酒色着色菌内膜系统光依赖性同化亚硒酸钠为硒半胱氨酸的研究

分离的酒色着色菌（Ｃｈｒｏｍａｔｉｕｍｖｉｎｏｓｕｍ）内膜系统在光照和Ｏ乙酰丝氨酸（ＯＡＳ）存在的条件下,能以３５９纳摩尔／毫克细菌叶绿素·小时（ｎｍｏｌ·ｍｇＢｃｈｌ－１·ｈ－１）的速度催化ＳｅＯ２－３合成硒半胱氨酸。用超声波处理的内膜系统,催化速度仅为处理前的１１％,加入谷胱甘肽（ＧＳＨ）和还原型辅型Ⅱ（ＮＡＤＰＨ）后,其速度增加至处理前的８８３％,该反应对光具有依赖性,进一步实验表明,纯化的谷胱甘肽还原酶,在有半胱氨合酶、ＯＡＳ和ＮＡＤＰＨ共存时,能催化ＳｅＯ２－３转化为硒半胱氨酸,表明ＳｅＯ２－３在内膜系统中能被光偶联的谷胱甘肽还原酶还原为Ｓｅ２－,然后经半胱氨酸合酶的催化作用转化为硒半胱氨酸     

DDPH对猪肺动脉平滑肌细胞PDGF·BB和bFGF表达的影响：免疫细胞化学研究

ＤＤＰＨ［１－（２．６－二甲基苯乙氧基）－２－（３．４二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐］是南京药科大学合成的降压新化合物,也具有降低肺动脉高压和抑制肺动脉平滑肌细胞增殖作用。本实验用细胞培养、免疫细胞化学、图像分析、３Ｈ－ＴｄＲ、细胞周期测定等方法,进一步探讨ＤＤＰＨ对缺氧性肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣＳ）增殖的抑制机制。结果：缺氧促进肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣｓ）的ＰＤＧＦ·ＢＢ和ｂＦＧＦ两种生长因子的表达（积分光密度ＯＤ值）增高。缺氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）能促进ＰＡＳＭＣＳ的ＰＤＧＦ·ＢＢ的ＯＤ值增高,ｂＦＧＦ的ＯＤ值无明显改变。加药组（ＨＥＣ－ＣＭ＋ＤＤＰＨ）的ＰＤＧＦ·ＢＢ和ｂＦＧＦ的ＯＤ值均显著降低,尤以ＰＤＧＦ·ＢＢ的ＯＤ值减少最多．提示：ＤＤＰＨ能抑制ＨＥＣＣＭ引起ＰＡＳＭＣＳ的ＰＤＧＦ·ＢＢ和ｂＦＧＦ表达增多和细胞增殖。结果与大鼠实验观察相符。     

铜锌超氧物歧化酶对几种羟自由基产生系统的影响

应用脱氧核糖降解法研究了ＣｕＺｎ－ＳＯＤ对几种·ＯＨ产生系统的作用机理．结果证明：ＳＯＤ对Ｆｅ（３＋）·Ｏ·Ｈ２Ｏ２系统中·ＯＨ的产生有明显的抑制作用,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它的抑制作用不大;在Ｆｅ（２＋）·Ｈ２Ｏ２和ＣＵ（２＋）·Ｈ２Ｏ２系统中,ＳＯＤ、失活ＳＯＤ和ＢＡＳ均能抑制·ＯＨ的产生;在Ｆｅ（２＋）·Ｏ系统中,ＳＯＤ对·ＯＨ产生作用不大,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它有明显的抑制作用．由此推测ＳＯＤ对·ＯＨ形成可能有三方面的影响：１．对Ｏ的清除作用,阻断Ｈａｂｅｒ－Ｗｅｉｓｓ反应;２．对金属离子的络合作用,降低·ＯＨ的产额;３．促进Ｈ２Ｏ２的积累,加快Ｆｅｎｔｏｎ反应．     

兔2‘,5’—寡聚腺苷酸合成酶的诱导形成

通过对兔血细胞内２‘,５’－寡聚腺苷酸合成酶诱导形成的研究,发现聚肌苷酸与聚胞苷酸双链复合物只能诱导单核型细胞产生２‘,５－ＯＡＳＥ,而新城疫病毒（ＮＤＶ）、红细胞生成素（ＥＰＯ）可同时刺激ＰＢＭＣ和总红细胞中２’,５‘－ＯＡＳＥ的上升。实验证明总红细胞中２’－５‘－ＯＡＳＥ定位于网织细胞中,苯肼、ＮＤＶ和ＥＰＯ引起总红细胞中２’,５‘－ＯＡＳＥ活性的增加与外周血中网织细胞的增加有直接关系。注射ｐ     

强啡肽对脊髓原生型与诱生型一氧化氮合成酶活性、分布和基因表达的影响及机制

蛛网膜下腔注射（ｉ．ｔ．）强啡肽Ａ１－１７（Ｄｙｎ）引起剂量依赖性后肢和尾部瘫痪及甩尾甩足抑制。脊髓背角（侧）ＮＭＤＡ受体和ＮＯＳ／ＮＯ功能活性下降可能与Ｄｙｎ镇痛作用有关,脊髓腹角（侧）ＮＭＤＡ受体－Ｃａ２＋－ＮＯＳ／ＮＯ通路过度激活及ｃ－ｆｏｓ高表达可能与Ｄｙｎ致脊髓损伤（ＳＣＩ）作用有关。在Ｄｙｎ致ＳＣＩ机制中,过量ＮＯ（细胞水平）具有神经毒性作用,脑源性ＮＯＳ主要在早期,诱生型ＮＯＳ主要在后期起作用,而内皮细胞源性ＮＯＳ和适量ＮＯ（血管水平）可能具有保护作用。在原代培养脊髓神经元中,高浓度Ｄｙｎ可通过ＮＭＤＡ受体和κ受体直接引起细胞内Ｃａ２＋超负荷,低浓度Ｄｙｎ只通过κ受体抑制高钾刺激性Ｃａ２＋内流     

.OH在博莱霉素A5介导的DNA断链反应中的作用

利用ＥＳＲ技术研究了博莱霉素Ａ５（ＢＬＭＡ５）、Ｆｅ＾２＋,Ｏ２体系中．ＯＨ的产生。并用ＴＢＡ反应检测了该系对ＤＮＡ的断链作用。以Ｆｅ＾３＋,Ｃｕ＾＋或Ｃｕ＾２＋替换Ｆｅ＾２＋,则体系中无．ＯＨ产生,同时也失去对ＤＮＡ的断链作用;一定浓匠．ＯＨ清除剂可完全清除．ＯＨ,地对ＤＮＡ断链影响甚微;还原剂可淬灭体系中的．ＯＨ,却能促进ＤＮＡ的断链反应;ＳＯＤ可清除体系中的．ＯＨ,失活的ＳＯＤ夫此功能,但两     

蛋白激酶C对CNE-2Z细胞p53基因表达的影响

用抗人ｐ５３蛋白单抗,进行免疫细胞化学染色,研究了蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）对ＣＮＥ－２Ｚ细胞ｐ５３基因表达的影响。结果发现：对照组Ｐ５３蛋白阳性细胞百分比为６７．６９±２．９７。ＰＫＣ催化区抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）和调节区抑制剂Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ）终浓度分别为２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ和４×１０－５ｍｏｌ／Ｌ诱导细胞２４ｈ后,Ｐ５３阳性细胞百分比分别为３０．４４±４．２５和２９．１９±２．３９,较对照组均明显降低,Ｐ＜０．０１。用终浓度为２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ的ＴＰＡ和终浓度为４ｕｇ／ｍｌ的ＯＡＧ分别作用２４ｈ后,Ｐ５３阳性细胞百分比分别为３３．７５±４．３４和６８．１８±４．４２,前者较对照组明显降低,Ｐ＜０．０１,后者变化不明显。阳性细胞中对照组和ＯＡＧ组以胞核和胞浆均着色为主,而ＳＳ、ＳＴ和ＴＰＡ组以胞核着色为主。以上结果表明：突变型ｐ５３基因在ＣＮＥ－２Ｚ细胞中有较高表达;通过抑制细胞ＰＫＣ活性和耗竭ＰＫＣ含量后,均可降低ｐ５３基因的表达;ＰＫＣ激活剂ＯＡＧ对该细胞ｐ５３基因的表达无明显影响。     

癫痫大鼠大脑皮质及海马神经元NOS的变化

给大白鼠侧脑室注射马桑内酯（Ｃｏｒｉａｒｉａ Ｌａｃｔｏｎｅ, ＣＬ）（１７５×１０－ ２ｍ ｏｌ／Ｌ２μｌ）后可诱发癫痫,用ＮＡＤＰＨｄ 组织化学方法观察大脑皮质及海马ＮＯＳ阳性神经元的变化, 结果： 大脑皮质ＮＯＳ阳性神经元数目逐渐增加, 至２ｈ 达高峰, 与生理盐水组相比差异具有非常显著性意义（Ｐ＜ ００１）, 随着ＣＬ作用时间延长ＮＯＳ反应由弱变强;海马区ＮＯＳ阳性神经元２ｈ 时才出现染色明显加深。对体外培养的大脑皮质及海马神经元用ＣＬ （２５×１０－ ５ｍ ｏｌ／Ｌ） 作用１／２ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ 后ＮＯＳ阳性神经元均未见明显增加。     

黑曲霉生产β—葡萄糖苷酶发酵条件的研究

经多项式回归分析,研究了不同浓度Ｎ源、Ｃ源、无机盐等对酶产量的影响,确定出最佳培养基配方为：麸皮４．９％,（ＮＨ４）２ＳＯ４０．４％,ＫＨ２ＰＯ４０．２９％,ＣａＣｌ２０．０５％,ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０４％,ＦｅＳＯ４·７５ｍｇ·Ｌ＾－ＺｎＣｌ２１．４ｍｇ·Ｌ＾－,０．２％油酸钠。并对培养温度１时间、培养基初妈ｐＨ、通气量、接种量、接种方式等培养条件进行优化,使黑曲霉生产β－葡萄糖苷酶的产量由     

抗-HEV·IgM/IgG抗体规律的分析研究

采用病例对照研究,用ＥＬＩＳＡ方法检测抗－ＨＥＶ·ＩｇＭ／ＩｇＧ,通过滴度动态变化,进行几何平均滴度,不同病期和组别灵敏度,特异性的比较,初步确定抗－ＨＥＶ·ＩｇＭ≥１∶２００,抗－ＨＥＶ·ＩｇＧ≥１∶１００为临界值,经抗－ＨＥＶ·ＩｇＭ／ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ的评价认为可分别代表急性期和恢复期的诊断与感染标志。抗－ＨＥＶ·ＩｇＭ和抗－ＨＡＶ·ＩｇＭ双阳性血清应排除假阳性、抗－ＨＥＶ·ＩｇＧ阳性虽可持续八年其保护作用有待探讨     

Mg~（2＋）促进线粒体H~＋－ATP酶的重建机理──H~＋－ATP酶复合体亚基水平的研究

用专一性标记蛋白质巯基（－ＳＨ）的荧光探剂ａｃｒｙｌｏｄａｎ测定含Ｍｇ２＋的Ｆ０－ＡＴＰ酶或Ｆ０－ＯＳＣＰ－Ｆ１－ＡＴＰ酶的脂酶体的构象与无Ｍｇ２＋者明显不同,前者的蛋白质的－ＳＨ基团处于疏水性更强的微环境中;在有Ｍｇ２＋和ＯＳＣＰ同时存在下重建的Ｆ０－Ｆ１－ＡＴＰ酶脂酶体较无ＯＳＣＰ者表现更高的水解活力或膜电位,表明ＯＳＣＰ增强Ｍｇ２＋的促进作用,这进一步提示Ｍｇ２＋通过改变膜脂的物理状态促进线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶重建的间接作用。这些实验结果,从线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶复合体的亚基水平的相关性上,对于我们提出的Ｍｇ２＋通过改变膜脂的物理状态使之具有合适的流动性,诱导嵌入脂双层的Ｈ＋－ＡＴＰ酶复合体的Ｆ０的构象发生变化并传递至复合体的催化中心Ｆ１,从而使重建Ｆ１－Ｆ０－ＡＴＰ酶具有较适合的蛋白构象,表现较高的重建酶活性的假设提供了直接的实验证据,精确地阐明了Ｍｇ２＋促进线粒体Ｆ０－Ｆ１－ＡＴＰ酶重建作用的分子机理。     

Na_2SO_3对不同状态CF_1－ATPase活力的促进作用

Ｎａ２ＳＯ３对ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力的促进作用与酶所处状态有关。ＣＦ０降低ＣＦ１对Ｎａ２ＳＯ３的亲和力和Ｎａ２ＳＯ３促进的最大反应速率。在Ｎａ２ＳＯ３作用下,膜上ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ的活化能高于游离的。膜上和游离ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ的γ亚基上二硫键的还原可以提高Ｎａ２ＳＯ３对酶活力的促进作用。Ｎａ２ＳＯ３对甲醇活化的ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力的促进作用只有在甲醇活化的亚适浓度下才能充分表现出来。Ｎａ２ＳＯ３对Ｍｇ２＋抑制的解除作用因ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ处于不同活化状态而不同。     

烟草愈伤组织在热胁迫过程中活性氧与抗氰呼吸变化的关系

烟草愈伤组织在０－１４ｈ高温（４０℃）胁迫期间,其体内的Ｏ＾－２和Ｈ２Ｏ２迅速积累,分别在２和６ｈ左右达到极大值。同时清除它们的酶ＳＯＤ和ＣＡＴ活性迅速上升,极大值的分布位置分别为２和１０ｈ左右,而腔摁期间的抗氧呼吸比未胁迫（０ｈ）时显著地下降,但在胁迫期间抗氰呼吸于６ｈ左右出现一峰值;用外源Ｈ２Ｏ２和Ｏ２及清除它们的酶的抑制剂ＡＴ和ＤＣＣ分别处理愈伤组织,发现抗氧呼吸明显地加强,推测交替氧化酶可     

汽枪子弹击中右心室及心电图改变一例

汽枪子弹击中右心室及心电图改变一例史训凡，夏斌赞（湖南医科大学湘雅医院－心内科·长沙·４１０００５）ＴＨＥＣＨＡＮＧＥＯＧＥＣＧＡＦＴＥＲＲＩＧＨＴＶＥＮＴＲＩＣＬＥＳＨＯＯＴＥＤＢＹＧＡＳＧＵＮＳｈｉＸｕｎｆａｎ；ＸｉａＢｉｎｚａｎ（Ｄｅｐａｒｔｍ...     

HMR法研究天花粉蛋白TDK肽片段的溶液构象

用１ＨＮＭＲ法测定ＴＤＫ肽在Ｈ２Ｏ（ＨＯＤＫ）,５０％六氟丙醇（ＦＰＤＫ）和２ｍｏｌ／ＬＧｕ·ＨＣｌ（ＧＵＤＫ）中的溶液构象。在ＨＯＤＫ和ＦＰＤＫ中,ＴＤＫ肽的两段序列Ａｓｐ０～Ｉｌｅ４,Ｓｅｒ９～Ｉｌｅ１７分别具有较稳定的α－螺旋含量;而ＧＵＤＫ的ＳＡＬＳ序列仍能检测到有序残存结构。并假设ＳＡＬＳ序列是肽链形成二级结构的原始核心。     

紫外线B对水稻叶组织中活性氧代谢及膜系统的影响

增强ＵＶ－Ｂ处理下,水稻叶片的Ｏ净产生速率、Ｈ２Ｏ２和ＭＤＡ含量以及膜透性都显著增加,敏感性弱的品种Ｏ２净产生速率和膜伤害程度较低。在ＵＶ－Ｂ处理初期活性氧清除系统的水平增高,但随着处理时间的延长,ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＡＰ活性以及ＡＳＡ含量降低,其中ＡＰ和ＳＯＤ活性的下降最为明显,而敏感性弱的品种ＳＯＤ活性始终高于敏感性强的品种。处理１４ｄ后去掉ＵＶ－Ｂ,再经则１４ｄ上述各指标均恢复到与对照相近的水平。根据这些结果推测,水稻的ＵＶ－Ｂ伤害可能主要是由于ＳＯＤ活性的降低而导致Ｏ增生和膜脂过氧化。     

抗rhEPO单克隆抗体的制备及初步应用

用重组人促红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,取其脾细胞在ＰＥＣ４０００作用下与ＳＰ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合,获得一株能分泌抗ｒｈＥＰＯ单抗隆抗体的杂交瘤细胞株２Ｆ１２,染色体数目大于１００条,间接ＥＬＩＳＡ法测定腹水和细胞培养上清效价,分别为１．６×１０＾－７和４×１０＾－４。测定抗体亚类时,则同时显示ＩｇＡ和ＩｇＧ１,其轻链为κ链;相对亲和力为５×１０％＾－１２ｍｏｌ／Ｌ。单抗２Ｆ     

小麦根液泡膜H~+-ATPase的解离和重组

ＫＩ诱导小麦根液泡膜Ｈ－ＡＴＰａｓｅ解离地温度敏感,在４℃时比在２０℃时解离更迅速;该过程为Ｍｇ＾２＋和ＡＴＰ的加强。其它阴离子诱导酶活性丧失的有效性依次为“ＳＣＮ〉Ｉ〉ＮＯ３〉Ｂｒ〉Ａｃ〉ＳＯ３＾２－〉ＳＯ４＾２－〉Ｃｌ〉ＨＣＯ３。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的结果显示酶活性的丧失伴随着Ｖ。与Ｖ１的解离。通过透析去除解离剂可部分恢复泵质子活性和ＡＴＰ水解活性,这表明Ｖ０与Ｖ１进行重新组装。这种解离和重组的能     

一种快速非同位素测定2',5'-寡聚腺苷酸合成酶活性的方法

介绍一种新的非同位素测定２′,５′－寡聚腺苷酸合成酶（２′,５′－ＯＡＳＥ）活性的方法．反应液经已糖激酶处理,点样于ＰＥＩ－纤维素薄层层析板上,经甲醇浸泡与预层析和在０．７５ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４（ｐＨ３．５）缓冲液中的层析可使ＡＤＰ和２′,５′－Ａｎ分离开,系统偏差和２′,５′－ＯＡＳＥ测活分析表明,本方法可用于粗酶液及部分纯化酶液的２′,５′－ＯＡＳＥ活性测定,并可用于临床生化分析     

影响高山红景天细胞悬浮培养中细胞生长和红景天苷积累的几个…

高山红景天细胞悬浮培养过程中３ｍｇ·Ｌ＾－１６－ＢＡ,０．３ｍｇ·Ｌ＾－１ＮＡＡ,６０ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１氮源、０．５￣１．２５ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＨ２ＰＯ４和２０ｍｇ·Ｌ＾－１蛋白胨,较适合于细胞生长和红景天苷的积累。在适宜的接种量下细胞培养２４ｄ后,生物量达１４．０４ｇ·Ｌ＾－１,干细胞中红景天苷含量为５．６６ｍｇ·ｇ＾－１。