P—选择素研究进展

Ｐ－选择素是粘附分子选择素家族的重要成分之一,参与细胞间、细胞与基质间的粘附,在炎症,栓塞及肿瘤转移中起重要作用,本文着重介绍了Ｐ－选择素的结构特点,配体,表达调控及检测方面的研究进展。     

粘附分子P选择素与疾病关系研究

粘附分子Ｐ选择素与疾病关系研究周同,李晓,楼鼎秀,董德长（上海第二医科大学附属瑞金医院上海　２０００２５）选择素（ｓｅｌｅｃｔｉｎｓ）是新近被发现属细胞粘附分子一个家族。包括Ｐ选择素（Ｐ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ）、Ｅ选择素（Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ）和Ｌ选择素...     

棉铃虫的细胞色素P-450单加氧酶系与菊酯类杀虫剂抗药性的关系(英文)

细胞色素Ｐ－４５０单加氧酶系在昆虫抗药性中起重要作用。本文研究了棉铃虫抗性品系与敏感品系间细胞色素Ｐ４５０含量、对－硝基茴香醚Ｏ－脱甲基酶和艾氏剂环氧化酶的差异。结果表明：抗性品系中细胞色素Ｐ－４５０含量、对－硝基茴香醚Ｏ－脱甲基酶活性分别是敏感品系的１．７１倍和２．２１倍,而艾氏剂环氧化酶活性仅为１．３５倍。因此细胞色素Ｐ－４５０含量和对－硝基茴香醚Ｏ－脱甲基酶在棉铃虫抗菊酯品系中起重要作用。进一步讨论了不同抗性品系间抗性机制不同的原因。     

高产人参寡糖素培养细胞克隆系的筛选

人参（ＰａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇＣ．Ａ．Ｍｅｙ．）培养细胞经细胞平板克隆,获得近３００个克隆系。克隆系在细胞生长速率和寡糖素含量及产率上均存在显著差异,且寡糖素产率和细胞生长之间有明显的相关性。经１１代连续继代培养观察及过氧化物酶同工酶谱特征分析,筛选到一株寡糖素产率高且稳定的克隆系ＰＧ－１８０,其平均生长速率是０．４９５ｇ于重／Ｌ·天,为原始株系的１．３９倍,平均寡糖素含量为１４．６９％干重,是亲本的１．６５倍,平均寡糖素产率是２．１８３ｇ／Ｌ,为原始株系的２．３２倍。比较克隆系ＰＧ－１８０和原始株系细胞悬浮培养时间进程发现,由人参培养细胞生产寡糖素的最佳细胞收获期为３周左右。     

脓青素促进叶绿体中细胞色素b－559的光还原

当脓青素存在时，可以观察到菠菜叶绿体中光诱导的５５９ｎｍ吸收增加。此反应可以被光（波长６５０ｎｍ）诱导，但远红光（波长７２０ｎｍ）则无作用．光暗差示光谱表明被还原的物质为细胞色素ｂ－５５９。脓青素的作用在１μｍｏｌ／Ｌ接近饱和．并且其作用与跨膜质子梯度无关．脓青素所促进的细胞色素ｂ－５５９光还原被抑制剂ＤＣＭＵ和ＤＢＭＩＢ所抑制，但在氰化钾处理过的叶绿体中，脓青素依然促进细胞色素ｂ－５５９的光还原．在ＣＣＣＰ处理的叶绿体中，可以看到低光强红光诱导的细胞色素ｂ－５５９氧化。脓青素可以逆转ＣＣＣＰ的作用；促进细胞色素ｂ－５５９在高光强或低光强下都为红光还原。我们推测脓青素通过质子化作用，影响了细胞色素ｂ－５５９的光氧化还原反应．     

豚鼠腹腔神经节迟慢兴奋性突触后电位与5－HT和P物质的关系

应用细胞内记录,研究了豚鼠腹腔神经节（ＣＧ）细胞非胆碱能迟慢兴奋性突触后电位（ＬＳ－ＥＰＳＰ）与５－羟色胺（５－ＨＴ）及Ｐ物质（ＳＰ）的相互关系。当重复电刺激内脏大神经（ＳＮ）时,有７８．２％的细胞（１６１／２０６）在动作电位发放后出现ＬＳ－ＥＰＳＰ,灌注或压力注射５－ＨＴ或ＳＰ,分别在６８．５％的细胞（１０２／１４９）及５２．１％的细胞（９８／１８８）上引起５－ＨＴ或ＳＰ去极化反应,两者差异非常显著（Ｐ＜０．０１）;大部分具有ＬＳ－ＥＰＳＰ的细胞对５－ＨＴ（７３／８８,８３．０％）或ＳＰ（６８／１１４５９．６％）敏感,而不出现ＬＳ－ＥＰＳＰ的细胞仅有少数对５－ＨＴ（１０／２６,３８．５％）或ＳＰ（１１／３６,３０．６％）敏感,两类细胞的差异非常显著（５－ＨＴ：Ｐ＜０．０００１,ＳＰ：Ｐ＜０．０１）。上述结果支持５－ＨＴ与ＳＰ均作为递质参与ＬＳ－ＥＰＳＰ形成的观点。此外,在１３３个细胞上同时检测了５－ＨＴ与ＳＰ的作用,其中有６６个细胞（４９．６％）对５－ＨＴ及ＳＰ均敏感,提示在ＣＧ细胞,５－ＨＴ与ＳＰ之间可能存在某种机能联系。     

艾氏剂环氧化酶及细胞色素P－450对小菜蛾抗药性发展的影响

本文对室内长期饲养的小菜蛾（Ｐｌｕｔｅｌｌａ　ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ　Ｌ．）敏感品系和田间采集的抗性种群体内的艾氏剂平氧化酶及细胞色素Ｐ－４５０进行了比较研究。结果证明,艾氏剂环氧化酶在感性和抗性小菜蛾间存在着量及质的差异。抗性种群的艾氏剂环氧化酶的Ｖｍａｘ和Ｋｍ值分别为感性品系的５．４％和６．５倍。抗性种群的细胞色素Ｐ－４５０的含量是感性品系的１．１—１．３倍。艾氏剂环氧化酶在量上及质上的差异及细胞色素Ｐ－４５０含量的提高是导致小菜蛾抗药性发生与发展的重要机制之一。而且质的差异较之量的差异可能起着更为重要的作用．     

高产人参寡糖素培养细胞克隆系的诱变筛选

紫外辐射能显著地降低人参培养细胞单细胞克隆的植板率。当紫外辐射悬浮细胞３０ｓ后,细胞克隆的植林率是对照组的２１．４３％。细胞克隆平板培养６０ｄ,挑取克隆连续转移培养３次,共获得克隆系１２２株。对所有克隆系进行变异分析并经１０代连续继代培养,从中筛选到一株稳定的高产寡糖素克隆系ＰＧＵＡ－０８,而且它的过氧化物酶同工酶谱特征也保持稳定。克隆系ＰＧＵＡ－０８的生长速率为０．５３７ｇＤＷＬ－１ｄ－１,是亲本的１．４６倍,寡糖素含量为１７．１６％ＤＷ,是亲本的１．８１倍,寡糖素产率为２．７６４ｇ／Ｌ,是亲本的２．６２倍。     

豚鼠腹腔神经节迟慢兴奋性突触后电位与5—HT和P物质的关系

应用细胞内记录,研究了豚鼠腹腔神经节细胞非胆碱能迟慢兴奋性突触后电位与５－羟色胺及Ｐ物质的相互关系。当重复电刺激内脏大神经时,有７８．２％的细胞在动作电位发放后出现ＬＳ－ＥＰＳＰ;灌注或压力注射５－ＨＴ或ＳＰ,分别在６８．５％的细胞（１０２／１４９）及５２．１％的细胞（９８／１８８）上引起５－ＨＴ或ＳＰ去极化反应,两者差异非常显著（Ｐ〈０．０１）;大部分具有ＬＳ－ＥＰＳＰ的细胞对５－ＨＴ（７３／８     

外源激素在诱导风信子花被外植体不同部位细胞再生花芽中的作用

外源激素诱导风信子（Ｈｙａｃｉｎｔｈｕｓ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓＬ．）同一发育时期花被外植体不同部位细胞再生花芽的实验表明∶１． 诱导花被外植体细胞再生花芽,外源激素是必需的;２． 仅有细胞分裂素就可以诱导花芽再生,生长素并不是必需的;３． 花被外植体上的不同部位的细胞再生花芽时,需要不同浓度的外源激素． 单独加６－ＢＡＰ或玉米素２ ｍ ｇ／Ｌ可以诱导花被下部的细胞再生花芽;６－ＢＡＰ或玉米素２ ｍ ｇ／Ｌ和２,４－Ｄ ０．１ ｍ ｇ／Ｌ的组合有利于花被中部的细胞再生花芽;６－ＢＡＰ或玉米素２ ｍ ｇ／Ｌ和２,４－Ｄ １．０ ｍ ｇ／Ｌ的组合能促进花被上部的细胞分化花芽     

亲和素结合蛋白性质的研究

前曾发现在日本血吸虫虫卵中,存在一种新的能与亲和素专一性结合的蛋白质,称为亲和素结合蛋白（ＡＢＰ）。在分离纯化ＡＢＰ的基础上,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０分别测定了ＡＢＰ的分子量,并做了糖蛋白染色及等电,大测定。实验结果表明ＡＢＰ是一个分子量为６５ｋＤ的碱性糖蛋白,由数个相同的分子量为１２．７ｋＤ的亚单位组成。ＳＤＳ、β－巯基乙醇处理的ＡＢＰ仍能与亲和素结合,提示ＡＢＰ的亚单位能与亲和素结合。氨基酸修饰剂ＮＡＩ、ＤＴＮＢ、ＮＥＭ及ＮＢＳ对ＡＢＰ与亲和素的结合有不同程度的影响,而ＨＮＢＢ、ＴＮＢＳ及ＩＡＡ对ＡＢＰ与亲和素的结合无影响,提示ＡＢＰ分子中氨基酸残基Ｔｙｒ、Ｃｙｒ是ＡＢＰ与亲和素结合所必需的,可能参与结合位点的形成。另外,测得ＡＢＰ与亲和素结合的结合常数为１．４×１０~（－７）ｍｏｌ／Ｌ。     

溃疡病胃窦幽门腺β-内啡肽样免疫反应细胞体视学分析

应用真彩色图象分析仪,对１５例ＤＵ、ＧＵ和Ｃｏｎ组患者,非病变区胃窦粘膜幽门腺,１５１个β－内啡肽样免疫反应细胞（β－ＥＰ细胞）的１２个参数进行检测及每组７５个单位面积（５０００μｍ２）的β－ＥＰ细胞进行计数。β－ＥＰ细胞的周长、面积、长径、短径和平均体积数值是ＤＵ组＜ＧＵ组＜Ｃｏｎ组,各组间两两相比,均呈高度显著性差异,Ｐ＜０．０１。在ＤＵ与Ｃｏｎ组、或ＧＵ与Ｃｏｎ组之间,比表面、平均截距、平均表面积和平均直径数值相比,亦呈高度显著性差异,Ｐ＜０．０１。ＤＵ组β－ＥＰ细胞数增高,与ＧＵ或Ｃｏｎ组分别相比,均呈高度显著性差异,Ｐ＜０．０１。在三组中,β－ＥＰ细胞的比表面积、平均截距、平均表面积、平均直径数值和细胞数的显著性差异率在６０％以上,周长、面积、长径、短径和平均体积数值达１００％。本文首次建立了ＤＵ、ＧＵ和Ｃｏｎ组非病变区胃窦粘膜幽门腺β－内啡肽细胞的二维和三维形态计量学参数数据,提示β－ＥＰ细胞参与了溃疡病的内分泌调控活动。     

人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）、ＰＤＧＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达和肾素－血管紧张系统（ＲＡＳ）的影响,结果显示,ＨＳＰＧ明显抑制培养的ｈＡＳＭＣ基础的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：１０３８５±３２６３ｖｓ,２５５４１±６４２１,Ｐ＜０．０１）及外源性ＰＤＧＦ诱导的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：９８７８±１９４７ｖｓ．１３４８１±４４ｌ０,Ｐ＜０．０５）;抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－Ｂｐ和ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,提高ＰＤＧＦａ和β受体ｍＲＮＡ的表达;显著降低ｈＡＳＭＣ培养液中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的活性,推测ＨＳＰＧ抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－β及ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,降低ＡＣＥ活性及ＡｎｇⅡ浓度是其抑制ｈＡＳＭＣ增殖的重要机     

动脉平滑肌细胞sis／PDGF—B链的表达和调控

介绍平滑肌细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链表达和调控的进展。ｃ－ｓｉｓ原癌基因是ＰＤＧＦ－Ｂ的同源基因,将外源的ＰＤＧＦ基因导入哺乳类细胞是研究ＰＤＧＦ功能和调控的重要手段。内皮素ＩＬ、ＴＮＦ、血管紧张素Ⅱ和蛋白激酶Ｃ可调节ｓｉｓ基因的表达。ｓｕｒａｍｉｎ和新霉素的人工合成为拮抗ＰＤＧＦ效应提供广阔的前景。ｃ－ｓｉｓ可通过激活ｃ－ｍｙｃ,ｃ－ｆｏｓ等原癌基因而促进细胞增殖。     

神经节苷脂GM_3对人白血病J6－2细胞磷脂酰胆碱代谢的影响

神经节苷脂ＧＭ３诱导人单核样白血病Ｊ６－２细胞沿单核／巨噬细胞途径分化．在ＧＭ３诱导分化同时,Ｊ６－２细胞磷脂代谢发生了显著变化．采用（（３２）Ｐ）Ｐｉ、［ＧＨ３－３Ｈ］胆碱和［ＣＨ３－３Ｈ］ＳＡＭ参入实验对ＧＭ３影响Ｊ６－２细胞ＰＣ代谢的机制进行了初步的探讨．ＧＭ３促进［（３２）Ｐ］Ｐｉ参入Ｊ６－２细胞ＰＣ;抑制［ＣＨ３－３Ｈ］胆碱参入ＰＣ及ＰＣ合成的前体磷酸胆碱及ＣＤＰ－胆碱;ＧＭ３促进［ＣＨ３－３Ｈ］ＳＡＭ参入ＰＣ,但抑制［ＣＨ３－３Ｈ］ＳＡＭ参入ＰＣ合成的前体胆碱、磷酸胆碱和ＣＤＰ－胆碱．上述结果提示,ＧＭ３抑制Ｊ６－２细胞ＰＣ合成的ＣＤＰ－胆碱途径,促进ＰＣ合成的ＰＥ甲基化途径．     

高及低转移潜能小鼠肝癌细胞株糖蛋白凝集素结合特征的研究

为探讨肿瘤转移与细胞表面的糖结构的关系,对小鼠肝癌细胞的高、低淋巴道转移株Ｈｃａ－Ｆ和Ｈｃａ－Ｐ进行了蛋白质电泳及经蛋白质印迹术后的５种凝集素（ＣｏｎＡ、ＷＧＡ、ＵＥＡ、ＳＢＡ、ＰＮＡ）结合糖蛋白谱的对比分析．结果表明：高、低转移两株细胞的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱基本相同;ＣｏｎＡ特异结合糖蛋白共有５种（～７２,８０～９０,～１０４,～１５０,～２００ｋＤ）;其中较明显的差异为～７２ｋＤＣｏｎＡ特异结合糖蛋白,它在Ｈｃａ－Ｐ细胞的表达明显高于Ｈｃａ－Ｆ细胞．ＷＧＡ特异结合糖蛋白１种（～１５０ｋＤ）,在Ｈｃａ－Ｐ细胞的表达略高于Ｈｃａ－Ｆ细胞．此外,实验发现两种性质未明的蛋白质（～７９,～１３０ｋＤ）,后者在Ｈｃａ－Ｐ细胞的含量明显高于Ｈｃａ－Ｐ细胞．结果提示Ｈｃａ－Ｆ和Ｈｃａ－Ｐ细胞不同的转移表型可能与其糖蛋白的表达有一定的关联．     

血管再狭窄发生过程中MMP-2基因表达与胶原转换的动态变化

建立主动脉内皮剥脱后血管再狭窄大鼠模型,用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹分析、含明胶ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、羟脯氨酸含量测定及流式细胞术动态观察血管再狭窄发生过程中ＭＭＰ－２基因表达与胶原转换及血管细胞增殖之间的关系．实验结果表明,血管内皮剥脱后,ＭＭＰ－２基因表达被显著诱导,ＭＭＰ－２活性及胶原转换明显增高,在第７ ｄ,ＭＭＰ－２表达活性及胶原合成与降解均达到峰值;第２１ ｄ,ＭＭＰ－２表达恢复正常,胶原合成和降解仍维持在较高水平．流式细胞分析结果显示,血管内皮剥脱后进入增殖状态及发生凋亡的细胞显著增加,增殖细胞所占比例高于凋亡细胞,且两者均随内皮损伤后的时间延长而增加．     

动脉平滑肌细胞sis／PDGF－B链的表达和调控

介绍平滑肌细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链表达和调控的进展。ｃ－ｓｉｓ原癌基因是ＰＤＧＦ－Ｂ的同源基因,将外源的ＰＤＧＦ基因导入哺乳类细胞是研究ＰＤＧＦ功能和调控的重要手段。内皮素、ＩＬ、ＴＮＦ、血管紧张素Ⅱ和蛋白激酶Ｃ可调节ｓｉｓ基因的表达。ｓｕｒａｍｉｎ和新霉素（ｎｅｏｍｙｃｉｎ）的人工合成为拮抗ＰＤＧＦ效应提供广阔的前景。ｃ－ｓｉｓ可通过激活ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ等原癌基因而促进细胞增殖。     

亲和素结合蛋白性质的研究

前曾发现在日本血吸虫虫卵中,存在一种新的能与亲和素专一性结合的蛋白质,称为亲和素结合蛋白,在分离纯化ＡＢＰ的基础上,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０分别测定了ＡＢＰ的分子量,并做了糖蛋白染色及等电点测定,实验结果表明ＡＢＰ是一个分子量为６５ｋＤ的碱性糖蛋白,由数个相同的分子量为１２．７ｋＤ的亚单位组成。ＳＤＳ、β－硫基乙醇处理的ＤＤＢＰ仍能与亲和素结合,提示ＡＢＰ的亚单位能与亲和素结     

PIC-BE诱导K562/ADM细胞凋亡及逆转其MDR的研究

β榄香烯吗素（ＰＩＣ－ＢＥ）是抗癌新药β榄香烯的水溶性衍生物．采用人红白血病的多药耐药性（ＭＤＲ）细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ作为实验模型,观察ＰＩＣ－ＢＥ对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,并进而研究其对该细胞ＭＤＲ的可能影响．结果显示：（１）Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对ＡＤＭ具有明显的抗性,与Ｋ５６２细胞相比,抗性倍数约为４０倍,而两者对ＰＩＣ－ＢＥ的ＩＣ５０接近,无显著差异;（２）ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０～３０．０μｇ／ｍｌ）对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞具有明显的生长抑制和凋亡诱导作用,两种作用的强度在一定的范围内均具药物浓度和作用时间依赖性;（３）低毒剂量ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０μｇ／ｍｌ）与ＡＤＭ（４．０μｇ／ｍｌ）联合应用,可显著增强ＡＤＭ对该细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,升高细胞内ＡＤＭ的浓度,降低该细胞对ＡＤＭ的ＩＣ５０,使该细胞对ＡＤＭ的抗性有数倍逆转．上述结果提示,ＰＩＣ－ＢＥ不仅是一种有效的广谱抗肿瘤剂,而且也是一种有效的ＭＤＲ逆转剂