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纯化酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示一条蛋自带,其亚基分子量为39.8kD。用SephacrylS-200凝胶过滤测得全酶的分子量为79.4kD,该酶由两个相同亚基组成。其表观Km为12mmol/L,Vmax为99.5mg还原糖mg-1proteinh-1。 相似文献
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黄鳝碱性磷酸酶的分离纯化及其部分性质研究 总被引:5,自引:0,他引:5
经Tris-HCl缓冲液(pH8.6)抽提,正丁醇处理,30%—75%硫酸铵分级沉淀分离,DEAE-Sepharose离子交换柱层析,Sephacryl S-200凝胶过滤纯化,从黄鳝内脏组织中分离纯化出电泳纯的碱性磷酸酶。该酶提纯倍数为564倍,比活力达到3015U/mg。酶学性质和动力学性质研究表明,该酶催化磷酸苯二钠的水解反应,最适pH值为10.2,pH小于7和大于12均不稳定;最适温度为40℃,温度高于50℃不稳定;米氏常数Km值为1.17mmo1/L。金属离子对该酶的催化活力有不同的影响,K 对该酶活力无影响,Mg2 对该酶有激活作用,Zn2 对该酶有抑制作用。 相似文献
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柑叶片蔗糖酶的分离纯化及其部分性质的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
唐云明 《Acta Botanica Sinica》1995,(8)
柑(Citrusreticulata Blanco)幼叶中存在高活性的酸性蔗糖酶。经硫酸铵盐析、DEAE-琼脂糖离子交换层析、SephacrylS-200 凝胶层析纯化,活性回收率6.4% ,纯化倍数179.2 倍。纯化的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示1 条蛋白带,其亚基分子量40 kD。用SephacrylS-200 凝胶层析法测得分子量为80 kD。推测该酶由两个相同亚基构成。以蔗糖为底物测定该酶的表观Km 为1.6×10- 2 m ol·L- 1,Vm ax为100 m g 还原糖·m g- 1蛋白质·h- 1。最适pH 5.0,酸碱稳定区在pH 4.5—5.5 之间。最适温度55℃ 相似文献
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甘薯叶片蔗糖酶的分离纯化及其部分性质 总被引:11,自引:0,他引:11
纯化酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示一条蛋白带,其亚基分子量为39.8kD。用Sephacryl S-200凝胶过滤测得全酶的分子量为79.4kD,该酶由两个相同亚基组成。其表观Km为12mmol/L,Vmax为99.5mg还原糖mg^-1protein h^-1。 相似文献
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泥鳅铁超氧化物歧化酶的纯化及其部分性质 总被引:3,自引:0,他引:3
超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,ECI.15if,简称(SOD)是一种催化歧化反应的酶类,它能消除生物氧化时产生的超氧阴离子自由基(Oi)。它在自由基理论[‘1、辐射防护[’]、疾病防止[’]等领域有广泛的研究和实用价值。作者从泥鳅体内分离纯化得到Fe--SOD,并对其基本性质进行了研究。回材料和方法回.回材料实验用泥鳅[hearnusanguillicaudatus(caotof)]购自重庆北陆鲜鱼市场。1.2$活力测定采用邻苯三酚自氧化法[‘]。邻苯三酚自氧化速率控制在420flffi,0060O.D/mill。酶活力单位定义:在lml反应液中,每… 相似文献
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