蒙古族儿童源益生特性双歧杆菌的筛选及鉴定

【目的】双歧杆菌在人和动物胃肠道中发挥着重要的生理作用,然而双歧杆菌能否耐受胃酸、肠液及胆汁酸是影响活菌制剂益生效果的关键因素,本研究旨在从蒙古族儿童粪便中分离筛选出具有良好益生特性的双岐杆菌。【方法】本文采用双岐杆菌选择性培养基对样品进行分离纯化,并对菌株进行生理生化鉴定,以耐受人工胃肠液、耐受牛胆盐为手段对各菌株的益生特性进行评价,并且对B. animalisV9进行了16S rDNA分子生物学鉴定。【结果】本文从12位健康蒙古族儿童粪便中分离得到11株双歧杆菌,经传统生理生化试验鉴定为5株B. adolescentis：A1、H3、G4、A8、V10;3株B. longum：C6、C7、D11;1株B. pseudocatenlatum：B2;1株B. bifidum：G5;1株B. animalis：V9。B. animalis V9具有较强的耐酸性,在pH2.0的人工胃液中厌氧培养3h后存活率为92.4%,而其它10株双歧杆菌在此条件下的存活率均小于31.25%;B. animalis V9在pH2.0的人工胃液中厌氧培养3h后接入pH8.0的人工肠液中消化8h,存活率为99.7%,并且可以耐受0.3%的牛胆盐。进一步对V9菌株进行16S rDNA分子生物学鉴定,发现与Bifidobacterium animalis subsp. lactic BB12的同源性为99%。【结论】本研究结果显示B. animalis V9来源安全,并且具有良好耐酸、耐胆盐益生特性,有望在乳制品及保健类产品中得到广泛的应用。     

B．animalis V9对腹泻动物的保护性作用及其机制研究

目的研究益生菌B.animalis V9对腹泻动物的保护作用及其对腹泻致病菌的拮抗效果。方法采用自制的腹泻SPF鼠,喂服B．animalis V9,观察并检测腹泻致病菌,并在体外试验益生菌B．animalisV9对腹泻致病菌的拮抗作用。结果SPF鼠致泻动物模型喂食B．animalisV9,剂量为1．0×10^8CFU/（只·d）,3d后腹泻治愈率为90％,死亡率为9％,对照组自然恢复率为16％,死亡率为41％,其余仍有不同程度的腹泻现象。B．animalis V9在体外对志贺痢疾杆菌、沙门菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌有不同程度的拮抗作用,共同培养60h后均未检测到上述4种致病菌。结论B．animalisV9可以有效的对腹泻小鼠进行治疗,其机制在于B．animalisV9对致泻菌株具有一定程度的拮抗作用。     

德昌县居民对血吸虫病的预防情况调查研究

目的:了解德昌县居民对血吸虫病的预防意识及行为,为当地血吸虫病预防知识的宣传方向及宣传力度提供参考。方法:对德昌县居民进行随机抽样调查,调查通过问卷展开,共计完成问卷1470份,有效问卷1324份,有效率为90.07%。结果:(1)不认识钉螺的总人数占29.23%,了解正确预防措施的人数有83.01%(2)关于家禽(牛、羊、猪)的饲养情况放养4.83%,圈养放养均有占11.86%(3)对于粪便的处理,灌溉农田有33.46%,排入水中有8.38%(4)居民用水情况,自己打井水有26.74%,直接使用湖泊、河水有7.55%(5)不愿主动获取血吸虫相关知识占10.88%,不意主动接受血吸虫病检查占14.05%。     

益生菌B. animalis V9冻干粉安全性毒理学研究

目的对益生菌B.animalis V9冻干菌粉进行安全性毒理学评价,确保该菌株在发酵乳制品及保健类食品中的应用安全。方法连续14d对小鼠灌胃不同剂量的(0.5、5和15g/kg体重)B.animalis V9菌粉,然后执行以下指标的测量,包括每天测体重,观察不同时间点(3、7和14d)小鼠生长状况,血液细胞成分、肝脏功能、脏器指数变化及脂类代谢情况等。在显微镜下进行肝、肾形态学观察。结果 B.animalis V9对小鼠的半数致死量(LD50)为15g/kg体重,灌胃14d小鼠未出现中毒症状,更无死亡现象,且对小鼠的生长发育无不良影响。小鼠体重变化与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);血常规,肝功能、脏器指数、血清脂类等各项指标测定结果与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);通过对小鼠肝脏、肾脏的染色镜检可知,肝脏、肾脏均无异常改变。结论急性毒性试验及相关指标检测结果显示B.animalis V9菌粉无毒副作用。     

缺氧对食管癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨缺氧对人食管癌细胞Eca109增殖及凋亡的影响及其作用机制,为食管癌的诊断和治疗提供新的思路和路径。方法:以终浓度为250μmol/L氯化钴模拟缺氧环境,将人食管癌细胞Eca109于常氧及缺氧条件下分别培养12 h、24 h、36 h、48 h,采用倒置相差显微镜观察细胞生长情况,MTT法检测细胞增殖情况,利用细胞活力分析仪NC-3000检测各组细胞凋亡情况。结果:相对于常氧对照组而言,缺氧后各组Eca109细胞增殖减弱,凋亡细胞比率明显升高,其中以缺氧24 h的凋亡细胞比率最高,缺氧36 h的凋亡细胞比率较缺氧24 h时有所回落。结论:缺氧可以抑制人食管癌细胞Eca109的增殖并诱导其凋亡。     

假刺苋——中国大陆一新归化种

报道了广东省潮州市韩江沿岸发现的中国大陆一新归化种——假刺苋(Amaranthus dubius Mart.ex Thell.)。该种原产热带美洲及西印度群岛,已经引入并局部归化于欧洲、热带亚洲地区和非洲,在中国台湾已经归化。通过野外调查,获得该种的详细特征与生境等信息,并讨论了与其他苋属植物的区别及其潜在的入侵性。此外,还提供了用于检索中国苋属植物的分类检索表。     

检测HSA—GLP-1融合蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立

目的：为检测血清中HSA-GLP-1融合蛋白整体分子的浓度,建立一种特异、灵敏的定量检测食蟹猴体内HSA-GLP-1融合蛋白浓度的双抗体夹心ELISA的方法。方法：采用双抗体夹心ELISA方法,以GLP-1单克隆抗体为包被抗体、HSA-GLP-1融合蛋白为夹心抗原、anti-HSA-Biotin为检测抗体,用Streptavidin-HRP进行免疫放大,TMB显色。结果：建立了检测HSA-GLP-1融合蛋白的ELISA方法,其线性范围为15.6~1000 ng/mL,最低检测限为15.6 ng/mL,与GLP-1、HSA、IL2-HSA均无交叉反应,板内和板间精密度均小于15%,准确度为±15%,冻融稳定性和稀释稳定性良好。结论：建立的HSA-GLP-1蛋白检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于HSA-GLP-1融合蛋白在临床前药代动力学试验的定量检测。