信号转导与转录因子3和表皮生长因子受体在宫颈不同病变组织中的表达及其临床意义

目的:探讨信号转导与转录因子3(STAT3)与表皮生长因子受体(EGFR)在宫颈不同病变组织中的表达变化及其临床意义。方法:采用Western blot与免疫组化的方法检测100例上皮内瘤样病变(CIN)组织、60例宫颈癌组织及40例正常宫颈组织中STAT3与EGFR的表达;分析STAT3与EGFR的表达与宫颈癌组织病理特征的关系;对宫颈癌组织中STAT3与EGFR的表达的相关性进行分析。结果:宫颈癌组织以及CIN组织中STAT3、EGFR的表达量和阳性率显著高于正常宫颈组织(P0.05),且宫颈癌组织中STAT3、EGFR的表达量和阳性率高于CIN组织,差异有统计学意义(P0.05);STAT3与EGFR在宫颈癌组织中的染色强度较正常宫颈组织以及CIN组织显著增强;STAT3与EGFR的异常表达与宫颈癌患者的组织学分级、临床分期以及是否发生淋巴结转移有关(P0.05),而与年龄以及病理分型无关(P0.05);宫颈癌组织中STAT3和EGFR表达呈正相关(P0.05)。结论:STAT3与EGFR表达与CIN、宫颈癌的进展紧密相关,且与宫颈癌部分病理特征相关,二者有可能作为宫颈癌诊断及预后的参考指标。     

GRP94 和CD8 在宫颈病变组织中的表达及意义

目的:探讨葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)和CD8在宫颈病变组织中的表达及与HPV感染的关系。方法:采用免疫组化S-P法检测32例原发宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及40例慢性宫颈炎组织中GRP94和CD8的表达及定位;采用western blot技术检测6例宫颈癌及6例正常宫颈组织中GRP94和CD8的表达。结果:①在宫颈癌、CIN2/3、CIN1及慢性宫颈炎组织中,GRP94的阳性表达率分别为87.5%、82.4%、40%和22.5%;CD8的阳性表达率分别为28.1%、64.7%、90%和97.5%;GRP94在宫颈癌和CIN2/3中的表达均显著高于慢性宫颈炎和CIN 1组织(P均<0.05);CD8在宫颈癌组的表达显著低于慢性宫颈炎组、CIN1组及CIN2/3组(P均<0.05)。②Western blot结果示GRP94在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织(P<0.01);CD8在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织(P<0.01)。③GRP94的表达与宫颈癌分化程度、有无脉管侵袭有关(P<0.05),而与年龄、病理类型、临床分期及有无淋巴结转移无关(P>0.05);CD8的表达与有无脉管侵袭有关(P<0.05),而与年龄、病理类型、临床分期、分化程度及有无淋巴结转移无关(P>0.05)。④宫颈病变组织中,GRP94的表达与HPV感染呈正相关(rs=0.377,P=0.000);CD8的表达与HPV感染呈负相关(rs=-0.395,P=0.000);GRP94与CD8的表达呈负相关(rs=-0.608,P=0.000)。结论:GRP94表达可能是宫颈CIN进展及宫颈癌预后判断的重要预测指标。     

P16、P27和Ki67在宫颈病变中的表达及意义

目的探讨宫颈病变组织中P16、P27和Ki67蛋白的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测30例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、18例宫颈鳞癌组织和12例宫颈正常鳞状上皮组织中P16、P27和Ki67蛋白的表达,分析宫颈病变形成过程中P16、P27和Ki67蛋白表达的变化以及临床病理特征的关系。结果P16和Ki67在正常宫颈、CIN和宫颈鳞癌组织中的表达率分别为0(0/12)、70%(21/30)、100%(18/18)和30%(4/12)、90%(27/30)、100%(18/18),二者在CIN和宫颈鳞癌中阳性表达率明显高于正常宫颈组织的表达,差异有显著性(P0.05);P27蛋白在正常宫颈、CIN和宫颈鳞癌组织中的表达率分别为82.22%(10/12)、53.33%(16/30)和27.78%(5/18),其在CIN和宫颈鳞癌中阳性表达率明显低于正常宫颈组织的表达,差异有显著性(P0.05)。在CIN和宫颈鳞癌组织中,P16和Ki67表达呈正相关(P0.05);P27和P16、Ki67表达呈负相关(P0.05)。结论P16、P27和Ki67参与了CIN、宫颈癌的发生。P16、Ki67和P27联合检测可作为早期诊断宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的标记物,可提高宫颈癌的早期诊断率。     

宫颈癌组织中MCM5和P16~(INK4A) mRNA的表达及其临床意义

目的:检测宫颈癌组织中微小染色体维持蛋白-5(minichromosome maintenance protein 5,MCM5)与P16INK4AmRNA的表达,并探讨其在宫颈癌中的临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测40例宫颈鳞状细胞癌、15例低度宫颈上皮内瘤变(CINⅠ)、20例高度宫颈上皮内瘤变(CINⅡ-Ⅲ)中MCM5和P16INK4AmRNA的相对表达量,并以20例正常宫颈组织作为对照,分析其与宫颈癌临床病理特征的关系。结果:(1)随着宫颈病变程度的加重,MCM5和P16INK4AmRNA的表达量逐渐增高。宫颈癌组织中MCM5和P16INK4AmRNA的表达量分别是正常宫颈组织的(3.026±1.210)倍和(2.540±0.718)倍,差异具有统计学意义(P0.05)。宫颈癌组织中MCM5 mRNA的表达量明显高于CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ(P0.05),CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ中MCM5 mRNA的表达量均显著高于正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P0.05),而CINⅠ与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义(P0.05);宫颈癌组织中P16INK4AmRNA的表达量为正常宫颈组织的(2.54±0.86)倍,差异有统计学意义(P0.05),亦显著高于CINⅠ,差异具有统计学意义(P0.05),但与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)在宫颈癌组织中,MCM5 mRNA的表达量与肿瘤的临床期别、分化程度显著相关(P0.01),但与患者的年龄无关(P0.05);P16INK4AmRNA的表达量与肿瘤的临床期别、年龄均无关(P0.05),但与肿瘤的分化程度相关(P0.01)。结论:MCM5、P16INK4A的高表达可能在宫颈癌的发展中起重要作用。MCM5基因检测有助于区分癌前病变和宫颈癌,有望成为宫颈癌肿瘤增生的新标志物。P16INK4A的检测在宫颈病变筛查中具有重要意义,有助于CIN的分级并预测转归,从而提高宫颈癌筛查率。     

p16和bcl-2在宫颈上皮瘤样病变及宫颈癌中的表达

目的探讨p16和bcl-2表达产物在宫颈上皮瘤样病变及宫颈癌中表达的意义。方法对正常宫颈鳞状上皮、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织共69例,采用免疫组织化学EliVision法,对宫颈癌变过程中p16和bcl-2蛋白进行研究,将结果进行统计分析。结果p16蛋白在CIN中的表达高于正常宫颈上皮(P<0.01),在宫颈癌中的表达也高于正常宫颈上皮(P<0.01),且高于CIN中的表达(P<0.05);bcl-2蛋白在CIN中的表达高于正常宫颈上皮(P<0.01),在宫颈癌中的表达也高于正常宫颈上皮(P<0.01),但与CIN中表达无差异。p16和bcl-2两种蛋白在CIN和宫颈癌中的表达无明显差异。结论p16和bcl-2蛋白的表达与宫颈癌的发生有关,提示这两种蛋白有可能作为高危人群早期筛查的一种免疫组化指标。     

宫颈癌中CD1α分子和趋化因子CCL20/MIP-3α的表达

目的:研究CD1α分子,趋化因子人巨噬细胞炎性蛋白-3α(CCL20/MIP-3α)在宫颈癌组织中的表达及其相关性,探讨其在宫颈癌免疫逃逸机制中的作用。方法:应用免疫组化PV-6000通用二步法检测CD1α和趋化因子CCL20/MIP-3α在正常宫颈组织及宫颈癌组织中的表达,并分析两者之间的相关性。结果:CD1α和CCL20/MIP-3α在宫颈癌中的表达均明显降低(P均0.01);CD1α与CCL20/MIP-3α在宫颈癌中的表达显著相关(P0.01)。结论:在宫颈癌组织中,趋化因子的减少导致抗原提呈细胞数量下降,不足以引起肿瘤局部免疫反应而导致了宫颈局部病变的侵袭及发展。     

P21蛋白在不同级别宫颈组织中的表达及其与高危HPV感染相关性的研究

目的通过检测宫颈组织中p21waf基因表达与高危HPV感染的情况,研究P21蛋白与高危HPV感染在宫颈组织恶性转化过程中的作用及其相互关系。方法应用免疫组化检测P21蛋白及基因杂交捕获Ⅱ代技术(HC-Ⅱ)检测高危HPV在正常宫颈组、宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及宫颈癌组这4组中的表达情况。结果在正常宫颈组、宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、及宫颈癌组中P21的阳性表达率分别为11.8%、15.4%、39.1%和57.7%;高危HPV的阳性表达率分别为20%、23.5%、65.2%和88.5%,这两项指标在CIN、宫颈癌组有明显的升高趋势且与正常宫颈和宫颈炎两组相比差异具有显著性统计学意义(P<0.05);各级别宫颈组织中高危HPV阳性组的P21蛋白阳性率明显高于阴性组的P21蛋白阳性率。差异在统计学上具有显著性意义(P<0.05)。结论P21蛋白的表达和高危HPV感染与宫颈病变的恶化均有高度的相关性,其检出率和阳性表达率随着宫颈病变恶性程度的增加而升高。在CIN向宫颈癌恶性转化过程中,P21与高危HPV共同促进肿瘤的发生。     

MiR-23a靶向HOXC8在黑龙江省宫颈癌人群中发生的作用分析

目的:研究Mi R-23a靶向HOXC8在黑龙江省宫颈癌人群中发生的作用及机制。方法:采集从2017年1月～2019年1月,于我院确诊为正常宫颈、宫颈上皮内瘤变(CIN)、宫颈癌患者的病变组织各90例。采用逆转录多聚酶联反应(RT-PCR)法分别检测正常宫颈组织、CIN组织、宫颈癌组织中的Mi R-23a表达水平。此外,通过■转染试剂将Mi R-23a模拟物、Mi R-23a抑制物以及空白对照片段转染至宫颈癌细胞Siha中,检测转染后0 h、48 h、72 h时三组Siha细胞的增殖能力情况。另外,以RT-PCR法检测正常宫颈组织、CIN组织、宫颈癌组织中的HOXC8表达水平。结果:宫颈癌组织中Mi R-23a的相对表达量显著高于CIN组织与正常组织,且CIN组织中Mi R-23a的相对表达量显著高于正常组织(均P0.05)。Mi R-23a模拟物组Siha细胞的增殖能力显著优于Mi R-23a抑制物组与空白对照组,且空白对照组Siha细胞的增殖能力明显优于Mi R-23a抑制物组(均P0.05)。宫颈癌组织中HOXC8的相对表达量显著高于CIN组织与正常组织,且CIN组织中HOXC8的相对表达量显著高于正常组织(均P0.05)。结论:Mi R-23a可能是通过靶向下调HOXC8基因的表达,进一步促进了宫颈癌的发生、发展,这为临床宫颈癌的防治提供了新的靶点,值得临床重点关注。     

宫颈脱落细胞中HCCR的表达及意义

目的研究人宫颈癌基因(HCCR)在宫颈脱落细胞中的表达情况,探讨其对宫颈癌及癌前病变诊断的意义。方法采用Western blot及免疫组化SP法对79例宫颈脱落细胞中HCCR蛋白进行检测,其中正常宫颈上皮脱落细胞11例、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)53例、宫颈癌(CCa)15例。所有标本均来自中国医科大学附属第一医院。结果HCCR基因在正常宫颈脱落细胞中不表达或阳性率较低,在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中表达阳性率随病变加重而逐级升高。结论HCCR与宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的发生密切相关,检测宫颈脱落细胞中HCCR蛋白的水平对宫颈癌的筛查和诊断可能具有重要意义。     

HGF和EZH2在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)、果蝇zeste基因增强子2(EZH2)在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:选取2016年10月到2018年1月期间在新疆医科大学附属肿瘤医院接受治疗的宫颈癌患者50例,收集其手术切除的病理组织作为宫颈癌组的检测标本,另选取同期在我院收治的子宫肌瘤患者,收集其行全子宫切除术时切除的宫颈组织,其中上皮内瘤样病变(CIN)组织和正常宫颈组织各50例,CIN组织作为CIN组的检测标本,正常宫颈组织作为对照组的检测标本。比较宫颈癌组、CIN组和对照组标本中HGF和EZH2的阳性表达情况。分析HGF和EZH2的表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系,分析宫颈癌组织中HGF、EZH2表达的相关性。结果:各组标本中的HGF和EZH2的阳性表达率整体比较差异均有统计学意义(P0.05),宫颈癌组、CIN组的HGF和EZH2的阳性表达率均明显高于对照组,且宫颈癌组EZH2的阳性表达率高于CIN组(P0.05)。宫颈癌组织中HGF和EZH2的表达与年龄、肿瘤类型、肿瘤大小无关(P0.05),临床分期II期、有淋巴结转移、病理分级G3的宫颈癌组织中HGF和EZH2的阳性表达率高于临床分期I期、无淋巴结转移、病理分级G1+G2的宫颈癌组织(P0.05)。经Spearman相关分析显示,宫颈癌组织中HGF与EZH2表达呈正相关(P0.05)。结论:HGF和EZH2在宫颈癌组织中呈高表达,且其表达水平与临床分期、淋巴结转移、病理分级有关。     

宫颈鳞状细胞癌中ADAM17 的表达及其临床意义

目的:探讨去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其临床病理意义。方法:运用免疫组织化学法分别检测正常宫颈上皮、宫颈鳞状细胞癌及宫颈上皮内瘤样变组织中ADAM17的表达,并分析其与宫颈癌临床分期及淋巴结转移的相关性。结果:ADAM17在正常宫颈上皮组织切片中无明显表达,在宫颈上皮内瘤样变组织中少部分表达,呈浅黄色,在宫颈鳞状细胞癌中癌细胞大量表达,ADAM17表达呈棕褐色,数量较多且浓染。不同临床分期的宫颈鳞状细胞癌组织中ADAM17的阳性表达率比较存在显著统计学差异(P0.05),且随临床分期的上升,ADAM17的表达逐渐升高;有淋巴结转移的宫颈鳞状细胞癌组织中ADAM17的阳性表达率显著高于无淋巴结转移的宫颈鳞状细胞癌组织,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:ADAM17蛋白在宫颈鳞状细胞癌组织中呈异常高表达,且与宫颈鳞状细胞癌的临床分期和淋巴结转移密切相关,通过检测ADAM17蛋白的表达可能有助于宫颈鳞状细胞癌的诊断、治疗和预后预测。     

Expression of vascular endothelial growth factor in the progression of cervical neoplasia and its relation to angiogenesis and p53 status

OBJECTIVE: To evaluate vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in the successive steps of cervical neoplasia and to determine its correlation with angiogenesis and p53 status. STUDY DESIGN: Immunohistochemical staining with a VEGF monoclonal antibody was performed on a total of 161 cervical specimens representing 12 normal epithelium, 33 cervical intraepithelial neoplasia (CIN) 1, 30 CIN 3 and 86 squamous cell carcinomas. Microvessels were immunohistochemically labeled with an antibody to CD34. Computerized image analysis was used to evaluate microvessel density (MVD). p53 Status was determined by immunohistochemistry and direct sequencing of exons 5-8 of the p53 gene. RESULTS: VEGF expression progressively increased along the continuum from normal epithelium to squamous cell carcinoma (P < .05). MVD increased significantly with cervical neoplasia progression, from normal epithelium, through CIN, to squamous cell carcinoma (P < .001). A strong correlation was observed between VEGF expression and MVD (P < .001). p53 Protein expression was not detected in the normal epithelium or in CIN 1, while 3 (10%) of 30 CIN 3 and 28 (33%) of 86 squamous cell carcinomas were positive for p53. VEGF expression correlated statistically with p53 protein expression (P < .001). In double VEGF- and p53-stained sections, the 2 markers were generally expressed in the same tumor cells. Of the 4 p53 gene mutations, 3 exhibited strong VEGF expression, and 1 exhibited moderate VEGF expression. VEGF expression did not correlate significantly with outcome variables in patients with squamous cell carcinoma. CONCLUSION: Our results suggest that VEGF expression is involved in the promotion of angiogenesis in cervical neoplasia and that p53 is likely to be involved in the regulation of VEGF expression.     

NFAT1和TWEAK在宫颈鳞癌及上皮内瘤变中表达的意义

目的：通过观察NFAT1和TWEAK在正常宫颈鳞状上皮、宫颈鳞状上皮上皮内瘤变、宫颈鳞癌中表达,探讨NFAT1和TWEAK表达情况在宫颈鳞癌发生和临床发展中的意义。方法：研究组织病例为档案病理蜡块,应用免疫组织化学技术检测NFAT1和TWEAK的表达;对宫颈鳞癌进行临床分期,分析NFAT1和Tweak表达与临床分期的相关性。结果：免疫组化结果显示,NFAT1阳性表达率在正常宫颈鳞状上皮、cINI级、CINII级、cINIIl级、鳞癌中分别为24．4％,24．5％,29．2％,72．7％,78．4％,各纽总体阳性表达率存在显著性差异,cINIII级与宫颈鳞癌中NFAT1表达率较宫颈正常上皮,CINI级,CINII级与cINIII级显著增高。TWEAK阳性表达率在正常宫颈鳞状上皮、CINI级、CINII级、cINⅢ级、鳞癌中分别为73．4％,66％,73．1％20．4％,19．6％,各组总体阳性表达率存在显著性差异。宫颈正常,CINI级,CINII级与CINIIIN．较CINⅢ与宫颈鳞癌中TWEAK表达率显著增高。NFATI和TWEAK表达相关性具有统计学意义。结论：NFAT1和TWEAK在正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞癌中的表达存在差异且两者间表达存在相关性,NFAT1表达增加与宫颈鳞癌发生和肿瘤进展有关而TWEAK表达与宫颈癌发生呈负相关。     

Nuclear DNA analysis of koilocytic and premalignant lesions of the uterine cervix.

Cervical biopsy samples were taken from 79 patients who had various grades of cervical intraepithelial neoplasia or who showed evidence, in the form of koilocytosis, of human papillomavirus infection of the uterine cervix and from 10 women with normal cervices. The DNA content of the cells in the samples was analysed by flow cytometry. Analysis of the data obtained showed that the biopsy samples from women with cervical intraepithelial neoplasia and human papillomavirus lesions contained significantly more dividing cells (31.2% of cells from human papillomavirus lesions with no cervical intraepithelial neoplasia and 33.06%, 29.89%, and 31.76% of cells from cervical intraepithelial neoplasia grades I, II, and III, respectively) than those from women with normal cervices (21.6%). The proportion of aneuploid samples from the group who showed evidence of human papillomavirus infection only (18.2%) did not differ significantly from the group with cervical intraepithelial neoplasia grade III (21.2%). Aneuploidy and an increased rate of cellular proliferation are recognised characteristics of malignancy. These results therefore support the view that human papillomavirus plays an important part in the aetiology of cervical carcinoma and are relevant to the clinical management of patients.     

Survivin、bFGF、VEGF在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系研究

目的:研究存活素(Survivin)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:选择2015年1月-2017年12月期间武汉大学人民医院收治的宫颈癌患者95例为宫颈癌组,宫颈上皮内瘤变患者70例为宫颈上皮内瘤变组,取同期在我院进行治疗的宫颈炎患者50例纳入对照组。采集三组患者的宫颈组织标本,采用免疫组化SP法对各组织标本中的Survivin、bFGF、VEGF的阳性率、表达水平进行检测,并分析Survivin、bFGF、VEGF与宫颈癌临床病理特征的关系以及各指标表达水平的相关性。结果:宫颈癌组、宫颈上皮内瘤变组的Survivin、bFGF、VEGF的阳性表达率、表达水平均高于对照组,且宫颈癌组高于宫颈上皮内瘤变组(P0.05)。Survivin、bFGF、VEGF的表达与宫颈癌患者的年龄、病理类型、分化程度无关(P0.05),而与宫颈癌肿瘤的分期、淋巴结转移有关(P0.05)。Spearman相关性分析显示,Survivin、bFGF、VEGF三者间的表达水平两两呈正相关(P0.05)。结论:Survivin、bFGF、VEGF的表达水平与宫颈癌的发生、发展有密切关联,并且三种指标间呈明显的正相关性,可能对于宫颈癌肿瘤组织的浸润、转移、分期发挥协同作用。     

Angiogenesis,cell proliferation and apoptosis in progression of cervical neoplasia

OBJECTIVE: To investigate changes in angiogenesis, cell proliferation and apoptosis in the successive steps of cervical neoplasia and to analyze their interrelationship. STUDY DESIGN: A total of 182 cervical specimens, representing 12 normal epithelium, 33 cervical intraepithelial neoplasia (CIN) 1, 21 CIN 2, 30 CIN 3 and 86 squamous cell carcinomas, were evaluated. The microvessels were immunohistochemically labeled with CD34 antibodies. Computerized image analysis was used to evaluate microvessel density (MVD). The apoptotic cells were visualized by a terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling technique and proliferative cells by staining with Ki-67 antibodies. RESULTS: One-way analysis of variance showed that the MVD, Ki-67 labeling index and apoptotic index increased significantly with the progression of cervical neoplasia from normal epithelium, through CIN, to carcinoma (P <.001 for each index). All the indices, determined in all 182 cervical tissues, were significantly and positively associated with each other (P < .001 in all cases), with correlation coefficients ranging from .649 to .819. MVD in patients with recurrence or death was significantly higher than in disease-free patients (P < .05). CONCLUSION: The results suggest that tumor progression in the cervical epithelium is accompanied by angiogenesis and an increase in both cell proliferation and apoptosis. Angiogenesis may be a prognostic indicator in patients with squamous cell carcinoma of the cervix.