ERAP1与强直性脊柱炎关系研究进展

HLA-B27作为强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的一个遗传学标志和致病因子为人们所熟知,但随着基因检测技术的发展,更多与AS相关的基因被发现,包括ERAP1。ERAP1的主要功能是剪切合适长度的抗原肽,以便MHC-I类分子提呈,功能异常的ERAP1与AS发病相关。在此过程中,ERAP1与HLA-B27密切配合。ERAP1分子多态性产生异常抗原肽提呈谱和HLA-B27分子表达,并通过固有免疫和适应性免疫机制介导AS发病。现围绕ERAP1基因与AS的关系、ERAP1基因单核苷酸多态性与其功能改变以及ERAP1参与AS的免疫机制作一综述。     

用组合肽库技术分析HLA-B27的抗原提呈模式

HLA分子抗原表位提呈模式的分析,在自身免疫病和肿瘤的病因与治疗研究方面有重要意义。本研究采用组合肽库的策略合成19组ORX7型肽亚库,通过与荧光素标记肽的竞争结合试验,分析了与强直性脊柱炎有强相关的HLA-B27分子的抗原提呈模式。结果显示HLA-B27与P1为不同氨基酸残基的19种肽亚库有相近的结合率,提示P1为非锚定残基;中国人群最常见的二种HLA-B27亚型B*2704和B*2705,在提呈肽表位的P1模式方面存在一些小差异,P1为D或E的肽亚库与HLA-B*2704的结合能力要强一些,而P1为K的肽亚库则与HLA-B*2705的结合能力强一些。本研究为HLA-B27与强直性脊柱炎关联机制的研究提供了线索,为开展HLA分子的抗原提呈模式分析打下了基础。     

闽南地区HLA-B27基因亚型与强直性脊柱炎相关性研究

目的对闽南地区人群中HLA-B27阳性标本进行回顾性调研及分型检测,探讨闽南地区HLAB27亚型分布情况,分析HLA-B27亚型与强直性脊柱炎(AS)的相关性。方法采用PCR-SBT(测序法)基因分型技术,对流式细胞术(FCM)检测为阳性的186例标本进行HLA-B*27基因分型。结果 186例HLA-B27阳性(FCM法)标本中,再用PCR-SBT法检测,HLA-B*27基因型均为阳性;而基因亚型分布,174例为B*27:04亚型,占93.5%,有8例B*27:05亚型,占4.3%,B*27:15亚型2例,占1.1%,另外B*27:06和B*27:07各1例,均占0.5%。186例中有103例确诊为AS患者,其中98例为B*27:04亚型,占95.1%,3例为B*27:05亚型,占2.9%,B*27:07和B*27:15亚型各1例,均占1.0%。结论闽南地区HLA-B27阳性的强直病患者以B*27:04为主,其次为B*27:05。AS患者与其他B27基因携带者,在亚型分布上没有明显的差异。     

HLA-B27分子及其与强直性脊柱炎关联的研究进展

HLA-B27是MHCⅠ类分子,因而具有MHCⅠ类分子的相关生物学特性。在正常免疫状态下,HLA-B27分子执行对内源性抗原如肿瘤及病毒的免疫监视及杀伤功能;但在机体免疫状态出现异常的情况下,它又可能成为引发自身免疫性疾病的主要相关因素,其中最为著名的是其与强制性脊柱炎(AS)的关联研究。我们首先概述了HLAB27分子正常免疫学功能的研究进展,然后对其在AS相关性研究中的进展进行了总结和分析。通过对上述两方面的综述与分析,全方位展示HLA-B27在执行免疫学功能和引发免疫病理性改变方面的作用,为全面认识和深入研究HLA-B27分子的生理与病理学作用提供坚实的基础。     

HLA-B27分子及其与强直性脊柱炎关联的研究进展简

HLA-B27是MHCI类分子,因而具有MHCI类分子的相关生物学特性。在正常免疫状态下,HLA-B27分子执行对内源性抗原如肿瘤及病毒的免疫监视及杀伤功能;但在机体免疫状态出现异常的情况下,它又可能成为引发自身免疫性疾病的主要相关因素,其中最为著名的是其与强制性脊柱炎（As）的关联研究。我们首先概述了HLA—B27分子正常免疫学功能的研究进展,然后对其在AS相关性研究中的进展进行了总结和分析。通过对上述两方面的综述与分析,全方位展示HLA-B27在执行免疫学功能和引发免疫病理性改变方面的作用,为全面认识和深入研究HLA-B27分子的生理与病理学作用提供坚实的基础。     

一例强直性脊椎炎家族HLA抗原调查报告

多年来,人类白细胞抗原（HLA）与疾病 的关系一直受到人们的重视。已有许多学者证 实了HLA-B27抗原与强直性脊推炎（AS)表 现高度相关切。最近,本室根据19“年纽约会 议AS诊断标准‘3l辅以HLA一B27抗原检测, 在155名AS患者中发现19人具有AS家族 史,占12.2外。从单一的HLA 特异性证明了 部分AS病人的遗传特点。在这方面,台湾作者陈大明曾报道一AS病HLA-B27抗原调查 （不全家系）材料w,更详细的HLA资料未见 报道。     

人白细胞抗原HLA-B27在强直性脊柱炎中的临床意义

目的:探讨人白细胞抗原HLA-B27在强直性脊柱炎(AS)中的临床意义,及联合检测HLA-B27、C反应蛋白(CRP)和红细胞沉降率(ESR)的意义。方法:对18例AS患者、24例腰背痛患者和21健康体检者的血液标本进行HLA-B27、CRP、ESR检测,并比较其HLA-B27阳性率。结果:与健康对照组比较,AS组的3项指标均高于对照组(P0.05),且AS组HLA-B27阳性率均高于另外2组(P0.05)。结论:HLA-B27在强直性脊柱炎诊断中具有重要意义,与其具有高度疾病相关性,联合检测HLA-B27及CRP比联合检测HLA-B27及ESR更有利于疾病诊断。     

强直性脊椎炎的遗传模型分析

强直性脊稚炎（ankylosing spondylitis,简称 AS)是一种结缔组织疾病,表现为脊椎和骼骼 关节疼痛以至强直,男性患者约为女性的10 倍。家系调查表明该病的发生有遗传倾向;群 体调查表明,在蒙古种人、高加索种人和尼格罗 种人中AS都与人体白细胞抗原系统中的 HLA-B27抗原有强的关联(association)。目前 多数人认为这是由于存在一个与B27基因连锁 的‘`AS易感基因”(AS susceptibility gene),带 有这个基因的个体容易患病,在群体水平上表 现出与B27关联。Thomson等人E13根据高加索 种人中的调查资料推测这个基因可能是个显性 基因。本文对Thomson方法作了修正,根据国 内调查资料,对AS遗传模型进行了分析。     

抗原处理相关转运体蛋白的研究进展

抗原处理相关转运体(transporter associated with antigen processing,TAP)蛋白在抗原提呈途径中发挥重要作用,它负责将内源性抗原从胞浆运送到内质网(endoplasmic reticulum,ER),以便主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)I结合多肽。TAP属于ATP结合盒(ATP-binding cassette,ABC)转运蛋白超家族B族,是由TAP1和TAP2两个亚基构成的异二聚体蛋白,其每个亚基各含有一个亲水的核酸结合区和一个疏水的跨膜结构域,并具有促进肽段转运的结构域。TAP参与MHC I类分子的组装,并在人获得性免疫系统中起着至关重要的作用。TAP基因具有多态性,因而增加了个体对疾病的易感性。TAP基因的突变及其调节机制的缺陷都可以导致其活性和表达下调,从而影响病毒性感染和肿瘤等疾病的发生。     

恶性疟原虫CTL抗原微表位基因重组疫苗的构建和免疫原性预测

选用中国人群常见的MHCⅠ类分子HLA-A2.1和HLA-B51限制性恶性疟CTL抗原表位, 构建了单表位重组疫苗pcDNA3.1/tr和pcDNA3.1/sh,再将上述表位DNA序列串联,构建成双表位重组疫苗pcDNA3.1/ts.将3种重组疫苗分别转染C1R/HLA-A2.1和K562/HLA-B51细胞后均证实表达.单表位重组疫苗pcDNA3.1/tr和pcDNA3.1/sh的表达分别促进细胞表面HLA-A2.1和HLA-B51的稳定性.免疫共沉淀实验证实上述表位促进细胞表面HLAⅠ类分子组装,并提示特异性表位在细胞表面的递呈.双表位重组疫苗pcDNA3.1/ts在以上两个不同细胞系中的表达与两个单表位微型基因的表达结果相似,证明双表位肽的串联编码构型不影响肽链中不同表位的特异性抗原递呈.这一研究结果为进一步设计具有广泛覆盖率的多表位恶性疟重组CTL疫苗提供了理论和实验基础.与常规体外CTL实验不同,本研究观察微表位基因在表达特定MHCⅠ类分子的人细胞中进行内源性抗原递呈的过程,其方法更接近人体内环境,对于人类CTL抗原表位的确定和人重组CTL表位疫苗免疫原性的预测具有重要意义.     

热激蛋白gp96免疫学功能及在主动免疫治疗肿瘤和传染病中的应用

热激蛋白gp96可特异性结合来源于肿瘤和病毒的抗原肽,与抗原呈递细胞表面CD91等受体作用进入胞内,并在内质网中将结合的抗原通过抗原呈递链呈递给MHCI类分子,激活特异性T细胞。同时,与细胞表面Toll样受体(TLR)TLR2、TLR4等相互作用,激活天然免疫。近期研究发现调节性T细胞(Treg)对gp96免疫功能有显著抑制作用,随着对影响gp96免疫功能的免疫抑制机制的深入了解,以及利用汉逊酵母表达有免疫活性的全长gp96蛋白体系的建立,gp96将在治疗肿瘤及传染性疾病中发挥更大的作用。     

中国北方HLA-B27阳性强直性脊柱炎患者同乙型肝炎表面抗原阳性率无相关性

目的:评测中国北方人群HLA-B27阳性的强直性脊柱炎(AS)患者同乙型肝炎表面抗原(HBSAg)阳性率之间的相关性。方法:对我院2013年1~12月149例HLA-B27阳性的AS患者组和281例健康人组,以及264例HLA-B27阳性样本组和239例HLA-B27阴性样本组进行研究,外周血淋巴细胞HLA-B27阳性率的检测使用BeckmanCoulter公司的FC500流式细胞仪和BD公司的HLA-B27检测试剂盒(流式细胞法)。结果:149例HLA-B27阳性的AS患者中仅有2例为HBs Ag阳性(1.34%),281例健康人对照组中有9例为HBs Ag阳性(3.20%),二者之间无统计学差异(P0.05,卡方检验)。进一步检测发现264例HLA-B27阳性样本组和239例HLA-B27阴性样本组中HBSAg阳性样本分别为7(2.65%)和5例(2.09%),二者之间无统计学差异(P0.05,卡方检验)。结论:中国北方HLA-B27阳性强直性脊柱炎患者同乙型肝炎表面抗原阳性率无相关性。     

抗原受体与伴随分子

免疫细胞中的抗原受体分子直接影响着细胞的免疫应答过程。抗原受体在内质网中的正确折叠、组装过程是细胞合成有正常功能的抗原受体分子的关键步骤之一。研究表明抗原受体分子在内质网中的折叠、组装以及转运均与内质网中的伴随分子(Molecular Chaperones,或称伴侣分子)有关。因此,阐明内质网中抗原受体与伴随分子的相互作用过程对了解免疫细胞中的抗原受体分子的成熟以及抗原递呈有着重要的意义。     

小鼠淋巴细胞抗原CTLA-4的胞外肽段表达及纯化

目的: 真核细胞表达小鼠淋巴细胞抗原CTLA-4胞外段肽,研究表达肽段与抗原呈递细胞B7分子结合后减轻小鼠淋巴细胞刺激后的增殖抑制,从而启动T淋巴细胞进一步增殖。方法:从小鼠脾脏淋巴细胞获得总RNA,通过逆转录PCR扩增出CTLA-4全长基因,克隆并测序。依据胞外段序列和真核表达载体pcDNA3.1序列,合成引物扩增胞外片段,两者经内切核酸酶处理、连接构建重组表达pcDNA3.1载体,重组质粒经测序验证后,采用lipofectamine 2000转染入小鼠肝癌细胞Hepa1-6,经G418筛选获得稳定表达细胞株。结果:获得小鼠CTLA-4胞外段真核表达载体和小鼠肝癌细胞Hepa1-6稳定表达转染细胞株,制备了CTLA-4胞外肽段,经His标签抗体和小鼠CTLA-4抗体Western blot检测表达蛋白带均呈阳性。结论:获得CTLA-4胞外段肽,为进一步研究该肽的作用打下基础。     

双特异抗体与肿瘤的免疫治疗

抗体工程的发展,使免疫治疗继手术、放疗、化疗之后,成为治疗肿瘤的第4种可行方法,但是需要满足3个先决条件:1)肿瘤细胞存在着与正常细胞不同的标志成分;2)这些标志成分具有足够的免疫原性;3)免疫系统可针对带有标志成分的肿瘤细胞产生特异性的免疫应答。1　肿瘤的免疫机制肿瘤抗原的存在是诱导机体产生抗肿瘤免疫应答的前提。肿瘤抗原是细胞恶性变过程中出现的新抗原物质的总称。细胞恶性变过程中,由于基因突变或正常静止基因的激活,可以产生新的蛋白质分子。这些蛋白质在细胞内降解后,某些短肽可与组织相容性抗原(MHCI)类分子在内质网中…     

两种人粒酶B嵌合基因的表达及对肿瘤细胞的杀伤作用

通过重组PCR构建了抗HER2单链抗体基因、绿脓杆菌外毒素 (PE)转位肽序列和活性型粒酶B(GrBa)基因相融合的sFv2 3e PEⅡ GrBa基因 ,以及N端包含PE部分转位肽序列的PEⅡ GrBa基因 .将这 2种粒酶B嵌合蛋白基因瞬时转染或稳定转染HeLa细胞及SKBR 3细胞 .通过间接免疫荧光、细胞计数、MTT、ELISA等方法 ,观察到细胞浆中表达的PEⅡ GrBa蛋白直接杀伤其表达细胞 ;而sFv2 3e PEⅡ GrBa表达后被分泌至细胞外 ,对产生它的细胞没有杀伤性 ,但能够特异识别并杀伤HER2阳性肿瘤细胞 .结果表明 ,抗肿瘤表面抗原的抗体能够介导靶向识别 ,转位结构域可以辅助效应分子活化、转位至细胞液并杀伤细胞 ,为肿瘤的靶向治疗提供了新的策略 .     

干扰素-γ基因多态性与乙型肝炎病毒感染

干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)是重要的辅助型T细胞-1型(type-1 helper T-cell,Th1)细胞因子,它作为抗原提呈细胞和淋巴细胞增殖、分化的调节剂,参与机体的炎症反应和抗病毒免疫。细胞因子的基因多态性影响细胞因子的表达水平,导致个体间免疫反应的差异,最终影响感染后的发展趋势和临床转归。本文主要就IFN-γ基因多态性与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)自发清除、感染慢性化、肝硬化、肝癌及抗病毒治疗的相关研究进行评述。     

强直性脊柱炎差异表达基因的生物信息学分析

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者差异表达基因,并基于差异基因探讨强直性脊柱炎发病相关的可能生物学过程和信号通路。方法检索基因表达谱数据库(GEO)并筛选AS相关基因表达谱数据集。应用GEO在线分析功能GEO2R分析AS组和正常对照组的差异表达基因,用Cytoscape软件clueGO插件进行基因本体论和京都基因与基因组百科全书分析,采用String蛋白-蛋白相互作用(PPI)数据库分析差异表达基因编码蛋白间的相互作用;应用Cytoscape绘制蛋白相互作用网络图,并软件筛选信号通路关键基因分析。结果选取AS患者全血表达数据集GSE25101为研究对象,分析获得差异表达基因72个。72个差异表达基因分子功能主要为参与高迁移率族盒染色体蛋白1(HMGB1)转导机制;生物学过程主要富集于巨噬细胞迁移、骨髓细胞凋亡过程、线粒体呼吸链复合体装配、ATP合成偶联电子传输、线粒体ATP合成耦合电子输运等;细胞成分主要富集于呼吸链复合体、线粒体呼吸体等。信号通路富集于氧化磷酸化信号通路和帕金森综合征相关信号通路。PPI网络经过cytohubba插件筛选,ATP5J、NDUFS4、UQCRB、UQCRH、NDUFB3、COX7B、LSM3、ATP5EP2、ENY2、PSMA4被筛选为网络中的核心基因。结论通过生物信息学方法进行预测了AS的潜在机制,并筛选出10个潜在的与AS相关的重要分子,其中氧化磷酸化可能在AS发病机制中发挥了重要的作用。     

葡萄糖调节蛋白78研究进展

葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78kD, GRP78)又称免疫球蛋白重链结合蛋白(immunoglobulin heavy chain binding protein, Bip),是位于内质网上重要的分子伴侣,属热休克蛋白70家族的一员,GRP78分子及其DNA分子序列结构在许多生物物种中高度保守.GRP78在内质网中参与阻止内质网新生肽聚集、调节内质网钙稳态、抗内质网相关性细胞凋亡,以及启动未折叠蛋白反应等细胞生命过程.GRP78基因启动子上存在内质网应激反应元件(ERSE)和cAMP反应元件(CRE)等特殊的顺式作用元件,特异性转录因子ATF6等与GRP78启动子上顺式作用元件发生动态结合,从而调节GRP78基础性或诱导性转录表达.近年来发现,GRP78与脂肪肝、肿瘤和神经系统等疾病的发生发展密切相关,GRP78生物学功能的研究已经引起生物学家们的广泛重视.     

ABCB1基因多态性与难治性癫痫

近年来,难治性癫痫的病因与多药耐药基因以及多药耐药基因与抗癫痫治疗的因果关系越来越受到关注。P糖蛋白(P-glycopretein,P-gp)是由ATP结合盒B亚家族成员1转运蛋白基因(ATP-binding cassette subfamily B member 1 transporter gene,ABCB1)编码的产物。它不仅可以限制抗癫痫药物(antiepileptic drug,AED)的消化道吸收,而且可以在细胞和亚细胞水平调控药物在中枢神经系统的运输过程。除了生理和环境因素的影响,P-gp的功能和表达的变化可能主要取决于ABCB1基因的多态性,这是目前研究得最广泛、最深入的多药耐药机制。本文就目前ABCB1基因多态性与难治性癫痫的相关性研究进展作一综述。