金属元素对No.24菌株生长及发酵产物活性的影响

目的：测定不同金属元素对拮抗链霉菌No.24菌株的生长及发酵产物活性的影响。方法：以枯草芽孢杆菌为供试菌株,采用管碟法测定添加不同金属元素后,No.24菌株发酵产物对枯草芽孢杆菌的活性变化情况。结果：生物活性测定结果表明,不同的金属元素对No.24菌株的生长及发酵产物的活性都有不同程度的影响。Hg^2＋、Ag^2＋和Pb^2＋能强烈抑制该菌的生长,Au^2＋、Sr^2＋、Co^2＋、Mo^2＋对其生长有一定的抑制作用,生长量略低于对照;Mn^2＋、Ba^2＋、Zn^2＋、Cu^2＋对其生长没有明显影响;Ca^2＋、Mg2＋对该菌的生长有一定的促进作用,菌体生物量明显高于对照。在0.001mol/L的浓度下,在培养基中加入Co^2＋、Au^2＋、Sr^2＋,其发酵产物的杀菌活性分别为对照的74.67%、55.10%和61.95%;Ag^2＋、Hg^2＋和Pb^2＋能强烈抑制该菌菌体生长;Ca^2＋和Mg^2＋则对菌的生长有明显的促进作用,当培养基中添加0.001mol/L、0.002mol/L的Mg^2＋时其发酵产物的杀菌活性分别提高到136.36%和154.55%;当培养基中添加0.001mol/L0、.002mol/L的Ca^2＋时其发酵产物的杀菌活性分别提高到122.73%和145.45%;在培养基中同时添加Mg^2＋和Ca^2＋时,且浓度为Mg^2＋0.002mol/L＋Ca^2＋0.003mol/L时,其发酵产物的对枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径为40mm,与对照相比,其活性提高到了181.82%,生物量提高到了162.18%。     

大肠杆菌发酵生产SOD最佳条件研究

通过对大肠杆菌进行液体发酵培养,用正交实验探索了四种微量元素（Cu^2 ,Zn^2 ,Mn^2 ,Fe^2 )加入量,培养时间,摇床转速和培养温度等对大肠杆菌细胞增养生产SOD的影响,最佳工艺条件为：CuSO450μmol/L,ZnSO430μmol/L,MnSO450μmol/L,FeSO430μmol/L,培养时间14h,摇床转速200r/min,培养温度38℃,产酶量7726IU/g湿菌体。     

β—葡聚糖酶的分离纯化和特性研究

对里木霉所产β－葡聚糖酶粗酶液通过饱和硫酸铵沉淀、Sephadex G-100柱层析和DEAE－Sephadex A-50柱层析进行纯化,比活提高14．60倍,活力回收6．62％。酶特性研究表明,最适温度和pH分别为60℃和5．0,在pH低于5．0时酶较稳定,酶的热稳定性在60℃以下。Cu^2 、Mn^2 、Mg^2 、Fe^3 和K^ 对酶有抑制作用,Zn^2 、Ca^2 、Co^2 和Fe^2 有激活作用。     

与番茄花柄脱落相关的多聚半乳糖醛酸酶的分离纯化和特性

为弄清番茄花柄脱落相关酶—哆聚半乳糖醛酸酶（polygalacturonase,PG）的性质,采用离体培养条件下经乙烯处理的番茄花柄,分离和纯化了多聚半乳糖醛酸酶并测定其性质。结果表明：用Sephadex G-75凝胶过滤层析和CM Sepharose CL-6B阳离子交换层析方法可分离纯化得到分子量约为30．2kDa的多聚半乳糖醛酸酶,纯化倍数为30．85;纯化的PG活性最适pH值为5．0,最适反应温度为40℃;Km值为26．14mg·mL^-1;1mmol·L^-1Ca^2＋、Cu^2＋、Ba^2＋、Co^2＋和Mn^2＋可抑制PG活性,而1mmol·L^-1的Mg^2＋、K^＋、Fe^2＋、Zn^2＋、Fe^2＋促进PG活性,20mmol·L^-1的Fe^2＋和Fe^3＋促进效果尤为显著。     

响应面法优化产酰胺酶发酵培养基

采用响应面分析方法,对阿萨希丝孢酵母（Trichosporon asahii）ZZB-1产酰胺酶的发酵培养基进行了优化。运用单N子试验筛选出麦芽糖和酵母浸膏为最适碳源、氮源,金属离子Ca^2＋、Mn^2＋可提高发酵酰胺酶产量;通过最陡爬坡实验逼近以上4个因子的最大响应区域后,采用Box—Behnken响应面分析法,确定产酰胺酶最佳发酵培养基为麦芽糖18．84g／L、酵母浸膏9．55g／L、NaC15g／L、KH2PO41g／L、MgSO4·7H2O0．2g／L、FeS040．001g／L、CaC0370．84μmol／L、MnS0465．39肚mo[／L（1％丙烯酸诱导）,NH4·H2O调节pH至7．0。培养基优化后酰胺酶产量由初始2554U／L提高到4156U／L,为原始发酵培养基配方酶活产量的1．63倍。     

不同浓度的La^3＋和Cu^2＋对银杏固体培养和液体培养组织中黄酮产量的影响

以不同浓度的La^3 及Cu^2 分别加入到银杏愈伤组织的固体培养基和液体培养基中,发现La^3 浓度与细胞中黄酮含量呈负相关性;而随着Cu^2 浓度的提高,细胞中黄酮含量也提高;加入前体物(0．05g／L的苯丙氨酸和0．2g／L的乙酸钠)后,这种作用会更显著,黄酮含量比对照增加1倍到2倍．而随着Cu^2 浓度的升高,细胞生长会受到轻微的抑制,加入前体后,这种抑制作用会被缓解．Cu^2 可以认为是一种良好的非生物诱导子。     

无花果沙雷氏菌CH0203壳聚糖酶的纯化及生化性质研究

目的：得到纯化的无花果沙雷氏菌CH02503的壳聚糖酶,并研究其生化性质。方法：将发酵粗酶液先后通过硫酸铵分级沉淀,superdex75凝胶柱和羧甲基纤维素离子交换柱层析,壳聚糖酶得到纯化。结果：经测定,该酶为内切酶,其相对分子质量为29kDa,等电点9．4,在45℃和pH4．0—7．5之间稳定,最适温度是45％,最适pH3．6,Mn^2＋、Co^2＋能够激活,Pb^2＋、Cu^2＋、Ni^2＋、Cr^3＋能够抑制该酶的活性,该酶最适底物是脱乙酰度85％的壳聚糖,对脱乙酰度低于45％的壳聚糖不能作用,对羧甲基甲壳素和羧甲基纤维素不能作用,以完全脱乙酰的壳聚糖为底物时,最终水解产物是单糖、二糖、三糖,反应的米氏常数为0．44mg／ml。     

极端耐热纤维素酶Cel74的表达、纯化与特性

从海栖热袍菌中克隆出编码热稳定性的纤维素酶基因,以热激载体pHsh为表达质粒,构建重组质粒phsh—Ceff4,并转化至大肠杆菌中进行表达。基因表达产物通过热处理和离子交换层析,重组酶纯度达电泳纯。对纯化的重组酶酶学性质研究表明,最适反应温度85℃,最适反应pH4．6,pH4．5—6．0之间酶的相对酶活在80％以上。Co^2＋对酶活性有促进作用,Ca^2＋、Mg^2＋、Zn^2＋不影响酶活性,而Cu^2＋、Ni^2＋、Mn^2＋对酶活性有抑制作用。     

不同营养环境条件下铜、锌、锰等二价金属营养元素对水稻吸收运转镉的调控

利用水培试验研究了在不同营养环境条件下几种二价金属营养元素与镉的互作关系及其水稻吸收运转镉的影响。研究结果表明,培养液中全部营养元素供应水平变化,二价金属元素浓度变化均对水稻吸收镉产生显著影响。Cd浓度保持为2μmol/L不变,随着全部必须元素浓度系数从0. 25提高到2. 0,水稻根系和茎叶Cd含量分别降低42. 5%和64. 5%。在没有其它二价阳离子干扰的情况下,Mg^(2+)、Fe^(2+)、Zn^(2+)、Mn^(2+)、Cu^(2+)均强烈抑制水稻对镉的吸收,水稻根系镉含量降低至对照的15. 4%～61. 6%,茎叶镉含量降低至对照的20. 2%～87. 5%。在木村B培养液中增量供应Zn^(2+)或Mn^(2+)均大幅度促进镉在根系、茎叶和稻谷积累,其中增量供应Zn^(2+)处理的水稻根、茎叶和稻谷镉含量分别比对照增加45. 5%、177. 4%、250. 8%,而增量供应Mn^(2+)处理的水稻根系、茎叶、稻谷镉含量分别比对照增加20. 2%、117. 4%、227. 1%。在所有二价金属元素中,Cu^(2+)对水稻吸收Cd^(2+)的拮抗作用最强,而且铜-镉拮抗关系受营养环境的影响较小。培养液中增量供应Cu^(2+)导致水稻吸收镉大幅减少,根系、茎叶、稻谷镉含量分别比对照降低51. 4%、45. 2%、52. 2%;培养液缺Cu^(2+)则导致根系和茎叶镉含量分别比对照增加177%和114%。研究结果表明,在镉污染稻田适度施用铜肥、控制锌锰的输入、在水稻生长发育期保持较高土壤营养水平可能是控制水稻积累镉的营养调控方法。     

1株高效降解纤维素的槲寄生内生真菌研究

利用刚果红-CMC平板染色法、DNS法从槲寄生内生真菌中筛选获得1株高效纤维素酶产生菌H-3-3,通过分析其菌落形态特征和18S rDNA序列的同源性,将菌株H-3-3鉴定为拟茎点霉属Phom opsissp.;对其酶学性质研究得到：槲寄生内生真菌H-3-3中CMC酶、β-葡糖苷酶、滤纸酶这3种组分酶最适温度均为50℃,β-葡糖苷酶活和滤纸酶活最适pH值均为4.8,CMC酶最适pH值为4.4;3种酶在30～45℃,pH4.0～8.0稳定性较强。金属离子Mn^2＋、Co^2＋、Mg^2＋和Ca^2＋对3组分酶都有不同程度的促进作用,其中以Co^2＋效果最佳;而Ba^2＋、Zn^2＋、Cu^2＋对3组分酶分均表现出明显的抑制作用。