大熊猫中分离出一株肠道杆菌及其初步鉴定

大熊猫出血性肠炎病原,至今未见报道。对此,1988年5月作者作了初步探索。材料与方法一、标本:采自成都市动物园一疑似患出血性肠炎大熊猫的肛拭子。二、培养基:S—S琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板。三、分离培养和鉴定:将肛拭子在床旁分别接种在S—S琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板培养基。24小时后挑选可疑菌落作革兰氏染色及荚膜染色、生化试验、动物试验和药敏试验。结果在S—S平板和伊红美蓝平板上生长的细菌几乎是纯种。经形态学、生理学等方面的鉴定,确定为肠道杆菌中克雷伯氏菌族中的产气杆菌。该菌对先锋铋(Cefoperazone),先锋霉素等敏…     

34株埃希氏大肠杆菌A—D群产碱株的鉴定报告

自1989至1991年,对服务人员共6538人进行了身体检查。粪便培养时,在S S琼脂平板上共发现34株透明小菌落,作革兰氏染色,均为革兰氏阴性杆菌,用沙门氏和痢疾因子血清检测,结果皆为阴     

人粪便中枸橼酸杆菌菌种分布特点

枸橼酸杆菌属 (Citrobacter )细菌又称柠檬酸杆菌 ,是人体及动物粪便中的正常菌群之一 ,也是水体污染的重要细菌学指标之一。近年来 ,由于分子细菌学的发展 ,枸橼酸杆菌属细菌由原来的 3个种进一步分类到目前 11个种。粪便作为枸橼酸杆菌的重要贮菌场所 ,对其中的菌种分布了解可增加我们对枸橼酸杆菌的认识。为此 ,我们对部分住院病人和食堂体检人员的粪便中枸橼酸杆菌进行生理生化分类鉴定 ,结果报告如下。1　材料与方法1.1　材料　粪便为随机选择的住院病人和食堂体检人员送检标本 ,共 2 6 1份。1.2　方法　将标本接种 S.S平板 ,35℃过…     

API系统鉴定化妆品及一次性卫生用品微生物种类的研究

利用API2 0E系统鉴定 18株肠杆菌科细菌 ,鉴定结果符合率 10 0 % ,并用API2 0E ,API 2 0NE ,APISTAPH和API2 0cAUX分别对分离自化妆品和一次性使用卫生用品的 183株革兰氏阴性发酵杆菌 ,革兰氏阴性非发酵杆菌 ,革兰氏阳性球菌和酵母菌成功进行了菌种鉴定 ,另有 3株革兰氏阴性氧化酶阴性杆菌未能鉴定到种     

Viili乳制品中干酪乳杆菌的分离鉴定

从引进Viili乳制品中筛选、鉴定出3种优良乳酸菌。采用平板分离法从Viili乳制品中分离3株乳酸菌,通过表型1、6S rRNA的PCR扩增、克隆、测序鉴定。3株乳酸菌的表型鉴定结果符合伯杰细菌鉴定手册中乳杆菌属的干酪乳杆菌,16S rRNA序列同源性分析结果表明3株分离菌与干酪乳杆菌的同源性分别为99.93%、100.00%9、9.78%,从Viili乳制品分离到3株干酪乳杆菌。     

烧伤感染病原菌调查及药敏分析

目的对5年来烧伤感染菌的种类和主要感染菌的耐药性作了研究分析。方法采用细菌,霉菌常规鉴定方法,药敏试验采用K-B法。结果共收到标本746份,检出感染菌512株,共计36种,分离率68．6％,其中创面分泌物标本528份,分离出感染菌490株（占92．8％）;血标本218份,分离出感染菌36株（占17％）;静脉导管11份,分离出感染菌8株（占72％）。其中G^-菌229株（44．9％）,G^＋球菌217株（42．4％）,霉菌66株（12．2％）。结论根据5年来病原菌培养结果分析,铜绿假单胞菌占9．38％;阴沟肠杆菌占6．10％,总状毛霉菌占6．0％。     

乳扇制品中乳酸杆菌的分离鉴定及16S rRNA序列同源性分析

目的乳扇是云南大理白族的一种传统乳制品,明确大理乳扇制品中乳杆菌的多样性及优势种群分布,为科学利用奠定基础。方法采用表型鉴定及16S r RNA鉴定方法,对10个家庭作坊的大理乳扇制品中的乳杆菌进行了分离鉴定。结果共分离到50株乳杆菌,通过表型鉴定为8个种,包括植物乳杆菌10株、德氏乳杆菌7株、发酵乳杆菌6株、干酪乳杆菌6株、棒状乳杆菌4株、鼠乳杆菌2株、弯曲乳杆菌3株和食果糖乳杆菌2株;06422和06430两株表型鉴定未能定种,进一步通过16S r RNA鉴定为植物乳杆菌和马酒乳杆菌,06422株与植物乳杆菌L.arizonensin、L.pentosus和L.plantarum P158的同源性分别是100%、100%和99.9%,与乳杆菌属其它种的同源性为83.4%(L.gallinarum)至93.5%(L.brevis),06430株与L.kefiranofaciens.subsp.Kefirgranum的16S r RNA同源性是99.9%,与乳杆菌属其它种的同源性为83.7%(L.plantarum P158)至96.3%(L.acidophilus)。结论大理乳扇制品中有9种乳杆菌,其优势种群为植物乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌和干酪乳杆菌等四种。     

粪便乳杆菌新种在中国的再发现

目的分离鉴定白鹭粪便中的乳杆菌。方法使用乳杆菌PCR快速检出技术检出白鹭粪便样品中的乳杆菌。将乳杆菌的保守基因16S r DNA、rpo A和rec A克隆测序,并进行序列分析。使用细菌微量生化管和常规生化试验测定乳杆菌糖发酵产酸等生化特征。结果从白鹭粪便样品得到1株乳杆菌菌株FZB1,其16S r DNA基因和粪便乳杆菌AFL13-2的16S r DNA基因最相似,相似性为99.2%。Rpo A的氨基酸残基序列比对结果表明:该菌株和姬鼠乳杆菌、动物乳杆菌、鼠乳杆菌的亲缘关系最近,其相似性分别达到了97.1%、97.1%和96.7%。该菌株的Rec A氨基酸残基序列和粪便乳杆菌完全相同,和姬鼠乳杆菌、动物乳杆菌、鼠乳杆菌的Rec A氨基酸残基序列有较高的相似性,分别为91.9%、91.5%和91.5%。生化鉴定结果表明:该菌株符合乳杆菌属和粪便乳杆菌的生化特征。结论我们从中国的白鹭粪便中分离鉴定到了一株粪便乳杆菌,这是2013年在南非发现的新种。粪便乳杆菌在中国的再次发现充实了乳杆菌种质资源库,证明了粪便乳杆菌的广泛分布。     

肠集聚性大肠埃希菌在健康老年人肠道中的分布及其耐药机制研究

目的分析健康老年人肠道中肠集聚性大肠埃希菌(EAEC)的检出率,并探讨其毒力基因及超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的携带情况。方法取健康老年人的粪便标本分别接种于血平板、SS平板、麦康凯平板进行细菌培养,用全自动微生物鉴定仪和质谱仪鉴定细菌到种;对分离的大肠埃希菌采用双纸片协同法检测其ESBL的表型,用PCR法扩增其EAEC毒力基因astA和aggR;ESBL表型阳性的EAEC菌株用PCR法检测其ESBL基因型。结果在175例研究对象中,共检出160株大肠埃希菌,ESBL携带率为36.30%(58/160);EAEC检出16株(10.00%),其中astA阳性14株(8.75%),aggR阳性2株(1.25%);EAEC菌株的ESBL携带率为56.25%(9/16),其基因型均为CTX-M型,其中以CTX-M-14最多,占66.70%(6/9)。结论本研究获得了健康老年人肠道中EAEC的检出率及其毒力基因和ESBL的携带情况,提示我们EAEC不仅是腹泻患者的病原菌,还可以在健康老年人群中携带,且具有较高的携带率和耐药性,提醒我们加强防范。     

人下肠道中拟杆菌属的探讨

用平板活菌计数法分析了30名正常成人粪便标本的4类菌群,结果表明,每克(湿重)标本中的需氧菌数(以Log计,均数土2标准差,下同)为8.47士1．32,肠杆菌数为7．75±1．34,肠球菌数为7．29士1．38,拟杆菌数为10．71士1．08。同时还分析了21名腹泻患者的粪便标本,得到需氧菌数为9．01士1．06,肠杆菌数为s 39士0．94,肠球菌数为6．36 5：1．72,拟杆菌数为10．15：t：0．68。其中5名菌痢患者的粪便标本中福氏痢疾杆菌数为7．66"t-0．60,拟杆菌和肠球菌数明显减少。与正常人的相比,21名腹泻患者粪便标本中需氧菌、肠杆菌数增加(p<0．05),而肠球菌、拟杆菌数减少(p<0．01),差异显著。对分离的25l株革兰氏阴性无芽孢厌氧杆菌的代谢产物,进行了气液相色谱分析,确定4株为梭杆菌属菌株,247株为拟杆菌属菌株(15个种),正常与腹泻时拟杆菌属中种的差异不显著。     

大熊猫的人工繁殖

大熊猫是正濒于绝灭边缘的珍稀动物。近几年来许多国家的科学工作者在人工繁殖大熊猫方面作了不少工作。我国自1963年起先后在北京、成都、上海、杭州、昆明等动物园繁殖大熊猫成功。1979年和1980年北京及成都动物园分别用人工授精和冷冻精液人工授精繁殖大熊猫获得成功。1983年福州动物园以成都动物园熊猫精液的冷冻颗粒,带回福州进行两次人工授精,两月后妊娠检查呈阳性反应,解决了人工繁殖大熊猫的精液来源问题。根据成都动物园的大熊猫——“美美”和“果果”在先后繁殖5胎中所得到的经验介绍于下:般雌兽5.5岁开始发情。“果果”的发情与…     

不同年龄大熊猫肠道可培养芽孢杆菌的多样性及部分功能特性分析

【背景】大熊猫的肠道内微生物类群丰富,种群结构与宿主的年龄、生存环境、季节变化等因素有关,其中年龄是影响肠道菌群组成的重要因素之一。【目的】以不同年龄阶段的大熊猫粪便为研究对象,旨在了解不同年龄大熊猫肠道内芽孢杆菌的多样性,探究大熊猫肠道芽孢杆菌种类与年龄段之间的关系,并为优良益生菌剂的开发提供菌种资源。【方法】用稀释涂布法分离大熊猫粪便中的芽孢杆菌,对分离的菌株进行BOXA1R-PCR、16S rRNA基因系统发育及主成分分析,揭示大熊猫肠道中可培养芽孢杆菌的多样性;采用对峙生长法和药敏纸片琼脂扩散法分别检测菌株的抗菌能力和药敏性。【结果】从大熊猫粪便中共分离出90株芽孢杆菌,基于BOXA1R-PCR分析菌株的遗传多样性并从中选取41株代表菌株,经16Sr RNA基因测序分析后,结果显示归属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)、贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)和短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)6个种;主成分分析结果表明大熊猫肠道芽孢杆菌种群组成与年龄存在一定的相关性。所有的供试菌株都具有纤维素降解潜力,大部分菌株对病原菌具有不同程度的抑制作用;除对青霉素具有耐药性外,供试菌株对常见的抗生素耐受性低。【结论】年龄是影响大熊猫肠道芽孢杆菌分布的重要因素,成年大熊猫肠道芽孢杆菌种类多样性最丰富,这为大熊猫益生菌制剂的开发提供了菌种资源。     

X-Gal改良MRS培养基结合API50CH鉴定新生儿肠道中双歧杆菌

目的:探讨一种快速鉴别新生儿肠道中双歧杆菌的方法。方法:采集10名健康新生儿粪便样品稀释涂布于添加了氯化锂(LiCl)和5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal)的MRS培养基上,厌氧培养后挑单菌落经革兰氏染色、API50CH碳水化合物鉴定试剂条反应和有机酸代谢产物测定鉴定出双歧杆菌种类。结果:改良MRS培养基上的蓝色菌落经鉴定为双歧杆菌,白色菌落鉴定为乳酸菌,10份样品中有9份检出双歧杆菌。结论:该方法准确可靠,可用于快速鉴定新生儿粪便中的双歧杆菌。     

圈养大熊猫肠道乳酸菌分离及益生特性

【背景】大熊猫数量稀少、繁殖困难,在其生长过程中极易感染消化系统疾病甚至死亡。【目的】分析圈养大熊猫肠道可培养乳酸菌的群落结构与功能,筛选具有益生特性的乳酸菌菌株,为大熊猫消化系统疾病的预防和肠道微生物研究提供理论参考及菌种资源。【方法】采用3种培养基分离大熊猫粪便中的乳酸菌,通过革兰氏染色镜检和过氧化氢试验对分离的菌株进行初步鉴定,基于BOXA1R-PCR图谱遗传多样性选取代表菌株进行16S rRNA基因测序分析并进行主成分分析(principal component analysis, PCA),同时分析乳酸菌菌株安全性和益生特性。【结果】通过初步鉴定共分离获得58株乳酸菌,根据BOXA1R-PCR结果挑选20株菌进行测序,结果显示20株菌分属于明串珠菌属(Leuconostoc)、肠球菌属(Enterococcus)、魏斯氏菌属(Weissella)和链球菌属(Streptococcus)这4个属,主成分分析结果表明不同年龄段的大熊猫肠道乳酸菌群落结构存在差异。20株乳酸菌均不溶血,17株乳酸菌对11种抗生素均敏感;11株菌耐pH值2.0酸性条件,14株菌对0.3%的胆盐具有良好...     

社区老年人上呼吸道定植菌调查及药敏分析

调查社区老年人上呼吸道的定植菌情况,能够了解引起社区老年人呼吸道感染的危险因素,分析主要定植菌的药敏结果,指导社区老年人呼吸道感染的经验治疗。取社区老年人咽喉部拭子进行细菌分离培养及鉴定,调查呼吸道定植菌情况,并对主要定植菌进行药敏试验,细菌鉴定应用法国生物梅里埃公司的细菌鉴定仪VITEK2和API系统,药敏试验采用K-B纸片琼脂扩散法,结果统计应用WHONET5.4软件。对706例社区老年人上呼吸道标本进行分离培养,有274份标本生长了致病菌或条件致病菌,其中248份标本有一种细菌生长,26份标本生长2种细菌,总体阳性率为38.8%。共分离9种细菌,居首位的细菌是肺炎克雷伯菌151株,占21.4%,其次为副流感嗜血杆菌74株,占10.5%,第3位的是β-溶血链球菌31株,占4.4%。75株肺炎克雷伯菌的药敏结果显示全部为敏感株,从药敏表型分析具有较高的同源性。老年人群上呼吸道定植菌以革兰阴性杆菌尤其以肺炎克雷伯杆菌为主,并对常用抗菌药物有高度敏感性,一旦发生定植菌感染应选择合适的抗菌药物并给予恰当的治疗方案,防止细菌产生耐药性。     

流感嗜血杆菌在两种培养基分离结果的比较

流感嗜血杆菌是引起小儿呼吸道细菌感染的主要致病菌。本文用配的羊、兔血巧克力培养基从6 4份小儿肺炎标本 (痰和咽拭子中分离到流感嗜血杆菌分别 2 9株、32株、阳性率 4 5 .3%、5 0 % ;差异无显著性 (P>0 .5 )在 32株流感嗜血杆菌中用 RHA法进行分型 ,b型占 18.75 % ,d型占 6 .2 5 % ,e型占3.13% ,不定型占 71.88%。     

大熊猫生殖道菌群研究

本文对大熊猫的生殖道微生物菌群进行菌体形态、革兰氏染色、芽孢染色、平板计数等方法以及生理生化测试鉴定。结果显示,大熊猫阴道主要细菌为乳杆菌(Lactobacillus)、大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、克雷伯氏菌(Klebsiella),其中优势菌为乳杆菌。     

2009至2012年血培养阳性结果分析及耐药性监测

了解解放军202医院2009至2012年血培养阳性病原菌分布及耐药性监测,为临床合理选用抗菌药物提供依据。使用全自动血培养仪进行血液培养,用VITEK-2全自动微生物鉴定系统进行菌株鉴定和药敏试验。从453例血培养阳性标本中共分离出462株病原菌,其中革兰阴性杆菌274株,占59.30%;革兰阳性球菌167株,占36.14%;革兰阳性杆菌1株,占0.22%;真菌20株,占4.32%。最常见的感染菌分别为金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌。89株金黄色葡萄球菌中检出MRSA 9株,46株凝固酶阴性葡萄球菌中检出MRCoN 6株,对青霉素耐药率分别达81.35%和85.00%,革兰阳性球菌中未发现对利奈唑胺和万古霉素耐药的菌株。鲍曼不动杆菌对美罗培南耐药率高达51.7%。解放军202医院血液感染以葡萄球菌和大肠埃希菌为主,且耐药率高,应对血液细菌进行长期的耐药性监测,为临床合理使用抗生素提供理论依据。     

蒙古族儿童源益生特性双歧杆菌的筛选及鉴定

【目的】双歧杆菌在人和动物胃肠道中发挥着重要的生理作用,然而双歧杆菌能否耐受胃酸、肠液及胆汁酸是影响活菌制剂益生效果的关键因素,本研究旨在从蒙古族儿童粪便中分离筛选出具有良好益生特性的双岐杆菌。【方法】本文采用双岐杆菌选择性培养基对样品进行分离纯化,并对菌株进行生理生化鉴定,以耐受人工胃肠液、耐受牛胆盐为手段对各菌株的益生特性进行评价,并且对B. animalisV9进行了16S rDNA分子生物学鉴定。【结果】本文从12位健康蒙古族儿童粪便中分离得到11株双歧杆菌,经传统生理生化试验鉴定为5株B. adolescentis：A1、H3、G4、A8、V10;3株B. longum：C6、C7、D11;1株B. pseudocatenlatum：B2;1株B. bifidum：G5;1株B. animalis：V9。B. animalis V9具有较强的耐酸性,在pH2.0的人工胃液中厌氧培养3h后存活率为92.4%,而其它10株双歧杆菌在此条件下的存活率均小于31.25%;B. animalis V9在pH2.0的人工胃液中厌氧培养3h后接入pH8.0的人工肠液中消化8h,存活率为99.7%,并且可以耐受0.3%的牛胆盐。进一步对V9菌株进行16S rDNA分子生物学鉴定,发现与Bifidobacterium animalis subsp. lactic BB12的同源性为99%。【结论】本研究结果显示B. animalis V9来源安全,并且具有良好耐酸、耐胆盐益生特性,有望在乳制品及保健类产品中得到广泛的应用。     

骨科患者伤口分泌物病原菌分布及耐药性分析

目的:了解我院骨科患者伤口分泌物病原菌分布及其耐药性情况,为临床上对骨科患者合理使用抗生素提供相关理论根据。方法:将2013年2月至2014年8月我院282例术后骨科患者的伤口分泌物标本接种培养,按要求分离纯菌,采用VITEK 2Compact全自动微生物分析仪进行鉴定及药敏试验。结果:282份标本中分离出致病菌186株(65.96%),其中革兰氏阴性球菌94株(50.54%),革兰氏阳性球菌83株(44.62%),真菌9株占4.83%。分离率排在前三位的致病菌分别为阴沟肠杆菌(19.35%),金黄色葡萄球菌(17.20%),表皮葡萄球菌(15.59%)。阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对头孢唑林和氨苄西林的耐药率最高,其中阴沟肠杆菌对头孢唑林耐药率高达100%。但未发现主要革兰氏阴性球菌对亚胺培南耐药。革兰氏阳性球菌对青霉素的耐药率较高,但未发现革兰氏阳性球菌对万古霉素耐药。结论:术后骨科患者伤口优势菌种是阴沟肠杆菌,而且耐药性高;临床医生应根据病菌鉴定和药敏分析结果,对不同种类的病原菌使用不同的抗生素进行针对性治疗。