鲫鱼尾部神经分泌系统显微和亚显微结构的季节性变化

鲫鱼尾部神经分泌系统的神经分泌细胞和它的轴突中可观察到各种不同电子密度的颗粒。在性腺各个不同的发育阶段,该系统的分泌物具有累积、充满、释放和恢复这样一种周期性变化,由此说明鲫鱼的尾部神经分泌系统和它的生殖有关。     

电镜图像定量分析肺毛细血管碱性磷酸酶在高压氧研究中的应用

采用碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的电镜细胞化学方法,观察在高压氧条件下小鼠肺毛细血管ＡＬＰ活性的分布、活性强度与超微结构改变之间的联系,并用计算机图像定量测量方法对酶活性变化进行了２１个参数的定量分析。文中介绍了多参数图像定量分析方法及计算公式。     

富硒转白细胞介素2基因双歧杆菌对小鼠移植瘤H22的治疗作用

目的评价富硒和转白细胞介素2（IL2）基因双歧杆菌对小鼠移植瘤H22的抑制效果。方法通过电转导将含IL2质粒导入到长双歧杆菌（Bifidobacterium longum,B.longum）中,将转IL2基因双歧杆菌接种到添加了亚硒酸钠（Na2SeO3）的培养基中,利用微生物的富集及转化作用,形成富硒的含IL2基因质粒的双歧杆菌（Se-B.longum-IL2）。结果利用双歧杆菌的肿瘤厌氧区靶向性,通过荷肝癌H22的小鼠尾静脉注射Se-B.longum-IL2,取得了良好的抑瘤效果与荷肝癌小鼠生存延长效果。结论转IL2基因双歧杆菌和富硒联合后对小鼠肝癌有明显的基因治疗前景。     

大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达载体的构建及内皮抑素基因的表达

目的:构建大肠杆菌-长双歧杆菌穿梭表达载体,并通过此载体使人内皮抑素基因在大肠杆菌和长双歧杆菌中得到表达。方法:以质粒pDG7、pBCSK( )、pET-9C为基础,构建大肠杆菌-长双歧杆菌穿梭表达载体pET-1128,并将人内皮抑素基因插入到新构建的表达载体中,分别转化大肠杆菌BL21(DE3)和长双歧杆菌NQ-1501。诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和WesternBlot鉴定。结果:成功构建了大肠杆菌-双歧杆菌穿梭载体,人内皮抑素基因在大肠杆菌和长双歧杆菌中均可表达。结论:构建的穿梭载体为今后用双歧杆菌作为生理菌载体进行肿瘤的基因治疗奠定了基础。     

RNA干扰抑制SiHaB2细胞中Bcl-2基因的表达

Bcl-2基因作为细胞凋亡的一个潜在抑制剂调节细胞的死亡,抑制恶性肿瘤细胞中Bcl-2基因的表达可促进肿瘤细胞的凋亡。采用RNA干扰技术,合成了含有21个核苷酸的小双链干扰RNA（siRNA．Bcl-2）,并构建了含有19个核苷酸基因的质粒载体（pSilencer2．1-U6-Bcl-2）,把合成的siRNA．Bcl-2和pSilencer2．1-U．Bcl-2分别转导入Bcl-2高表达的细胞株SiHaB2中,通过Western印迹检测,免疫荧光法检测及DNA梯（ladder）检测,可观察到在导入siRNA．Bcl-2和pSilencer2．1-U．Bcl-2的SiHaB2细胞被培养72h后,可以明显抑制Bcl-2蛋白的表达。     

磷酸酶的三种铈法光镜定位比较

我们用Ce-DAB法、Ce-Pb法和Ce-Pb- AgS法对兔肾和肝脏的四种磷酸酶进行了光镜定位,并对这三种铈法进行了比较。Ce-DAB法反应较强,Ce-Pb-AgS法次之,Ce-Pb法反应较弱。但用这3种方法在光镜下均可清晰地显示这4种磷酸酶的活性,从而使铈法可同时应用于电镜和光镜下的磷酸酶的活性定位。     

兔肾皮质-D氨基酸氧化酶和α-羟酸氧化酶的铈法定位及能谱分析

用铈作捕捉剂,在光镜和电镜下进行兔肾皮质的D-氨基酸氧化酶和α-羟酸氧化酶活性定位。光镜下用Ce-DAB法可显示这两种氧化酶的定位;电镜下,这两种酶主要定位在肾近端小管微绒毛和过氧物酶体上,用能谱仪对这些酶反应产物进行X射线微区元素分析显示铈峰,表明酶的铈法反应具特异性。     

溃疡病胃窦幽门腺β-内啡肽样免疫反应细胞体视学分析

应用真彩色图象分析仪,对１５例ＤＵ、ＧＵ和Ｃｏｎ组患者,非病变区胃窦粘膜幽门腺,１５１个β－内啡肽样免疫反应细胞（β－ＥＰ细胞）的１２个参数进行检测及每组７５个单位面积（５０００μｍ２）的β－ＥＰ细胞进行计数。β－ＥＰ细胞的周长、面积、长径、短径和平均体积数值是ＤＵ组＜ＧＵ组＜Ｃｏｎ组,各组间两两相比,均呈高度显著性差异,Ｐ＜０．０１。在ＤＵ与Ｃｏｎ组、或ＧＵ与Ｃｏｎ组之间,比表面、平均截距、平均表面积和平均直径数值相比,亦呈高度显著性差异,Ｐ＜０．０１。ＤＵ组β－ＥＰ细胞数增高,与ＧＵ或Ｃｏｎ组分别相比,均呈高度显著性差异,Ｐ＜０．０１。在三组中,β－ＥＰ细胞的比表面积、平均截距、平均表面积、平均直径数值和细胞数的显著性差异率在６０％以上,周长、面积、长径、短径和平均体积数值达１００％。本文首次建立了ＤＵ、ＧＵ和Ｃｏｎ组非病变区胃窦粘膜幽门腺β－内啡肽细胞的二维和三维形态计量学参数数据,提示β－ＥＰ细胞参与了溃疡病的内分泌调控活动。     

一种含ELP60基因的载体pRELPN促进大肠杆菌的外源基因的高表达

类弹性蛋白多肽（ELP）为含有人工合成的ELP60基因的表达载体pRELPN,能促使外源基因在大肠杆菌中的高表达。当ELP60在大肠杆菌表达载体pET28a的多克隆位点被克隆后,其自身的表达低,也不与目的基因构成ELP融合蛋白质,而是促进克隆在ELP60基因后的含起始密码ATG的外源目的基因独立高表达。外源目的基因表达量占宿主蛋白的20% ～ 60%,比用pET28a载体表达的外源基因表达量高2～10倍。此类表达载体pRELPN适合于表达包括抗体、抗原、酶、重组蛋白质、多肽及ELP融合蛋白质等的外源基因的独立高表达。这些结果表明,pRELPN代表了一种有效的表达载体,有助于解决在原核表达中,所受限的普通载体对外源基因低表达或不表达所导致的不能产业化的问题。     

肺细胞色素氧化酶体视学测量法在高压氧研究中的应用

采用超微结构细胞化学方法,用计算机图象分析仪测量计算了小鼠肺毛细血管和Ⅱ型肺泡线粒体、线粒体膜和嵴上细胞色素氧化酶活性变化的二维形态学、三维立体学定量参数。结果表明,毛细血管线粒体面积较Ⅱ型肺泡细胞小,但体密度却大;毛细血管线粒体细胞色素氧化酶阳性反应面积比正型肺泡细胞小,但酶反应体密度却大、暴露于高压氧（０．５ＭＰａ）后小鼠Ⅱ型肺泡细胞线粒体细胞色素氧化酶活性降低。