉａｔｕｓ)品种临明 3号、赤豆(Ｐｈａｓｅｏｌｕｓａｎｇｕｌａｒｉｓ)品种高赤 2 6的种子 ,分别用1 0 %的次氯酸钠消毒 1 0ｍｉｎ后 ,作 2种处理 :(1 )用 0 .3 %ＮａＣｌ(或 0 .5 % )及在 0 .3 %ＮａＣｌ(或0 .5 % )中加有不同浓度水杨酸的溶液浸泡 8ｈ ,以自来水浸种的为对照 ,播于铺有一层滤纸的培养皿中 ,分别加入与浸种时相同的处理溶液 ,每皿 3 0粒 ,重复 3份 …     

用于同工酶分析的细胞器中Ca2+-ATPase的低渗胀破提取法

将水稻叶片在ＰＨ７．８的ＳＴＮ介质中研磨、离心去细胞腑片,然后通过差速离心分别得到叶绿体、线粒体和细胞核。再通过加入等体积蒸馏水,在低温、低渗条件下,轻度研磨使之用,并在各自的保存液中液中浮,即可得到含在Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ的粗中供聚丙烯酰胺凝胶电泳之用。     

植物原色浸制标本的保存

不同植物、不同器官其颜色种类各有不同 ,制成标本如采用一般方法想长久保存原先颜色也很困难。笔者通过查资料 ,长期实践、摸索 ,终于找到较满意的制作方法。现介绍如下 :1　保存绿色　将标本浸入 30 % Cu SO4 溶液中 ,5～ 10天取出 ,用清水冲洗 ,再放入 0 .2 %～ 0 .3%的 H2 SO3溶液标本瓶中 ,密闭瓶盖。2　保存红色　用 2 2 0 g硼酸、150 ml福尔马林、10 0 ml75%～ 90 %酒精、2 0 0 ml蒸馏水制成保存溶液 ,将红色标本 ,如红枣、枸杞子或番茄等洗净浸入 ,然后密封容器口。3　保存紫色　将饱和精盐水 50 0 ml,福尔马林 2 50 ml、蒸馏水 …     

小型昆虫整体玻片标本的简便制法

1.处死固定将蚊、蚜等置于70%酒精中杀死固定. 2.脱脂将材料装人试管中注入适量70%的氢氧化钾或氢氧化钠溶液加热脱脂,待水开后,再用文火维持15分钟左右. 3.清水漂洗:脱脂后用纱布过滤碱液,用蒸馏水或清水漂洗2-3次,再用蒸馏水将材料浸泡半小时左右. 4.染色用75%酒精、酸性品红饱和液染     

用绿豆芽根做根对矿质离子交换吸附实验效果好

1　促使绿豆生根　在实验前的三四天 ,将绿豆用温水浸泡 1夜 ,再用布料包裹住放入花盆内 ,置于温暖处并早晚各用温水冲 1次。经三四天的时间 ,根长可达 3cm以上 ,可供实验之用。2　将绿豆根染色　剪取 6条绿豆根 ,浸入亚甲基蓝溶液中 ,约 2 min左右 ,根被染成蓝色。然后将根取出用蒸馏水反复冲洗 ,去掉浮色备用。3　对比实验　取两个小烧杯 ,贴上标签。烧杯 1中加入约 5 m L的 Ca Cl2 溶液 ,烧杯 2中加入约 5 m L的蒸馏水。用镊子夹取 3条根放入烧杯 1中 ,夹取另 3条根放入烧杯2中。4　实验结果　小烧杯 1中的溶液在几秒钟内便由无色变成…     

TTC法测定红豆杉细胞活力

取悬浮培养红豆杉细胞,加入TTC溶液及缓冲液,避光保存后,以蒸馏水洗细胞3次,再用乙醇使细胞完全脱色后,测波长485 nm处吸光值.结果以0.4%的TTC溶液,0.1 mol@L-1(pH 7.0)的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液,25℃处理13～16 h为最适..     

测定红豆杉悬浮细胞中多酚氧化酶活性的反应条件初探

多酚氧化酶 (ＰＰＯ)是导致红豆杉培养细胞褐变的主要因素 ,迄今这一问题尚未得到根本解决。本文初步探讨了不同ｐＨ值和温度 ,以及聚乙烯吡咯烷酮等 4种化合物对红豆杉悬浮培养细胞中ＰＰＯ活性的影响。红豆杉 (Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ)细胞来自华中理工大学生物工程系。称取 1ｇ细胞加入ｐＨ 6 .8的0 .0 5ｍｏｌ·Ｌ-1磷酸缓冲液中 ,在 4℃下研磨后 ,于 2℃低温离心 (1 5 0 0 0×ｇ) 2 0ｍｉｎ ,取 0 .1ｍｌ上清液 (粗酶液 ) ,以 0 .0 2ｍｏｌ·Ｌ-1邻苯二酚为底物 ,测定多酚氧化酶活性。酶活性以每ｍｉｎ光密度变化 0 .0 0 1为 1个…     

植物淀粉酶的作用实验

种子萌发时,淀粉酶的产生,可用碘色反应进行定性鉴定.具体步骤如下: (一)实验材料的准备 1.琼脂培养基 10克可溶性淀粉和10克琼脂加1升蒸馏水,搅拌加热熔化后,慢慢地倒入灭过菌的培养皿中,铺成厚2—3毫米的薄层.琼脂凝固后备用。 2.萌发种子取大麦、小麦、水稻之类的种子,先用清水冲洗干净,再在5—7％漂白粉溶液中浸泡约10分钟进行灭菌.用清水冲洗2—3次,再将种子排放在垫有吸足水的脱脂棉的培养皿中(如图).使之萌发,一日后即可使用。 3.碘溶液取碘1.2克和碘化钾2.5克于烧     

聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分离血红蛋白的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,借助圆盘电泳仪的简易装置,对正常血红蛋白及异常血红蛋白(Hb)等进行了分析,获得满意效果。一、方法 1.凝胶制备 40％聚丙烯酰胺液(丙烯酰胺38.4克及甲叉双丙烯酰胺1.6克溶于蒸馏水至100毫升)1份,20％两性载体(Ampholine,国产、pH4—10)0.5份,蒸馏水3份,0.25％过硫酸铵液(临用前配制)2份,混匀,立即分装于内径4毫米,长9厘米的玻管中,胶长6厘米,日光灯下聚胶(约2小时),待胶聚合后,加样     

小鼠骨髓细胞的染色体制备

在实验教学中,我们借鉴有关方法,经过多次实践,证明用小鼠骨髓细胞作动物染色体的制备实验,方法简便可靠,结果明显.现介绍如下,供高等院校或中学生物学实验参考. 1.前处理实验用小白鼠(重25克左右),腹腔注射0.1毫升0.1％的秋水仙素溶液. 2.取材注射后2.5—3小时,用乙醚将小鼠麻醉(或直接处死小鼠),立即取出股骨,剔净肌肉. 3.低渗用剪刀将股骨两端剪开,用注射器吸入1毫升0.05M氯化钾低渗液,插入一端,冲洗出骨髓细胞,滴于培养皿中的载玻片上(载玻片置于二根玻棒之上).再加入适量的低渗液,并用滴管展开.盖上培养皿,在37℃下低渗处理20分钟. 4.固定低渗后,往培养皿中缓缓注入甲醇、冰醋酸固定液(3:1),盖上培养皿,固定100分钟.换入无