脓肿分枝杆菌MBT结构鉴定与比较演化分析

【背景】作为临床最常见的非结核条件致病分枝杆菌,脓肿分枝杆菌(Mycobacteroides abscessus)因其天然、多耐药等特性成为目前临床治疗的一大挑战。作为分枝杆菌限制性营养元素——铁摄取的关键系统,分枝杆菌素(mycobactin,MBT)、羧基分枝杆菌素(carboxymycobactin,cMBT)与病原分枝杆菌的毒力、耐药等密切相关。【目的】丰富分枝杆菌MBT、cMBT结构数据,探究MBT在致病分枝杆菌起源过程中的演化规律。【方法】在MALDI-TOF-MS与FT-MS/MS解析脓肿MBT、cMBT结构的基础上,进一步开展其活性分析与生物合成基因簇比较基因组分析。【结果】虽然脓肿分枝杆菌MBT、cMBT母核修饰模式与海洋分枝杆菌最相似,R1、R2、R3、R5等位置的修饰完全相同,而且脂肪酸链均位于R4位置;但脂肪酸链长度不同[C10-17 (MBT)、C4-8 (cMBT)],为新结构。Fe-cMBT不仅以浓度依赖方式促进脓肿分枝杆菌生长,而且利用效率显著高于FeCl₃,相关结果表明MBT-cMBT是脓肿分枝杆菌高效获取铁元素的关键系统。与MBT结构结果一致,mbt-1基因簇共线性分析及mbt-1、mbt-2系统发育分析结果均表明脓肿分枝杆菌与海洋分枝杆菌(M.marinum)亲缘关系最近,而非结核分枝杆菌(M.tuberculosis)或耻垢分枝杆菌(M.smegmatis) (基于16S rRNA基因序列分析)。进一步分析发现,M.marinum、M.tuberculosis、M.bovis等病原分枝杆菌脂肪酸链长度变化范围仅4 C,而M.abscessus、M.fortuitum、M.avium和M.smegmatis等条件致病与非致病菌的脂肪酸链长度变化范围为7-11 C,暗示MBT同系物脂肪酸链长度变化范围与分枝杆菌不同生活方式、环境之间可能存在关联。【结论】作为获取铁元素的关键系统,具有独特结构的脓肿分枝杆菌MBT-cMBT在致病、耐药等方面的作用及起源、演化规律值得深入研究。     

血管紧张素Ⅱ在紧张应激引起大鼠血压升高中的作用

实验在雄性Sprague Dawley大鼠上进行。实验动物被随机分为对照组、应激组和应激 腹腔注射卡托普利 (captopril)组。应激组大鼠每天给予电击足底结合噪声的应激刺激 ,每日 2次 ,每次 2h ,连续 15d ;应激 ipcaptopril组大鼠在给予应激刺激期间 ,经腹腔内注射captopril 5 0mg/kg d。实验结果观察到 ,15d后 ,三组大鼠平均尾动脉收缩压分别为 :对照组 16 32± 0 5 5kPa (n =7) ,应激组 19 75± 1 0kPa (n =8) ,应激 ipcaptopril组17 6 9± 1 0 7kPa (n =8)。应激 ipcaptopril组大鼠的尾动脉收缩压较对照组动物有显著升高 (P <0 0 5 ) ,但又显著低于应激组大鼠 (P <0 0 5 ) ;同时 ,三组大鼠下丘脑组织中AVP mRNA水平分别为 :对照组 7332 6 6± 5 2 2 6 5 (n =6 ) ;应激组 12 990 33± 15 33 5 8(n =6 ) ,应激 ipcaptopril组 10 6 15 5± 1410 49(n =6 )。应激 ipcaptopril组大鼠下丘脑组织中AVP mRNA水平较对照组有显著升高 (P <0 0 0 1) ,但又显著低于单纯应激组大鼠 (P <0 0 5 )。统计结果显示 :各组大鼠下丘脑组织中AVP mRNA水平与血压之间存在正相关关系 (P <0 0 0 1)。对照组大鼠在侧脑室注射 (icv)选择性血管升压素 (AVP)V1受体拮抗剂d(CH2 ) 5Tyr(Me)AVP 0 3μg后 ,其平均动脉压 (     

输卵管素(Oviductins)的研究进展

一类具有广泛结构多态性的输卵管特异的糖蛋白———输卵管素,可与卵子的透明带和着床前胚胎相联系。本文综述了这种糖蛋白的合成、分泌、进化上的保守性及其在受精和早期胚胎发育过程中的重要作用。     

HPLC同时测定药用白菊花中绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素

采用高效液相色谱法(HPLC)建立同时测定药用白菊花中绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素含量的方法,样品采用离子液体分散液相微萃法提取。采用Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%冰醋酸溶液(65∶35);检测波长350 nm;柱温35℃;流速0.8 mL/min。绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素的质量浓度与峰面积分别在0.0005~100(r=0.9999)、0.00095~190(r=0.9999)、0.0008~160(r=0.9997)、0.00061~122μg/mL(r=0.9996)呈良好的线性关系;回收率分别为90.52%~100.44%、90.88%~98.58%、94.40%~98.82%、93.68%~100.54%。该方法快速,简便,重复性好,适合于同时测定药用白菊花中绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素的含量。     

木麻黄根乙酸乙酯部位化学成分研究

为阐明木麻黄（Casuarina equisetifolia）的化学成分,采用有机溶剂提取、萃取及多种分离技术,从其根中分离得到14个化合物。经光波谱分析,其结构分别鉴定为5-hydroxy-3-methoxyphenyl-6-O-syringoyl-β-d-glucopyranoside （1）,高良姜苷A （2）,heterophylloside C （3）、6''-O-vanilloylisotachioside （4）、3,4,5-trimethoxyphenyl-6-O-syringoyl-β-d-glucopyranoside （5）、香草醛（6）、丁香醛（7）、3,4-二羟基苯甲醛（8）、齐墩果酸（9）、桦木酸（10）、胡萝卜苷（11）、胡萝卜苷亚油酸酯（12）、（±）-lyoniresinol 2-O-a-rhamnoside （13）和（-）-9-acetyl-isolariciresinol 9''-O-a-l-rhamnopyranoside （14）,其中化合物14为新的木脂素。     

人类黄体组织抑制素与激活素构型的研究

本文观察了抑制素／激活素α、βＢ与βＢ亚基基因在人早（３天）、中（３天）及晚（１５天）期黄体组织的表达。α－ｍＲＮＡｓ在早期黄体最高;βＡ－ｍＲＮＡｓ仅在早期出现,而βＢ－ｍＲＮＡｓ从黄体早期至晚期逐步增高。提示人黄体抑制素可能为抑制素Ｂ。晚期黄体可能有激活素Ｂ的生成。     

肾素—血管紧张素系统——应激激素反应系统

各种急性与慢性庆激时,循环血中及脑、心血管、肾上腺等组织中血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）显著增多;人剧烈运动后血浆ＡⅡ与皮质醇一样均剧烈增加,在慢性应激性高血压动物循环及组织中,ＡⅡ含量持续地增高。还发现高浓度ＡⅡ对肾上腺糖皮质激素的分泌有直接的刺激作用,而组织ＡⅡ含量增多又受肾上腺素能β受体的激发。根据近年来的系列工作,并结合文献,我们认为ＡⅡ是一种重要的应激激素;肾素－血管紧张素系统是一个应激激素反应系     

乳腺癌ConA、LCA、PSA免疫组化研究

运用ＡＢＣ法研究５０例乳腺癌三种凝集素受体（Ｌｅｃｔｉｎ－Ｒ）的表达,并以乳腺纤维瘤和乳腺小叶增生症各１０例作为对照。结果表明：该三种凝集素受体在乳腺良、恶性病变中的表达率无显著性差异。ＣＯｎＡ－Ｒ在乳腺癌以胞浆型定位为主,在纤维腺瘤则以胞膜型多见（Ｐ＜０．０５）。ＬＣＡ－Ｒ和ＰＳＡ－Ｒ在乳腺三种病变中均以胞浆型为主。ＣｏｎＡ－Ｒ与乳腺癌分化程度具良好的相关性;ＬＣＡ－Ｒ与乳腺癌瘤体大小有关。该三种凝集素受体与ＥＲ、ＰＲ及ＣＥＡ的表达未显示密切的关联。     

三叶草素基因(tfx)在快生型大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)H12-2中的表达与稳定性测定

将含有三叶草条基因的重组质粒pT2TFXK和pT2TX3K以接合转移的方式导入快生型大豆根瘤菌H12－2。转移接合子H12－2（pXK）能产三叶草素并具有抑菌活性;H12－2（P3K）表现出对三叶草素的抗性。抑菌谱试验结果表明：82％的供试快生型大豆根瘤菌菌株对三叶草素敏感;所有供试慢生型大豆根瘤菌则表现抗性。稳定性检测结果表明：在共生与人工培养条件下,导入的pXK和p3K质粒均可在宿主菌中稳定存在和表达。     

血清趋化素、网膜素-1与银屑病患者炎症细胞因子和代谢综合征的关系研究

摘要 目的：探讨血清趋化素（CHEM）、网膜素-1（Omentin-1）与银屑病患者炎症细胞因子和代谢综合征（MS）的关系。方法：选取2020年1月～2021年1月我院收治的137例银屑病患者,其中40例轻度、58例中度、39例重度,根据是否合并MS分为MS组（n=59）、非MS组（n=78）。收集患者一般资料和实验室指标,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清白细胞介素（IL）-17、IL-22、IL-23、CHEM、Omentin-1水平。Pearson/Spearman系数分析银屑病患者血清CHEM、Omentin-1水平与炎症因子水平和病情严重程度的相关性,多因素Logistic回归分析银屑病合并MS影响因素。结果：与轻度组比较,中度组、重度组血清CHEM、IL-17、IL-22、IL-23水平升高,Omentin-1水平降低（P＜0.05）;与轻、中度组比较,重度组血清CHEM、IL-17、IL-22、IL-23水平升高,Omentin-1水平降低（P＜0.05）。银屑病患者血清CHEM水平与IL-17、IL-22、IL-23水平和病情严重程度呈正相关（r/rs=0.370、0.471、0.500、0.624,P均＜0.05）;Omentin-1水平与IL-17、IL-22、IL-23水平和病情严重程度呈负相关（r/rs=-0.392、-0.423、-0.475、-0.533,P均＜0.05）。与非MS组比较,MS组血清IL-17、IL-22、IL-23、CHEM水平升高,Omentin-1水平降低（P＜0.05）。CHEM（OR=1.098,95%CI：1.027～1.174,P=0.006）、Omentin-1（OR=0.775,95%CI：0.674～0.891,P=0.001）为银屑病合并MS的影响因素。结论：血清CHEM、Omentin-1水平变化与银屑病患者病情严重程度和炎症反应相关,为银屑病合并MS影响因素,可能作为银屑病合并MS早期监测指标。     

叶面喷施微肥对川白芷主要有效成分含量的影响

在川白芷生长旺盛期叶面喷施锌、硼、钼,研究微量元素锌、硼、钼配合喷施对川白芷主要有效成分含量的影响以及最适宜的喷施量.结果表明: 叶面喷施锌、硼、钼有利于川白芷欧前胡素和总香豆素含量的提高,对异欧前胡素含量的影响不显著;硼对欧前胡素和总香豆素含量的积累影响最大,锌次之,钼最小;硼和钼互作对欧前胡素含量有拮抗效应,锌和硼互作对总香豆素含量有协同效应;施锌0.15～0.24 kg·hm^-2、硼2.02～2.36 kg·hm^-2、钼0.08～0.13 kg·hm^-2时,川白芷总香豆素含量≥0.7%;施锌0.15～0.20 kg·hm^-2、硼1.37～1.47 kg·hm^-2、钼0.09～0.13 kg·hm^-2时,欧前胡素含量≥0.2%.叶面喷施锌、硼、钼有利于川白芷中香豆素类成分的积累和品质的提高.     

中药香薷不同部位总黄酮及3种主要黄酮成分含量分析

中药材中活性成分的含量是中药品质优劣的关键指标。本文建立了香薷中总黄酮和3种主要黄酮的分析方法,探索不同部位黄酮含量的差异,为香薷黄酮类成分的开发利用奠定基础。结果表明优化后的分光光度法对香薷总黄酮测定具有专一性、稳定性。高效液相色谱测定木犀草素、芹菜素和黄芩素-7-甲醚的方法在测定范围内表现出良好的线性关系（r＞0.999）;方法的回收率在98.77%~102.13%之间,RSD均小于5%;不同部位总黄酮的含量由高到低依次为：苞＞尖＞茎＞根,且江西产香薷总黄酮的含量高于浙江产的香薷。这提示在工业生产上提取香薷黄酮类物质时尽量选择道地药材,同时可考虑弃去根部及茎的下端,以便提高浸提效率,增加经济效益。本试验建立的香薷中总黄酮和游离黄酮的测定方法准确、稳定,明确了香薷中总黄酮主要富集在花苞及附近,为进一步提高香薷资源的开发利用提供了理论依据和科学指导。     

白芷中四种线型呋喃香豆素类成分药理作用研究

研究了白芷中异欧前胡素、欧前胡素、水合氧化前胡素、白当归素等4种主要线型呋喃香豆素类成分的药理作用。分别采用热板法、醋酸扭体法观察镇痛活性;家兔离体回肠法观察解痉活性;MTT法观察抗肿瘤活性。发现异欧前胡素、欧前胡素具有明显的镇痛作用,能明显抑制热板、醋酸所致小鼠疼痛,为白芷镇痛的活性成分;异欧前胡素、欧前胡素、水合氧化前胡素均能明显缓解BaCl2所致兔肠平滑肌痉挛,为白芷解痉的活性成分;异欧前胡素、水合氧化前胡素具有显著抗肿瘤作用,对HL-60、P388、HELA、A549等细胞株的生长均有明显抑制作用。     

三叶草素基因（tfx）在快生型大豆根瘤菌（Sinorhizobium fredii）H12— …

将含有三叶草素基因的重组质粒ｐＴ２ＴＦＸＫ和ｐＴ２１Ｘ３Ｋ以接合转移的方式导入快生型大豆根瘤菌Ｈ１２－２,转移接合子Ｈ１２－２（ｐＸＫ）能产生三叶草素并具有抑菌活性;Ｈ１２－２（ｐ３Ｋ）表现出对三叶草素的抗性。抑菌谱试验结果表明：８２％的供试快生型大豆根瘤菌株对三叶草素敏感;所有供试慢生型大豆根瘤菌则表现抗性。稳定性检测结果表明,在共生与人工培养条件下,导入的ｐＸＫ和ｐ３Ｋ质粒均可在宿主菌中稳定存     

青稞HvBAS1基因的克隆及表达分析

细胞色素P450单加氧酶(CYP450)是参与植物代谢的最大酶家族,其中CYP734A亚家族成员广泛参与植物激素油菜素类固醇(BRs)的失活。该研究以青稞农家品种‘肚里黄’幼苗为实验材料,通过人工合成激素24 表油菜素内酯(24 eBL)和BRs合成抑制剂油菜素唑(BRZ)处理,分析BRs对青藏高原特色作物青稞(Hordeum vulgare L. var. nudum Hook. f.)的影响;采用RT PCR技术从青稞中克隆HvBAS1基因,并运用实时定量PCR检测其表达特征,为深入分析HvBAS1基因的功能奠定研究基础。结果显示：(1)24 eBL能够显著促进青稞幼苗的生长,而BRZ处理后幼苗长势明显减缓。(2)从青稞中成功克隆到2个与拟南芥BRs失活基因BAS1高度同源的CYP734A亚家族基因,即HvBAS1 1和HvBAS1 2;HvBAS1 1开放阅读框全长1 629 bp,编码542个氨基酸;HvBAS1 2长1 689 bp,编码562个氨基酸,二者氨基酸序列相似性为76.42%;亚细胞定位预测结果显示二者均存在于内质网。(3)实时定量PCR检测发现,青稞HvBAS1 1与HvBAS1 2的表达模式完全不同,其中HvBAS1 1在青稞根中的表达量高于叶中,而HvBAS1 2在叶中的表达量高于根,且随着苗龄的增大,HvBAS1 1在根中的表达呈先升高后降低的趋势,HvBAS1 2在叶片中呈先降低后升高的变化趋势;BRZ处理青稞幼苗后,其HvBAS1 1与HvBAS1 2基因的表达较对照均显著下调,且HvBAS1 2下调更为明显。研究表明,HvBAS1 1和HvBAS1 2很可能都参与了青稞内源BRs的失活,但二者的功能存在差异。     

缩胆囊表和促胰液表对豚鼠离体胃平滑肌运动的影响

用８个肌槽同时记录豚鼠胃不同部位肌条的收缩活动,以观察八肽缩胆囊素（ＣＣＬ－８）和促胰液素的影响。结果表明,ＣＣＫ－８能（１）增高各部位纵行肌和环行肌的张力;（２）加快胃体纵行肌,胃窦纵行肌、环行肌和幽门环行肌的收缩频率;（３）增大胃窦环行肌收缩波平均振幅和（４）增加幽门环行肌收缩波运动指数,但减少胃全和胃窦纵行肌收缩波平均振幅。上述作用均不能被阿托口 和炎痛所阻断。而促胰液素对各部位肌条的收缩活     

血管升压素对大鼠背根神经节神经元膜的作用

为研究血管升压素(arginine vasopressin,AVP)对大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元的作用及其机制,用细胞内微电极记录技术记录离体灌流DRG神经元的膜电位。结果如下:(1)在受检的120个细胞中,大多数(81.67％)在滴加AVP后产生明显的超极化反应。(2)滴加AVP(10μmol/L)后膜电导增加约19.34％(P<0.05)。(3)灌流平衡液巾的NaCl以氯化胆碱(CH-Cl)置代和用Cd2+阻断Ca2+通道后,AVP引起超极化反应的幅值均无明显变化(P>0.05),而加入K+通道阻断剂四乙铵(TEA)后,AVP引起的超极化反应幅值明显减小(P<0.05)。(4)AVP引起的超极化反应可被AVP V.受体拈抗剂阻断。结果捉示,AVP可使DRG大多数神经元膜产生超极化,DRG神经元膜上存在AVP V,受体,且AVP引起的超极化反应是通过神经元膜上AVP V.受体介导的K+外流所致.AVP可能参与了初级感觉信息传入的调制。