AQP1 在CD-1 纯系野生型孕鼠胎盘组织的表达

目的:研究水通道蛋白1(Aquaporin 1,AQP1)在小鼠胎盘组织的分布及表达,初步探讨AQP1在羊水循环及母胎液体平衡中的作用.方法:各取四只雌雄成年健康野生型CD1小鼠(wildt ype,AQP1+/+)及AQP1基因敲除小鼠(AQP1-KO,AQP1-/-),将纯合子AQP1基因敲除雌雄小鼠等数量合笼交配,第二日检出阴道拴者记为妊娠第1天(1 gestational day,1GD);野生型小鼠同样合笼记录.分别取两组13GD孕鼠的胎盘组织各一个,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术及免疫组织化学技术检测AQP1胎盘组织中的表达,并确定AQP1在小鼠胎盘组织的定位.结果:1.RT-PCR结果表明AQP1在CD-1野生型孕鼠胎盘组织表达,AQP1基因敲除鼠无表达;2.免疫组织化学方法发现AQP1表达于小鼠胎盘血管内皮细胞和滋养细胞,AQP1基因敲除鼠无表达.结论:在mRNA水平和蛋白水平均发现AQP1在CD-1纯系野生型孕鼠胎盘组织的表达,提示AQP1可能在羊水循环及母胎液体平衡中发挥作用.     

AQP1在CD-1纯系野生型孕鼠胎盘组织的表达

目的：研究水通道蛋白1（Aquaporin 1,AQP1）在小鼠胎盘组织的分布及表达,初步探讨AQP1在羊水循环及母胎液体平衡中的作用。方法：各取四只雌雄成年健康野生型CD1小鼠（wild type,AQP1＋/＋）及AQP1基因敲除小鼠（AQP1-KO,AQP1-/）-,将纯合子AQP1基因敲除雌雄小鼠等数量合笼交配,第二日检出阴道栓者记为妊娠第1天（1 gestational day,1GD）;野生型小鼠同样合笼记录。分别取两组13GD孕鼠的胎盘组织各一个,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术及免疫组织化学技术检测AQP1胎盘组织中的表达,并确定AQP1在小鼠胎盘组织的定位。结果：1.RT-PCR结果表明AQP1在CD-1野生型孕鼠胎盘组织表达,AQP1基因敲除鼠无表达;2.免疫组织化学方法发现AQP1表达于小鼠胎盘血管内皮细胞和滋养细胞,AQP1基因敲除鼠无表达。结论：在mRNA水平和蛋白水平均发现AQP1在CD-1纯系野生型孕鼠胎盘组织的表达,提示AQP1可能在羊水循环及母胎液体平衡中发挥作用。     

小型折叠式鼠笼的制造和应用

目前国内外的机械捕鼠器很多,较常用的有铁丝鼠笼、铁板鼠夹、木板鼠夹及捕鼠网等。这些捕鼠器各有其优点,但问题较多。如有的成本较高,体积过大,不便携带;有的捕获时,鼠被击毙,这对鼠体外寄生虫和流行病学的调查均不太适合。为此,我们于1980年在原大型鼠笼的基础上,进行设计和制造了一种小型折叠式鼠笼(以下简称小型鼠笼),现将该鼠笼的制造方法和应用效果报告如下。     

减数分裂联会复合体的制备技术

在生物减数分裂制片中 ,镜下只能看到同源染色体 ,而联会同源染色体的 SC却无法看到 ,本室改进后的微铺展——硝酸银染色技术制备的 SC片 ,在光镜下可以清晰地观察到 SC这一特殊结构。现以小白鼠精母细胞 SC样品制备为例 ,方法如下 :取性成熟的昆明种雄性小鼠 ,颈椎断离处死 ,取两侧睾丸 ,用 2 .2 %柠檬酸钠洗去脂肪等污物 ,去除白膜 ,在 0 .9%的生理盐水中剪碎 ,制成细胞悬液 ,在一牙科蜡 (或涂有石蜡的平面 )上滴加一直径约 1cm的 0 .4 %KCl液珠。取少量细胞悬液滴加在液珠面上 ,在表面张力的作用下 SC则铺展开 ,用涂有 0 .3% Formv…     

地塞米松对泡球蚴在小鼠体内发育的影响

据文献报告,在寄生虫感染动物模型研究中使用皮质类激素可提高宿主对原虫(How-ard,1984)与多种蠕虫(Rayetal,1975;Hashiguchietal,1977;杨超等,1982)的易感性,并能加速寄生虫生长发育过程。参照前人方法,作者观察泡球蚴(Alveolarechino-coccus)在长期肌注地塞米松的小鼠体内发育情况与宿主免疫反应。实验结果显示小鼠免疫力受到明显抑制,虫囊增重快,原头蚴生成率提高。现报告如下。材料与方法一、实验动物雌性昆明种小鼠,体重18—22克。以两种方式接种:取多房棘球绦虫孕卵节片35—40节直接灌鼠胃引起肝脏原发感染;切取小鼠泡球蚴组织块0.2…     

孤独症谱系障碍小鼠肠道屏障功能研究

目的 研究孤独症谱系障碍（ASD）模型小鼠肠道屏障功能及肠道动力的改变情况,为微生物-肠-脑轴在ASD发病中的作用提供理论基础。方法 C57bl/6J雌鼠和雄鼠交配,丙戊酸钠（VPA）诱导的ASD模型及对照组小鼠分别于孕12.5天皮下注射VPA或生理盐水。BTBR模型组为BTBR T+Itpr3tf/J小鼠交配所产幼雄鼠。各组小鼠出生3周后,每窝随机选择2只雄鼠,各组5窝,共计10只,纳入相应组别。各组小鼠6周开始按如下顺序进行行为学检测：旷场实验、埋珠实验、三室社交实验、发声检测和自我梳理实验,各检测间隔5 d。评估小鼠肠道动力（粪便含水量及小肠推进率）和小鼠肠道屏障功能：FITC-葡聚糖灌胃后光谱仪检测小鼠血清中FITC-葡聚糖水平;Western blot检测各组小鼠结肠TREK1, CLDN1, CLDN3,OCLN及ZO1蛋白的表达;qPCR检测各组小鼠结肠Il6,Tnf-α和Ifn-γ mRNA的表达情况。结果 行为学检测结果显示：与对照组相比,BTBR组和VPA组小鼠穿越旷场中间区次数和停留时间显著降低（P<0.05）;于目标小鼠侧室的停留时间率显著降低（P<...     

介绍一种玻瓶标本的封口法

用白乳胶代替石蜡封标本瓶口,经500多瓶试验,瓶口封得既严密又清洁,效果不错。具体做法是:先把市售白乳胶瓶盖打开,令其溶剂挥发一些。蘸取少许乳胶沿标本瓶盖四周均匀涂抹,用力旋转盖好瓶盖,把挤压出来的乳胶也涂抹在瓶盖边缘四周。将规格相同的标本瓶摆放在一起,压上木板、砖块等,静置一月左右     

阿莫西林干预对婴儿优势菌在无菌小鼠体内定植的影响

目的考察阿莫西林干预对婴儿优势菌双歧杆菌及乳杆菌在无菌小鼠体内定植的影响。方法 1日龄Balb/c无菌乳鼠接种婴儿粪便悬液。饲养至7~21日龄灌胃阿莫西林(100mg/kg),对照组在同日龄给予等体积的生理盐水。利用qRT-PCR检测小鼠粪便中双歧杆菌、乳杆菌的含量。结果阿莫西林处理可显著降低乳杆菌(P0.05)、双歧杆菌(P0.05)在无菌小鼠体内定植数量,但停药后饲养至成年(53日龄)二者定植数量与对照组小鼠比较差异无统计学意义(P0.05)。结论哺乳期阿莫西林干预会导致乳杆菌、双歧杆菌在小鼠体内定植量下降,但停药后小鼠饲养至成年二者可达到正常定植量,婴儿菌群定植小鼠模型可以模拟与现有动物模型一致的阿莫西林对双歧杆菌、乳杆菌定植的影响规律。     

肌纤维简易装片制作及横纹的观察

取蝗虫胸部小束肌肉于玻璃皿中,将10％HCl溶液滴加到肌束上解离30分钟,尔后用玻棒轻研到细绒状。用针挑少许于玻片上,先染色,后用解剖针分离,滴一滴10％亚甲蓝溶液染色1分钟,用吸水纸吸去余液,再用生理盐水冲洗几次除去浮色,然后将玻片置于解剖镜下(肉眼操作亦可),用尖细解剖     

用徒手切片法鉴定生物组织中的有机物

1　可溶性还原糖的鉴定切下一片极薄的梨肉薄片 ,放在载玻片上 ,加 2滴刚配制的斐林试剂 ,把载玻片在酒精灯上加热片刻 (注意受热均匀 ) ,盖上盖玻片 ,在显微镜下可看到多边形梨肉细胞内分散着许多砖红色的小颗粒。2　淀粉的鉴定取一小块马铃薯 ,用刀片刮些马铃薯泥放在载玻片上 ,滴上 2滴碘液 ,盖上盖玻片 ,在低倍显微镜下 ,可找到清晰的淀粉颗粒 ,转到高倍镜 ,可看到马铃薯细胞内 ,含有大量圆形或椭圆形的蓝紫色的颗粒。3　蛋白质的鉴定取新鲜的大豆种子 (去种皮 ) ,用刀片切下极薄的一片放在载玻片上 ,先滴 2滴质量浓度为 0 .1g/ m L的…     

两种2-细胞鼠胚体外培养方法比较

目的应用鼠胚质控中的小鼠胚胎体外培养模型,探讨两种胚胎培养方式（四孔皿与微滴法）在单胚观察时间上的差异以及对2-细胞鼠胚体外发育潜能的影响。方法取6-8周龄的昆明白雌性小鼠。采用HMG10IU促排卵,48 h后注射HCG 10IU促卵泡成熟,取形态正常的2-细胞鼠胚。每5-10个胚胎培养在含500μL培养基的四孔皿中（A组）,或单个胚胎接种在含50μL的培养微滴中（B组）。培养后,每隔24 h在倒置显微镜下观察一次,计算单胚观察时间,并检测24 h时的≥4细胞胚形成率、48 h的融合胚形成率7、2 h的囊胚与扩张囊胚形成率、96 h囊胚孵化率。结果两种培养方式于同一试验条件下分别试验5次,A组培养83个胚胎,B组培养69个2-细胞鼠胚。在每一个观察点上,微滴培养的单胚观察时间远超过四孔皿培养（P〈0.001）。但两组各时间点的胚胎发育率相似,无显著差异（P〉0.05）。结论尽管微滴单胚培养方式的胚胎暴露培养箱外时间长,但与四孔皿多胚培养方式比较,两者间2-细胞鼠胚的体外发育潜能相似。     

IRM-2小鼠移植性肿瘤模型的生物学特性

目的观察IRM-2小鼠和C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌生物学特性的对比研究。方法取肿瘤组织研磨,用生理盐水稀释成2×10^6/mL,取细胞悬液接种于IRM-2小鼠和C57BL/6小鼠腋下,0.2 mL/只。观察两品系肿瘤生长、荷瘤鼠生存时间,外周血细胞及病理指标变化。结果两品系小鼠成瘤率均是100%,荷瘤鼠存活时间无明显差异,IRM-2小鼠荷瘤鼠体重净增长明显高于C57BL/6荷瘤小鼠（P〈0.05）。白细胞分类及病理指标变化无明显差别。结论IRM-2小鼠与C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型生物学特性基本一致,IRM-2小鼠可以建立稳定的Lewis肺癌肿瘤模型应用于实验研究。     

成都市动物园野生动物寄生虫调查报告

为了弄清成都市动物园野生动物感染寄生虫情况,以便今后制订合理的防治措施,我们于1982年2月至5月对成都市动物园内的72种265只野生动物(其中包括肉食类14种28只;灵长类11种79只;杂食类13种42只;草食类28种101只和禽类6种15只)进行了寄生虫调查,现将调查方法和结果报告于后。调查方法一、用沉淀法、漂浮法和部分采用贝尔曼法或法依德法检查各种动物粪便内蠕虫的虫卵和幼虫,原虫的卵囊或包囊。规定沉淀法每份标本检查三张沉淀宽涂片;漂浮法每份标本检查全部沾取液膜的盖玻片(或用铜丝圈沾取两滴液膜的涂片);贝尔曼法和法依德法则检查全部去掉…     

植物质体的观察

叶绿体城市学校可选用菠菜或白菜叶作材料。撕下叶片下表皮,用刀片刮取少量叶肉,放在滴有一滴10—20％糖液的载玻片上,使叶肉分散在糖液中,盖上盖片即可观察。山区学校可用藓类做材料(一般为单层细胞)。取藓叶一片。制成装片即可观察。白色体取马铃薯或甘薯,徒手切片或洋葱鳞片表皮制成装片即可显微观察。可见在细胞核周围有一些无色透明的圆形颗粒,这就是白色体。在农村或山区,以鸭跖草嫩叶下表皮为材料进行装片后观察效果更好。     

发面是观察酵母菌的好材料

用发面观察酵母菌的方法是：取少量的发面放入小烧杯内,倒入适量的温开水,搅拌均匀,静放５ｍｉｎ左右,用吸管从液面上吸取,滴一滴在载玻片上,盖上盖玻片。先用低倍镜观察,然后换高倍镜,就能看到一个个椭圆形的酵母菌,有的酵母菌上长出各种大小不同的突起,这就是酵母菌在进行出芽繁殖。如果在盖玻片的一边加一滴碘液,而在另一边放一小块吸水纸,就能看到酵母菌细胞的内部结构。若要培养酵母菌,可在供观察酵母菌用的小烧杯内加入适量面粉,搅拌成面团（水少了可加入适量的冷开水）,盖上培养皿盖,放在温暖的地方,１ｄ（天）左右…     

流感病毒感染对小鼠肠道菌群的影响及桑叶的调节作用

【摘 要】 目的 探讨流感病毒对肠道菌群的影响以及桑叶提取物在治疗小鼠流感时对肠道菌群的调节作用。方法 将36只小鼠随机分为4组,正常对照组滴鼻生理盐水,其余以流感病毒鼠肺适应株FM1滴鼻3 d,建立流感小鼠模型后,正常对照组和病毒对照组灌胃生理盐水,另2组分别以高剂量(500 mg/kg)和低剂量(100 mg/kg)灌胃桑叶提取物,连续5 d。每天检测小鼠体重,并于病毒感染前、感染后及灌胃处理后3次无菌收集小鼠粪便,培养并计数小鼠粪便中肠杆菌、肠球菌、乳酸杆菌和双歧杆菌。结果 小鼠在感染病毒后体重明显降低,桑叶提取物治疗后体重降低的趋势有所减缓。小鼠肠道菌群在感染流感后有明显的变化,但桑叶提取物治疗后肠道菌群的恢复不明显。结论 流感病毒感染能引起小鼠肠道菌群的失调,桑叶不显示调节肠道菌群的效果,表明其对流感的治疗不通过调节肠道菌群平衡来发挥作用。     

双歧杆菌防治鼠伤寒沙门菌感染的实验研究

目的　以小鼠为模型,研究双歧杆菌在体内对鼠伤寒沙门菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ,ＳＴＭ） 感染的防治作用。方法　分别用大剂量悉复欢、Ｂ．ｂｉｆｉｄｕｍ 、生理盐水（ＮＳ） 给三组小鼠灌胃,再用ＳＴＭ 攻击,观察小鼠经上述不同处理前后肠道双歧杆菌数量和ＳＴＭ 攻击后粪便ＳＴＭ 培养阳性率,阳性标本ＳＴＭ 分离值及小鼠ＳＴＭ 感染率;同时用双歧杆菌、悉复欢、双歧杆菌加悉复欢分别治疗ＳＴＭ 感染的小鼠,观察并比较疗效。结果　１． 大剂量悉复欢使用可使小鼠肠道内双歧杆菌明显降低,而双歧杆菌灌胃则肠道双歧杆菌明显增多。双歧杆菌灌胃的小鼠粪便ＳＴＭ培养阳性率、阳性粪便ＳＴＭ 值明显低于用大剂量悉复欢和ＮＳ 的小鼠,小鼠ＳＴＭ 感染发病率也明显较低。２． 对于ＳＴＭ 感染鼠,双歧杆菌与悉复欢联合治疗效果最好。结论　１． 双歧杆菌在体内对ＳＴＭ 有拮抗作用;能预防和减少ＳＴＭ 感染发生;２． 在ＳＴＭ 感染时,先用悉复欢,再用双歧杆菌可以达到预期疗效,双歧杆菌对鼠伤寒沙门菌感染有辅助治疗作用。     

肾小球血循环的观察

取一只青蛙或蟾蜍,用探针从枕骨大孔向前,毁脑、制成脊蛙。将蛙体放在玻璃板上(玻板的大小以放下蛙体为宜),剖开腹腔。把肾脏上面的脏器拉向一旁,露出肾脏,剪出肾脏下方的蛙壁。小心地把肾脏及其周围的组织拉出,把它平展在玻璃板上,切勿有皱褶。用浸过0.7％生理盐水的纱布盖在蛙体上,注意每隔几分钟向肾脏上滴一滴生理盐水。把放有蛙体的玻     

怎样观察衣藻生活细胞的结构?

衣藻细胞小,能游动,加碘液杀死细胞并染色,藻体颜色失真。而且只要碘液稍浓,或染色时间稍长,整个细胞变成蓝黑色,基本结构无法看清。用生活细胞观察结构效果较好,方法是;用吸管吸取培养液一滴于载玻片中央,加盖片。于盖片的某一侧加一滴透明胶水(商品),再用解剖针微微掀动同一侧盖片的边缘一次,透明胶水即向盖片下扩散,并形成浓度梯度。在各梯度中都有衣藻分布。盖片下无胶水的地方藻细胞游动迅速,胶水浓度稀的地方细胞游动减慢。随着胶水浓度的增高,细胞游动速度递减,最后被迫停止运动。在这个区域选择几个个体大,结构清楚的生活细胞,观察其基本结构,效果较好。     

Bmal1时钟基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定

目的对Bmal1基因敲除小鼠进行繁育及基因型进行鉴定,为生物节律研究提供理想的动物模型。方法将引进的Bmal1基因敲除小鼠,以1雄2雌的合笼方式进行饲养繁殖,从仔鼠中提取鼠尾基因组DNA,PCR扩增目的基因片段,琼脂凝胶电泳进行基因结果判定,Western Blot检测心肌组织中Bmal1蛋白表达进行结果验证。结果 Bmal1~(-/-)小鼠与Bmal1~(+/+)小鼠相比,表型除体重外未见明显差异,纯合敲除小鼠丧失繁殖能力; Bmal1~(-/-)小鼠24 h血糖节律改变,Bmal1基因敲除小鼠繁育成功,获得一批基因敲除鼠。结论应用PCR法可成功鉴定Bmal1基因敲除纯合小鼠,PCR扩增法是检测小鼠基因的有效方法。