火麻仁植物甾醇含量测定及肠道菌培养对甾醇干预的剂量响应

本文主要建立一种火麻仁提取物中植物甾醇含量测定的方法,并在此基础上研究火麻仁植物甾醇对人源肠道菌的调节作用,以及甾醇对肠道菌调节作用的量效关系。首先采用气相色谱法检测火麻仁提取物中植物甾醇的含量,三批不同方法处理的样品中植物甾醇含量分别为16.16%、45.52%和46.76%,对比得到最佳样品制备方法,经方法学考察优化了检测条件,结果表明本法灵敏度高、重复性好,可用于植物甾醇的含量测定。进而采用人源肠道菌与火麻仁甾醇提取物共温孵培养的方法,检测肠道菌生长对甾醇干预的剂量响应,采用SPSS Statistics 19.0对火麻仁植物甾醇干预人源肠道菌及双歧杆菌生长情况进行单因素方差分析和相关性分析:与空白组相比火麻仁植物甾醇在0.08516~0.3407 mg/m L浓度范围时,人源肠道菌中杆菌生长对甾醇剂量响应明显,二者呈现正相关(r0.99),同时液体培养的双歧杆菌也有相同的剂量响应。结果说明火麻仁甾醇提取物在体外能够促进人源肠道菌的阳性杆菌及独立分离的双歧杆菌生长,提示火麻仁中植物甾醇具有促进肠道益生菌生长的作用。     

用高效液相色普测定乳或乳制品中的乳铁蛋白

用高效液相色谱法测定乳或乳制品中乳铁蛋白的含量。方法:乳或乳制品中乳铁蛋白(Lf)的高效液相分析法是使用阳离子交换色普法来进行分析,样品用缓冲溶液稀释过滤,然后注入阳离子交换柱。样品中组分的分离是通过流动相中的阳离子与色普柱中固定相(即填充料)上的阴离子点位上的阳离子之间的交换来进行。结果:本方法的回收率在90.8%~97.5%之间重现性较高。结论:本方法可用于乳或乳制品中乳铁蛋白的测定,回收率高,结果准确等优点。     

HPLC法测定抗宫炎凝胶剂中金石蚕苷含量的研究

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)测定抗宫炎凝胶剂中金石蚕苷的含量,为制定其质量标准提供基础。方法:采用十八烷基硅烷键合胶为填充剂,乙腈-0.5%磷酸(18:82)为流动相;检测波长为332 nm;流速为1.0 ml/min,探讨HPLC测定抗宫炎凝胶剂中金石蚕苷含量的专属性、精密度、稳定性、重现性等。结果:金石蚕苷在0.104~0.468 mg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.76%,RSD为1.56%。结论:采用HPLC测定抗宫炎凝胶剂中金石蚕苷含量的专属性、精密度、稳定性、重现性均良好,该方法简便可靠,可用于抗宫炎凝胶剂的质量标准的研究。     

拔毒消炎软膏质量控制研究

目的研究拔毒消炎软膏的质量控制方法。方法用薄层色谱法(HPLC)对制剂中大黄、黄柏进行定性鉴别,高效液相色谱法测定大黄酚的含量。结果定性鉴别薄层色谱斑点特征明显;高效液相色谱法测定含量,大黄酚在0.061~0.304μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9954),平均加样回收率为98.68%,RSD=1.39%。结论采用薄层色谱法定性、高效液相色谱法定量,简便准确、重现性良好,可有效控制该制剂质量。     

高效液相色谱法分析测定越桔果渣中的黄酮甙元

采用高效液相色谱法对越桔果渣中黄酮甙元进行定性和定量分析.用甲醇和水（60：40）以0.8 mL/min流速进行洗脱,368 nm波长检测越桔果渣水解液中黄酮类成分并测定其含量.结果：越桔果渣中黄酮甙元主要有杨梅素和槲皮素,其含量分别为：0.0206%和0.0686%.该方法测定样品简单易行,分离效果佳,灵敏度高,重现性好,结果准确可靠.     

椒目仁油的质量标准研究

目的：建立椒目仁油的质量标准。方法：采用GC法测定椒目仁油中亚油酸、α-亚麻酸的含量;根据《中国药典》2010年版一部附录方法[1]测定椒目仁油的酸值、皂化值、碘值、杂质和水分。结果：GC法测得亚油酸、α-亚麻酸的峰面积比值分别在1.14～8.49 mg/mL,1.62～12.04 mg/mL浓度范围内线性关系良好,RSD值分别为0.58%,1.09%;椒目仁油酸值最高为5.98;皂化值180～195;碘值140～180;加热试验5批椒目仁油的颜色均无明显变化,也无任何析出物析出;5批测试样品杂质含量最高为0.20%,最低为0.10%;5批测试样品中水分含量最高为0.17%,最低为0.03%。结论：所建方法操作简便,重现性良好,可用于椒目仁油的质量控制。     

用HPLC法测定发酵液中的生物素含量

采用高效液相色谱法测定发酵液中生物素的含量。色谱柱为Symmetry C18,流动相为V(甲醇):V(pH 2.5磷酸缓冲溶液)=14:86,检测波长为210 nm,柱温为35℃。结果表明,样品进样量在5-150μg/mL范围内线性关系良好,加样回收率在95%以上,相对标准偏差RSD为6.6%,最低检测限为0.01μg/mL。该方法简便、快捷、准确、重现性好,可用于发酵液中生物素的含量测定。     

高效液相色谱法测定17AA氨基酸注射液中N-乙酰-L-半胱氨酸和N-乙酰-L-酪氨酸

建立了一种用高效液相色谱测定 17AA氨基酸注射液中N 乙酰 L 半胱氨酸和N 乙酰 L 酪氨酸含量的方法。样品经稀释后 ,直接上机测定 ,其色谱条件为 :WatersSymmetryC18色谱柱 ,流动相为 8.5mmol/LNaAc - 5 %CH3 OH (pH =4.0 ) ,柱温36℃ ,流速 1.0ml/min ,检测波长 195nm ,N 乙酰 L 半胱氨酸在 5 .4mg/L到 5 40mg/L、N 乙酰 L 酪氨酸在 4.9mg/L到 490mg/L之间 ,标准曲线呈良好的线性关系 (r2 >0 .9999)。该方法具有良好的重现性 ,日内相对标准偏差小于 3% ,日间相对平均误差小于 7% ,样品回收率在 90 %～ 110 %之间。该方法与测定氨基酸注射液的其它高效液相色谱法相结合 ,能够对 17AA氨基酸注射液中所有氨基酸成分进行全面检测。     

桂黄降脂颗粒质量标准研究

目的:建立桂黄降脂颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱法对桂黄降脂颗粒中山楂、丹参进行定性鉴别;采用HPLC法对山楂中的槲皮素和丹参中的丹参素钠进行含量测定。结果:薄层色谱斑点清晰、分离度效果较好、且阴性无干扰;槲皮素在11.2~33.6μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9995(n=5),样品平均回收率为98.00%,RSD 1.33%;丹参素钠在0.0166~0.332 mg·mL-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9998(n=5),样品平均回收率为97.87%,RSD 1.35%。结论:该方法准确可靠、专属性强、重现性好,可以作为控制桂黄降脂颗粒质量的有效方法。     

气相色谱法测定抗毒素中的间甲酚含量

采用气相色谱法测定抗毒素中的间甲酚含量。样品用苯甲醇作内标,经高氯酸沉淀蛋白、氯仿抽提后,通过HP-INNO-WAX柱,以氢火焰检测器测定间甲酚含量。内标峰与样品峰的分离度大于1.5,平均回收率及变异系数分别为100.067%和1.93%,测定线性范围0.0202~1.7588mg/ml,最小检测限为0.01272mg/ml,该方法准确快速,比化学方法好。     

化学衍生-溶剂结晶法从植物甾醇混合组分中分离豆甾醇

采用化学衍生和溶剂结晶法,建立起一条从植物甾醇混合组分分离豆甾醇的技术途径。通过对植物甾醇的乙酰化,溴化-脱溴和皂化反应,并结合相应试样的重结晶操作以分离豆甾醇。利用此方法从植物甾醇混合组分分离豆甾醇,其产率为6.9%,回收率45.7%,具有生物工业应用潜力。     

苍耳甾醇物质对菜青虫取食、血淋巴和中肠酶活性及中肠组织的影响

甾醇是植物体内的重要次生物质,具有多种生物活性。为探明植物甾醇类物质对害虫的作用机理,采用叶碟饲喂法进行取食处理后研究了苍耳Xanthium sibiricum中分离纯化的甾醇类组分（甾醇A和甾醇B）对4龄菜青虫Pieris rapae的取食、酶活性以及中肠组织的影响。结果表明： 苍耳甾醇类组分甾醇A和甾醇B能明显抑制菜青虫的取食,拒食中浓度AFC50分别为0.0229 和0.0147 mg/mL;同时,显著降低菜青虫中肠蛋白酶、淀粉酶和羧酸酯酶活性,其中,甾醇B的作用效果较强,处理后24 h和36 h, 对蛋白酶活性抑制率分别为23.74%和58.59%,对中肠羧酸酯酶的活性抑制率分别为49.01%和83.03%;降低血淋巴蛋白质含量,诱导菜青虫血淋巴羧酸酯酶活性的提高;破坏昆虫中肠上皮组织,微杆模糊不清呈消融状,杯状细胞的杯腔基部微绒毛消失。这些结果说明苍耳甾醇类物质对菜青虫的取食抑制可能与对中肠消化酶活性的抑制以及对中肠上皮组织的破坏有关,植物甾醇组分的不同配比影响其对昆虫的作用效果。     

蛭龙活血通瘀胶囊的质量标准研究

目的:建立蛭龙活血通瘀胶囊的质量标准.方法:采用薄层色谱法对蛭龙活血通瘀胶囊中黄芪进行定性鉴别;采用HPLC-ELSD法对君药黄芪中的黄芪甲苷进行含量测定.结果:蛭龙活血通瘀胶囊中的黄芪薄层色谱中,在与对照品相应的位置上,显相同颜色的斑点;黄芪甲苷在0.0236mg/ml～0.236mg/ml间呈良好的线性关系,r2=0.9998,样品平均回收率为99.02%(n=6),RSD为1.02%.结论:所建立的鉴别法专属性强,定量方法操作简单,精密度、重现性好,可以作为控制活血蛭龙通瘀胶囊的有效方法.     

配位体交换色谱法测定槐米废渣水解液单糖成分

利用生物质转化成糖研究近年来备受关注,为给工业化高效利用槐米废渣提供检测技术,本文建立了槐米废渣水解转化糖液中4种主要单糖的铅(Pb~(2+))配位体交换高效液相色谱分析方法并采用离子色谱法验证了方法的可行性;实验比较了Pb~(2+)和Ca~(2+)两种不同柱内抗衡离子对组分分离的影响,最终利用铅配体方法对实际样品进行了测试。方法分离柱采用Sepax Carbomix Pb-NP 5(300×7.8 mm ID,5μm,8%交联度)色谱柱,柱温75℃;流动相采用超纯水,流速0.50 m L/min;检测器采用示差折光检测器,检测器温度为30℃;样品采用活性炭固相萃取小柱脱除色素。结果表明,组分葡萄糖、木糖、半乳糖和阿拉伯糖在25 min内完成分离,在0.2~20.0 mg/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,方法检测限在1.94~1.98μg/m L之间;槐米废渣水解液中阿拉伯糖平均含量大于67%,具有较高回收价值。方法样品前处理简便,重现性好,结果准确,测试成本低。     

高效液相色谱法测定山栀子中栀子甙的含量

采用高效液相色谱法测定中药山栀子（Cardenia jasminoides Ellis）中保肝利胆的主要成分栀子甙（geniposide）的含量。分析结果表明,本方法重现性好,平均加样回收率为100．90％,RSD为2．00％。用此方法测定未知样品山栀子中栀子甙的平均含量为3．463g/100g。     

RP-HPLC法测定不同产地红枣中甜菜碱的含量

目的:通过对影响甜菜碱提取和测定的符种因素进行了研究,建立了一种准确、快速的测定不同产地红枣中甜菜碱的方法.方法:样品采用超声波甲醇提取的方法,得到的样品采用反相C18柱进行分离,色谱条件为:流动相为50mmol/L pH 4.5的KH2PO4溶液;192nm波长测定,流速0.7ml/min.结果:总分析时间:4.5min.甜菜碱平均保留时间2.698min.甜菜碱在5.0～25.0mg/ml线性关系良好(r2=0.9911),平均回收率为96.87%.结论:该法测定红枣中甜菜碱含量简便、快速、准确,重现性好.     

HPLC法测定不同产地鱼腥草中不同部位芦丁的含量

建立测定鱼腥草中芦丁含量的高效液相色谱分析方法。使用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6×150 mm,5μm),流动相为(A:0.1%磷酸水溶液,B:甲醇),柱温为20℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为358 nm。测得芦丁的线性范围为0.02 mg/mL～0.50 mg/mL(r=0.9999),加标回收率为92.0%(n=3)。不同产地中芦丁含量测定结果表明,贵州产区的含量最高,河南的最低。不同部位中芦丁含量测定结果表明,叶中的含量均高于茎中5～10倍。本方法操作快速、简便、灵敏度高、重现性好,可使用于中草药中芦丁含量的测定。     

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体化学成分的研究

应用梯度提取、反复重结晶及硅胶色谱法分离和纯化,采用NMR等谱学方法鉴定结构对蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)菌丝体进行了化学成分的分析。从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中分离得到6个化合物,分别鉴定为4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮-麦角甾烷(1)、麦角甾醇(2)、β-谷甾醇(3)、麦角甾醇过氧化物(4)、啤酒甾醇(5)、甘露醇(6)和1-油酰基-2-亚油酸-3-棕榈酸甘油(7),并对其石油醚提取物中的油状组分进行GC-MS分析,结果表明其中主要为亚油酸(9,12-十八碳二烯酸,含量41.949%)、反油酸(反9-十八碳烯酸,含量为27.696%);同时采用高效液相色谱法测定其中的麦角甾醇的含量,与海鲜菇、杏鲍菇、香菇、金针菇、滑子蘑、平菇等食用菌子实体比较,结果蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中麦角甾醇含量为15.65 mg/g,平菇为21.43 mg/g,杏鲍菇为10.16 mg/g,香菇为13.34 mg/g,金针菇为9.48 mg/g,滑子蘑为10.43 mg/g,海鲜菇为14.42 mg/g。     

桂皮醛亚微乳注射剂中桂皮醛的含量测定研究

目的:建立桂皮醛亚微乳注射剂中桂皮醛含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,按照固定相为色谱柱Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈:0.5%冰乙酸水溶液(60:40),检测波长为288 nm,流速为1.0 m L·min~(-1),柱温为25℃,进样量为10μL的进样条件,测定桂皮醛亚微乳注射剂中桂皮醛的含量。结果:桂皮醛在5~100μg·mL~(-1)浓度范围内呈良好的线性关系,标准曲线方程为Y=1703 X-1996(r~2=0.999,n=6)。在低、中、高三个浓度下,一天内连续3次和连续3天测定样品,测定的RSD值均小于2.0%,精密度良好。加速试验中,在温度30℃,相对湿度60%的条件下放置6个月,样品测定结果与0天相比无变化。本实验中3批桂皮醛亚微乳注射剂中桂皮醛含量的均值为19.89μg·mL~(-1),平均回收率为100.98%,RSD为1.45%。结论:本方法操作简便、快速准确,稳定性高,系统重现性良好可有效控制桂皮醛亚微乳注射剂中有效成分含量。     

HPLC法测定神安颗粒中五味子醇甲含量的研究

以高效液相色谱法测定神安颗粒中五味子醇甲含量,建立神安颗粒多指标质量控制体系中脂溶性成分的控制指标。采用Kromasil C18色谱柱,流动相为甲醇-水(60∶40),检测波长为250 nm,流速为1.0 m L/min,柱温为室温,进样量为10μL。结果五味子醇甲进样量在0.15~6.0μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(R2=1),平均回收率为97.38%(RSD=2.05%),测定神安颗粒中五味子醇甲含量约为1.30 mg/g。本方法简便、快捷、专属性强、重现性好,可用于神安颗粒天麻苷类成分的质量控制。