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相似文献
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1.
柑叶片蔗糖酶的分离纯化及其部分性质的研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
柑(Citrusreticulata Blanco)幼叶中存在高活性的酸性蔗糖酶。经硫酸铵盐析、DEAE-琼脂糖离子交换层析、SephacrylS-200 凝胶层析纯化,活性回收率6.4% ,纯化倍数179.2 倍。纯化的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示1 条蛋白带,其亚基分子量40 kD。用SephacrylS-200 凝胶层析法测得分子量为80 kD。推测该酶由两个相同亚基构成。以蔗糖为底物测定该酶的表观Km 为1.6×10- 2 m ol·L- 1,Vm ax为100 m g 还原糖·m g- 1蛋白质·h- 1。最适pH 5.0,酸碱稳定区在pH 4.5—5.5 之间。最适温度55℃  相似文献   

2.
盐生杜氏藻甘油-3-磷酸脱氢酶的分离纯化及其特性的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用PEG分级,DEAE离子交换层析,BlueSepharose拟亲和层析,MonoQ离子交换层析等手段,分离纯化盐生杜氏藻(Dunalielasalina(Dunal)Teod.)甘油三磷酸(G3P)脱氢酶(EC1.1.1.8),得到比活为12.6U/mg的电泳纯的酶,并对此酶的生化特性进行了研究。4%~20%非变性聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得全酶分子量约为270kD,SDSPAGE表明该酶只有一种分子量约为65kD的亚基,据此推测该酶应为同四聚体。酶催化磷酸二羟丙酮(DHAP)还原的最适pH值为7.5,催化G3P脱氢的最适pH值为10。该酶对4个底物还原型辅酶Ⅰ(NADH),二磷酸吡啶核苷酸(DHAP),辅酶Ⅰ(NAD),G3P的表观Km值分别为63μmol/L,272μmol/L,1.53mmol/L,6.52mmol/L。该酶在保存过程中易失活。NADH能降低酶失活的速度,而NAD则不然。低浓度NaCl对酶略有保护作用,但高浓度NaCl加快酶的失活,且浓度越高效应越明显。  相似文献   

3.
将诱变的αCD3杂交瘤(TK~-)与PD4杂交瘤(HGPRT~-)融合,获得分泌双功能抗体(BsAb)的四体杂交瘤C3.BsAbC3可分别与CD3分子及胃癌相关抗原P40反应.体外杀伤试验证实,当效靶比为40:1,BsAbC3浓度为1mg/L时,其杀伤效应可达77.6%.该杀伤效应具有明显的特异性,仅P40阳性表达的靶细胞可被溶解,体内杀伤试验证实,裸鼠接种胃癌细胞后5d,以BsAbC3活化的外周血淋巴细胞(PBLs)经局部皮下注射处理,可使移植胃癌完全消退(5/5).这一明显的治疗作用可能与局部注射途径有关,可供临床应用参考.  相似文献   

4.
家蚕病原球孢白僵菌的原生质体再生回复及核型分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
时连根  徐俊良 《菌物系统》2000,19(2):223-229
家蚕病原球孢白僵菌(Beauveria bassiana)原生质体的分离制备、性状及再生回复,并用脉冲凝胶电泳(PFGE0技术分析了其核型。以6mg/mL Driselase为酶解液,0.7mol/L NaCl液(pH5.8)为渗透压稳定剂,在30℃下轻轻振荡处理幼嫩菌丝1.5h,是的生质体分离的适宜条件。原生质体的无核率为26.5%,有核率为73.5%,其中单核率为53.5%。再生回复的形式可观  相似文献   

5.
水杨酸对黄瓜叶片抗氧化剂酶系的调节作用   总被引:27,自引:0,他引:27  
分析了水杨酸(SA)对黄瓜(CucumissativusL.)叶片抗氧化剂酶系活性及活性氧水平的调节作用。不同浓度的SA(0.5mmol/L、1mmol/L、2.5mmol/L、5mmol/L)均能显著地提高被处理叶片超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性,而且还能诱导同株的非处理叶片中SOD和POD活性增加。用1mmol/LSA处理第一片真叶,在处理后6~72h,POD活性增加了22%~67%,同株非处理的第二片真叶POD活性增加了14%~86%,但是,在SA处理后3h之前以及处理96h之后,POD活性没有变化。SA能够显著降低超氧物阴离子含量和提高过氧化氢水平,但它对过氧化氢酶(CAT)活性的抑制作用很弱,表明SA提高体内过氧化氢含量的原因主要是通过提高SOD活性而不是抑制CAT活性。同工酶分析表明,SA不能诱导新的SOD同工酶,但可以诱导新的POD同工酶。  相似文献   

6.
经SephadexG-75凝胶过滤,QAE-SephadexA-50和CM-SephadexC-25离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化出两个出血毒素(DaHT-1和DaHT-2).SDS-PAGE测得分子量均为23.5kD,IEF-PAGE测得等电点分别为5.6和5.2,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸(Asx,Glx)分别占23%和24%,DaHT-1和DaHT-2的最小出血剂量(MHD)分别为0.5μg和0.8μg。都具蛋白水解酶活性,无对TAME,BAEE的水解活性和PLA2酶活性.两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关.DaHT-1和DaHT-2的最适温度分别为35℃和40℃,最适pH为6-9,对热均不稳定,温度高于60℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含0.5mol的Zn,1mol的Ca,较多的Na、K、Mg,不含Co。  相似文献   

7.
6BA诱导的带正电荷的葡萄叶过氧化物酶   总被引:1,自引:0,他引:1  
河岸葡萄叶的带正电荷过氧化物酶(cationic peroxidase, CPOD) 可受6BA 诱导,但盐、H2O2 或Fe2++ H2O2 均使叶片CPOD 活性明显下降,而高浓度的无机盐明显刺激纯CPOD 活性增加。在以愈创木酚为底物时CPOD 最适pH 为4 .60 ~5 .75 ,对H2O2 的表观Vmax 和Km 值分别为110 U/mg 蛋白和1 .15m mol/L。  相似文献   

8.
通过生长试验探讨了饲料中土豆蛋白浓缩物替代鱼粉后对虹鳟摄食率,消化率,生长和饲料利用的影响,对照饲料全部鱼粉为蛋白源,其它饲料分别含土豆蛋白2.2%,5.6%,8.9%和11.1%,另一饲料含5.6%,土豆蛋白和1.7%蛋氨酸,在12℃下饲养4周,试验结果表明,随着饲料中土豆蛋白使用比例的增加,虹鳟的摄食率下降,饲料的干物质,蛋白和灰分的表现消化率上升,脂肪的表现消化率无显著影响,当饲料中含5.6  相似文献   

9.
人类疱疹病毒6型感染细胞免疫学特性研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
赵蓓  姚坤 《Virologica Sinica》1998,13(3):232-236
采用间接免疫荧光法、APAAP法及MTT法,研究了人类疱疹病毒6型(HHV6)中国南京地方株CN5感染细胞病毒抗原表达的形态学和动力学特征、CD抗原表达阳性细胞百分率的变化及PHA诱导的细胞增殖反应的改变。结果显示,CN5感染脐血单个核细胞(CBMCs)后8~12h即可在细胞内检出病毒抗原,至接种后48h,病毒抗原阳性细胞可达36%;CN5感染CBMCs和成人外周血单个核细胞(PBMCs)后可引起两者CD3阳性细胞减少、CD4阳性细胞增多,而对CD2、CD8、CD45RA阳性细胞百分率未见明显影响;CN5感染细胞裂解液对PHA诱导的PBMCs增殖反应具有抑制作用,这种抑制作用与该裂解液的蛋白浓度之间呈一剂量依赖关系,且可被HHV6抗血清所逆转。  相似文献   

10.
用分子筛(岛津DIOL-150柱)和阳离子交换(岛津WCX-1柱)高效液相色谱从虎纹捕鸟蛛(Selenocosmiahuwena)毒液中分离提纯透明质酸酶(Hyaluronidase,EC3.2.1.35).经等电聚焦电泳为一条带,pI=7.2.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得分子量为40kD,经凝胶过滤测得分子量为40.7kD。以透明质酸为底物时在pH3.5─5.5范围内有较大活性,最适pH值为4.0;在pH4.5─6.0范围内稳定,在反应温度为30─60℃时有较大活性,最适温度为50℃;对热稳定,0.15mol/L的NaCl对酶活性有一定的稳定作用.3%的肝素、500μmol/L的Hg~(2+)、Fe~(2+)、Cu~(2+)对酶活性有明显的抑制作用。  相似文献   

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A study of four species of Erysiphaceae (Uncinula salicis, Podosphaera leucotricha, Erysiphe cichoracearum, and Microsphaera diffusa) revealed that the binucleate stages of the ascocarp are initiated in a similar manner to those of Diporotheca rhizophila Gordon & Shaw. The “appendages” developing on immature ascocarps are considered to be receptive hyphae. Appendages characteristic of mature ascocarps are produced much later. Lysis of certain centrum cells occurs, and asci are initiated from some of the remaining binucleate centrum cells. Resorption of centrum cells by the asci is supported by this investigation, corroborating Björling's earlier studies on Erysiphe graminis.  相似文献   

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文昌鱼Sertoli细胞超微结构的进一步研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
方永强 《动物学报》1991,37(2):123-126
用光镜和电镜技术观察厦门文昌鱼(Branchiostoma belcheri Gray)精巢中Sertoli细胞在不同发育时期的细微结构后发现:精巢发育Ⅰ—Ⅱ期,Sertoli细胞贴近基底膜,与生殖细胞相间排列;Ⅲ—Ⅳ期时,逐渐向管腔方向移动;这种细胞在核的顶部及其周围胞质中,有丰富的粗面内质网、发育良好的高尔基复合体、大量溶酶体及糖元颗粒,并可见精细胞附着在Sertoli细胞的胞质中。据此,我们认为Sertoli细胞具有营养、吞噬和释放精子的功能。本文旨在为研究这种细胞的内分泌功能提供有价值的依据。  相似文献   

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