N-酰化低聚壳聚糖衍生物还原能力的研究

对低聚壳聚糖进行N-酰化改性,制得取代度相同的N-马来酰低聚壳聚糖(NMCOS),N-琥珀酰低聚壳聚糖(NSCOS),N-邻苯二甲酰低聚壳聚糖(NPCOS),其中NMCOS1、NSCOS1、NPCOS1的取代度均为0.25;NMCOS2、NSCOS2、NPCOS2的取代度均为0.49。考察了6种N-酰化低聚壳聚糖衍生物的还原能力。结果表明:当取代度相同时,N-邻苯二甲酰低聚壳聚糖的还原能力最强,其次是N-马来酰低聚壳聚糖,N-琥珀酰低聚壳聚糖的还原能力最差。这可能是由取代基的性质不同所致。     

不同取代度N-邻苯二甲酰壳聚糖抗氧化活性的研究

低聚壳聚糖与邻苯二甲酸酐酰化得到三种取代度不同的N-邻苯二甲酸酐酰低聚壳聚糖NPCOSA、NPCOSB和NPCOSC,取代度分别为0.330、.55和0.65。通过红外光谱对其结构进行表征。并考察了其抗氧化性能。结果表明:COS的抗氧化性能最强;随着取代度的增加,N-邻苯二甲酰低聚壳聚糖对超氧阴离子的清除能力逐渐升高;而对DPPH的清除能力以及还原能力呈逐渐下降趋势;对羟基自由基的清除顺序大小依次为NPCOSB>NPCOSA>NPCOSC,即NPCOSB清除羟基自由基的的能力最佳。     

N,N,N-三甲基壳聚糖甲基硫酸盐的合成及理化性质的测定

壳聚糖与甲醛、甲酸反应得到N,N-二甲基壳聚糖,然后以硫酸二甲酯为季铵化试剂反应得到N,N,N-三甲基壳聚糖甲基硫酸盐(TMCMS),用IR1、H NMR和元素分析对其结构进行了表征。元素分析结果表明其季铵化度为74.6%,差示扫描量热法和热重分析法结果表明其热稳定性比壳聚糖差,但其水溶性明显优于壳聚糖,25℃时在水中的溶解度可达20 mg/mL,浓度为2 mg/mL时在pH 3～12范围内无沉淀产生。     

微波法制备壳聚糖研究

采用微波炉加热,在敞口容器中,进行甲壳素脱乙酰反应,制备壳聚糖。考察了碱溶液浓度和微波加热时间对壳聚糖脱乙酰度的影响。固定微波加热时间30min,随NaOH溶液浓度增加,脱乙酰度先增加,后减小;NaOH溶液浓度为45％时,壳聚糖的脱乙酰度最高。固定NaOH溶液浓度为45％,随着微波加热时间延长,壳聚糖的脱乙酰度增加。微波加热的最佳时间为30min。加热时间继续延长,壳聚糖变黑。碱溶液浓度和微波加热时间对壳聚糖的粘均分子量影响都不大。本文试图从微波场的能量分布和微波加热机理方面解释实验结果。     

N-乙酰化反应制备水溶性壳聚糖研究

将高度脱乙酰化的壳聚糖在均相介质中进行N-乙酰化反应,制备水溶性壳聚糖。研究了制备工艺条件对脱乙酰度及水溶性的影响。结果表明,在乙酸—乙醇均相体系中进行乙酰化反应时,壳聚糖与乙酸酐的质量比为1∶0.6,反应温度控制在20℃,反应时间为8 h时,产品的脱乙酰度在50%左右,获得了水溶性良好的N-乙酰化壳聚糖。     

重组青霉素G酰化酶拆分制备（S）-邻氯苯甘氨酸

对产青霉素G酰化酶的重组枯草芽胞杆菌发酵产酶条件进行优化,确定优化后的发酵条件：可溶性淀粉10g/L、蛋白胨12g/L、酵母粉3g/L、NaCl10g,／L;pH7．5、培养温度37℃、装液量80mL（500mL三角瓶）、培养28h,青霉素G酰化酶的表达水平由最初的7．34U／mL提高至18．23U／mL。以表达青霉素G酰化酶的枯草芽胞杆菌发酵液为酶源,在水相中对映选择性催化N-苯乙酰-（R,S）-邻氯苯甘氨酸制备（S）-邻氯苯甘氨酸,当底物浓度为100mol／L时转化4h,转化率达44．2％。对底物浓度为80mmoL／L反应液中的（S）-邻氯苯甘氨酸进行分离,达到理论收率的94．29％（以N-苯乙酰-（R,S）-邻氯苯甘氨酸的0．5倍摩尔量为理论产率）,e．e．值大于99．9％。170℃条件下,N-苯乙酰-（R）-邻氯苯甘氨酸与苯乙酸共熔消旋为N-苯乙酰-（R,S）-邻氯苯甘氨酸可用于循环拆分。     

羧甲基壳聚糖的制备及其在保鲜中的应用

研究了在碱性条件,无溶剂体系下壳聚糖羧甲基化制备工艺,通过IR对反应前后壳聚糖结构进行了表征。最佳反应条件：2g壳聚糖,在NaOH加入量为5g、碱化时间为6h、氯乙酸用量为6g、3％KI、反应时间为8h、反应温度60℃,产品取代度为1．27。同时研究了羧甲基壳聚糖对辣椒、猪肉涂膜保鲜实验,结果显示对辣椒、猪肉具有较好的涂膜保鲜作用。     

金属酞菁的合成及其对癌细胞光动力灭活作用

报道了含磺酸基和邻苯二甲酰亚氨甲基的两亲性金属酞菁（ＭＰｃＳＰ,Ｍ＝Ｚｎ或Ａｌ（ＯＨ）,,Ｓ＝ＳＯ３＾－,Ｐ＝邻苯二甲酰亚氨甲基）的制备。通过对癌细胞的杀伤作用的研究,筛选出上有较强杀伤作用的锌酞菁（Ｚｎ－Ｄ）Ｚｎ－Ｄ浓度达到１０毫克／升,辐射的红光光剂量为１２Ｊ／ｃｍ＾２时,可杀伤９０％以上癌细胞。     

不同反应条件对壳聚糖性能的影响

本文研究了不同脱乙酰化条件,如碱浓度、反应温度及时间和不同处理方法对壳聚糖的脱乙酰程度及粘度的影响。结果表明：50％的碱浓度、反应温度为90℃并采用间歇法可制得高脱乙酰度及高粘度的壳聚糖。     

姜黄素壳聚糖微球的制备及其在体内外释放度的研究

目的:研究响应面法优化姜黄素壳聚糖微球制备的工艺参数,提高姜黄素的溶出度.方法:采用离子交联法制备姜黄素缓释微球,以微球的载药量和包封率为考察指标,采用星点设计考察配制壳聚糖的醋酸浓度、药物载体的比例以及交联剂浓度对微球制备工艺的影响,对结果进行二次多项式拟合,并根据最佳数学模型进行预测.结果:姜黄素壳聚糖微球最优制备工艺参数为:醋酸的浓度为1％,载体药物比例为0.83,交联剂的浓度为0.15％,载药量和包封率的预测值和理论值偏差分别为0.47％和3.2％.结论:响应面法优化姜黄素壳聚糖微球制剂处方具有很好的预测性,体内外药物释放度研究表明,最优条件下制备的微球可以在提高姜黄素溶出度的前提下缓慢释放达12h.     

非水介质中酶催化葡甘聚糖的转酯化反应

葡甘聚糖(KGM)是一种具有优异的生物降解性、生物相容性、独特的生理和药理功能的天然聚多糖。通过环境友好的、高选择性的酶催化转酯化反应引入疏水基团可以制备葡甘聚糖的酯化衍生物,从而拓宽其应用领域。本研究探讨了在非水介质中以脂肪酶Novozym 435、Lipozym RMIM、Lipozym TLIM和Lipase TypeⅦ催化KGM和乙酸乙烯酯的转酯化反应,并且考察了相关因素对转酯化反应的影响。实验结果表明:在非水介质N,N-二甲基乙酰胺、甲苯和异辛烷中,脂肪酶Novozym 435可以较好的催化乙酸乙烯酯和KGM发生转酯化反应。以Novozym 435为催化剂、以异辛烷为反应介质,当底物浓度[S]=30(mg/mL)、酶用量[E]/[S]=0.30(wt/wt)、酰基供体乙酸乙烯酯用量[Acyl]/[OH]=3.0(mol/mol)、50℃、反应72 h的条件下,酯化KGM的取代度(DS)可达到0.49。     

生物脱硫菌根癌土壤杆菌UP-3的固定化研究

生物脱硫催化剂固定化研究对生物脱硫技术的推广应用具有重要的意义。该文以筛选出的具有脱硫能力的根癌土壤杆菌UP-3为固定化研究对象,二苯并噻吩(DBT)为生物催化脱硫的模型化合物,主要考察了菌株UP-3的培养条件、固定化方法和载体、固定化操作条件和固定化细胞的使用条件。结果表明：以桑特斯培养基在30℃下培养28h的根癌土壤杆菌UP-3具有最佳活性。采用3wt％海藻酸钠水溶液为包埋载体,液菌比为20：1,在4℃下1wt％CaCl2水溶液中固定化24h,得到的固定化细胞脱硫性能最好。在30℃下,反应6d可将浓度为625mg／L的DBT降解60％以上。     

巯基化壳聚糖季铵盐用于基因输送的研究

目的:本研究诣在对壳聚糖进行修饰,以解决其水溶性问题和基因释放困难的问题。方法:本研究通过2,3-环氧丙基三甲基氯化铵和N-乙酰-L-半胱氨酸对壳聚糖进行修饰,得到巯基化壳聚糖季铵盐(TMC-SH),使其在生理条件下带正电并含有一定量的游离巯基。以TMC-SH为基因载体,形成基因复合物。通过琼脂糖凝胶电泳考察其稳定性,并测定其粒径和ζ-电位。通过DTT条件下的粒径测定,考察基因复合物的还原响应性。结果:核磁结果表明合成TMC-SH的季铵盐取代度为22%,游离巯基-SH含量为79.22μmol/g;琼脂糖凝胶电泳结果表明以TMC-SH为载体形成的二硫键交联的基因复合物TMC-SS/p DNA具有较好的稳定性;而且,二硫键交联以后基因复合物粒径较小,结构更为密实;在还原条件下粒径变大,表明二硫键交联的基因复合物变得疏松,说明其粒径具有还原响应性。结论:对壳聚糖进行低取代度的季铵盐修饰和一定量的巯基化修饰后,其具有较好的包载p DNA能力和还原响应性的基因释放能力。     

壳聚糖制备及加工工艺的研究

本文在实验研究和前人工作的基础上,系统地分析了从甲壳素制备壳聚糖中脱乙酰化反应随温度、时间和碱液浓度变化规律,从而得出了脱乙酰化反应中较佳的工艺条件,和较为简便的从虾、蟹壳制备壳聚糖的工艺路线,为天然资源的综合利用打下了基础。     

壳聚糖在香蕉果实贮藏保鲜上的应用效果

以巴西香蕉果实为材料,研究了不同浓度（0、0．5％、1．0％、2．0％）的壳聚糖溶液对香蕉果实贮藏保鲜的影响。结果表明：壳聚糖处理可明显延缓香蕉果实的软化进程和病情指数的升高;同时维持了果实较低的细胞膜透性、多酚氧化酶（PPO）活性和较高的苯丙氨酸解氨酶（PAL）、β-1,3-葡聚糖酶（GUN）的活性。在四种处理中,以2％壳聚糖处理效果最好。表明壳聚糖对香蕉果实的贮藏保鲜效应可能与其调控病害相关酶的活性有关。     

淋巴肉瘤组织中谷氨酰胺酶的性质以及谷氨酰胺衍生物对此酶活性的抑制作用

(1) 本文比较了正常胸腺和胸腺淋巴肉瘤线粒体内谷氨酰胺酶的动力学观察,结果发现二者对于谷氨酰胺酶的最适pH、K_M以及对抑制剂和激活剂的作用等都很相近,说明两种组织的谷氨酰胺酶可能具有相似的活性中心。二者对于所试的六种不同的谷氨酰胺衍生物都没有活性。(2) 在所试过的六种谷氨酰胺衍生物中,以N-邻苯二甲酰谷氨酰胺对肉瘤180和肝癌的谷氨酰胺酶活性的抑制作用最为显著,此种抑制可能与该化合物对肿瘤生长的抑制作用有关。(3) N-邻苯二甲酰谷氨酰胺对肉瘤180谷氨酰胺酶活性呈反竞争性抑制作用。     

N-氨甲酰-D-苯丙氨酸重氮化法制备 D-苯丙氨酸的研究

筛选合适的强酸性阳离子交换树脂,进行N-氨甲酰-D-苯丙氨酸脱氨甲酰制备D-苯丙氨酸的反应分离耦合研究。实验结果表明N-氨甲酰-D-苯丙氨酸的质量浓度为30 g/L,NaNO2与Nc-D-Phe的浓度比为1.2∶1,反应温度为15℃,反应时间3 h,总得率75%~80%。     

壳聚糖固定化德氏根霉脂肪酶的研究

研究了壳聚糖吸附和戊二醛交联对脂肪酶固定化条件,在室温条件下将0．4g酶粉溶于pH6．0缓冲液中,加入10g壳聚糖,摇匀,再加入浓度为0．6％戊二醛交联6h,得到固定化酶,酶活力回收率约为54．2％。固定化酶的半失活温度比游离酶的高,半失活温度由游离酶的47℃提高到100℃,最适反应温度由40℃上升至80℃,最适pH由6下降到5．5,固定化酶K’m值由游离酶的Km 50mg／mL增加到56mg／mL。该固定化脂肪酶用于酯的合成;在80℃条件下经过10批次连续水解植物油反应,固定化酶的活力仍保持在82．6％以上。     

茶多酚与壳聚糖复配溶液对香椿芽保鲜效果的研究

为研究茶多酚与壳聚糖复配溶液对香椿芽的保鲜效果,该研究以多年生香椿树嫩芽为材料,采用不同浓度茶多酚(TP)与壳聚糖复配溶液处理香椿芽,(4±1)℃条件下贮藏,测定贮藏期间香椿芽感官变化和生理生化指标以及腐烂率的变化。结果表明:一定浓度的茶多酚与壳聚糖复配溶液可维持香椿芽的感官品质、降低生理衰老程度并减少腐烂率。其中,0.3%茶多酚-0.5%壳聚糖复配液对香椿芽保鲜效果最显著。0.3%茶多酚-0.5%壳聚糖复配液处理的香椿芽在贮藏12 d时失重率仅为1.52%、维生素C保持率为63.08%、叶绿素损失率为20.67%,同时对降低香椿芽的腐烂率和脱叶率有明显效果,贮藏21 d香椿芽的完好率接近84%、脱叶率为8%。1%茶多酚会加剧香椿芽的腐败脱叶,掩盖了香椿芽原有的香味,并导致褐变现象。因此,0.3%茶多酚-0.5%壳聚糖复配液在香椿芽保鲜方面具有较好的应用价值。     

壳聚糖球固定化酵母细胞的研究

以戊二醛为交联剂,将壳聚糖球交联引入醛基,然后将交联的壳聚糖球浸泡在酵母细胞悬浮液中,制备了固定化酵母细胞壳聚糖球。以苯乙酮酸为底物,催化合成了D-扁桃酸。最优固定化条件是戊二醛的质量分数w(GA)=1%,酵母细胞与交联壳聚糖球的质量比m(Y):m(CB)0=0.5,交联时间为6h,固定化时间为18h,底物浓度为10mmol/L,在此条件下反应最大转化率和产物光学纯度分别高达67.86%和98.05?。固定化酵母壳聚糖球具有良好的重复使用性和贮存稳定性。