豚鼠肺内NOS之分布及实验性哮喘对其活性的影响

用组织化学方法对豚鼠肺内一氧化氮合酶（NOS）进行定位研究．并观察正常对照组和支气管哮喘组豚鼠肺内NOS分布及活性变化。结果显示;（1）正常豚鼠各级支气管、肺泡管、肺泡囊上皮细胞均成NOS阳性反应,气道上皮下平滑肌细胞呈NOS阴性反应。（2）哮喘豚鼠各级支气管、肺泡管、肺泡囊上皮细胞呈NOS强阳性反应,气道上皮下平滑肌细胞里NOS阳性反应。（3）两组肺泡上皮细胞均呈NOS阴性反应。（4）两组肺内动,静脉血管内膜均呈NOS阳性反应。结果提示一氧化氮不仅对肺具有一定的生理作用,而且可能参与哮喘的病理生理过程。     

短额负蝗配子发生过程中蓖麻凝集素受体的分布

利用凝集素细胞化学方法对短额负蝗Atractomorpha sinensis Bolivar配子发生过程中蓖麻凝集素（Ricinus communis agglutinin-Ⅰ,RCA-Ⅰ）受体分布进行了定位研究,旨在认识昆虫配子发生过程中β-半乳糖复合物的分布规律及意义。结果表明： 在短额负蝗精子发生过程中,RCA-Ⅰ在各期生精细胞膜上均有明显的阳性反应,变形期及成熟期精子头部为中强度阳性反应。卵子发生中,各阶段卵母细胞均为阳性反应,在卵母细胞生长期阳性反应达峰值,随着卵黄颗粒的逐渐形成,阳性反应逐渐减弱,成熟卵子中卵黄膜上重新出现中强度阳性反应。结果提示短额负蝗配子发生过程中β-半乳糖复合物的高度表达和修饰变化与其配子发生密切相关。     

河北环毛蚓神经系统 一氧化氮合酶的组织化学定位

用依赖还原型辅酶Ⅱ的黄酶组织化学方法,研究了环节动物门寡毛纲种类河北环毛蚓（Pheretima tschiliensis)神经系统k 一氧化氮合酶(NOS)阳性细胞及阳性纤维的分布,结果表明,河北环毛蚓神经系统中脑神经节背侧有大量细胞呈现NO强阳性反应,胞体和突起染色明显。咽下神经中偶尔能见少数染色较浅的神经元。在脑神经节腹内侧、围咽神经、 咽下神经节外侧部及腹神经链中都有一氧化氮合酶阳性纤维存在脸染色很深,实验结果表明,在环节动物中作为信息分子的一氧化氮已广泛存在于神经系统中。     

抗体形成细胞发育的免疫电镜研究

用包埋前免疫电镜技术,研究以辣根过氧化物酶二次免疫后2、3、5、8和10天豚鼠腘淋巴结中抗体形成细胞的发育和分化。按照细胞的不同发育阶段和抗体阳性反应特征,可将它们分为四类细胞:(1)Ⅰ类细胞(淋巴细胞),核位于细胞中央,胞质很少,核周腔呈阳性反应,细胞质中有大量均匀分布的阳性颗粒;(2)Ⅱ类细胞(前浆细胞),核质比减低,有的核偏位,胞质中出现大量颗粒状短或棒状阳性反应物,其中有一些呈平行排列;(3)Ⅲ类细胞(前浆细胞),胞质中显示大量平行排列的阳性反应物;(4)Ⅳ类细胞(浆细胞),胞质中平行排列的阳性反应物连结成网状。根据细胞的形态以及胞质中阳性反应物从颗粒状、短棒状到平行排列的片层和连结成网状的变化,显示出从淋巴细胞经前浆细胞发育为成熟浆细胞,不断合成并累积抗体的动态过程。     

大鼠肺内NOS之分布及缺氧对其活性的影响

本文以组织化学方法对大鼠肺内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）进行定位研究,并观察了不同时间（８小时～２８天）缺氧时肺内ＮＯＳ活性的变化。结果显示：①正常大鼠各级支气管、肺泡管和肺泡囊上皮细胞呈ＮＯＳ强阳性反应;肺血管内膜呈ＮＯＳ阳性反应。②缺氧８小时,肺血管内膜ＮＯＳ阳性反应开始降低,并缺氧时间越长,ＮＯＳ阳性反应越低、③缺氧１４天时,肺泡间质和肺血管周围炎性细胞呈ＮＯＳ阳性反应;缺氧２８天时,炎性细胞ＮＯＳ阳性反应增强。④缺氧对支气管、肺泡管和肺泡囊上皮细胞ＮＯＳ的活性无明显影响。从而提示一氧化氮不仅对肺具有一定的生理学作用,而且可能参与缺氧时肺的某些病理学过程。     

NO和NADPH-黄递酶在绿豆下胚轴不定根发生和发育过程中的变化(英文)

研究了一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)、一氧化氮清除剂c-PTIO和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME对绿豆(Vigna radiata L.)下胚轴插条生根的影响,并对不定根发生期间插条基部NO和NADPH-黄递酶的时空变化进行了检测。所试浓度SNP均明显促进下胚轴不定根发生。分别在插条切取后24 h和36 h于其基部维管束之间检测到NADPH-黄递酶(NOS标记酶)阳性反应和NO荧光,根原基也于48 h在相同位置出现,并于60 h进一步伸长。48-60h期间,NADPH-黄递酶的阳性反应及NO荧光有增强趋势,并主要分布在不定根分生组织中。L-NAME既减弱NADPH-黄递酶的阳性反应和NO荧光,也延缓不定根发生;而c-PTIO对NO荧光及不定根发生均有抑制作用。上述结果证明:NO在不定根发生及发育过程中有重要作用,而且此过程中的NO很可能由类似的NOS催化产生。     

两种软体动物神经系统一氧化氮合酶的组织化学定位

运用一氧化氮合酶(NOS)组织化学方法研究了软体动物门双壳纲种类中国蛤蜊和腹足纲种类嫁Qi神经系统中NOS阳性细胞以及阳性纤维的分布。结果表明：在蛤蜊脑神经节腹内侧,每侧约有10-15个细胞呈强NOS阳性反应,其突起也呈强阳性反应,并经脑足神经节进入足神经节的中央纤维网中;足神经节内只有2个细胞呈弱阳性反应,其突起较短,进入足神经节中央纤维网中,但足神经节中,来自脑神经节阳性细胞和外周神经系统的纤维大多呈NOS阳性反应;脏神经节的前内侧部和后外侧部各有一个阳性细胞团,其突起分别进入后闭壳肌水管后外套膜神经和脑脏神经索。脏神经节背侧小细胞层以及联系两侧小细胞层的纤维也呈NOS阳性反应。嫁Qi中枢神经系统各神经节中没有发现NOS阳性胞体存在;脑神经节、足神经节、侧神经节以及脑—侧、脑—足、侧—脏连索中均有反应程度不同的NOS阳性纤维,这些纤维均源于外周神经。与已研究的软体动物比较,嫁Qi和前鳃亚纲其它种类一样,神经系统中NO作为信息分子可能主要存在于感觉神经。而中国蛤蜊的神经系统中一氧化氮作为信息分子则可能参与更广泛的神经调节过程。     

NO和NADPH-黄递酶在绿豆下胚轴不定根发生和发育过程中的变化

研究了一氧化氮(NO)供体普钠(SNP)、一氧化氮清除剂C-PTIO和一氧化氮合酶(NOS)抑制L-NAME对绿豆(Vigna radiataL.)下胚轴插条生根的影响.并对不定根生期间手条基部NO 和NADPH-黄递酶的时空变化进行了检测.所试浓度SNP均明显促进下胚轴不根发生.分别插条切取后24h和36h于其基部维管束之间检测到NADPH-黄递酶(NOS标记酶)阳性反应和NO荧光,根原基也于48h在相同位置出现,并于60h进一步伸长.48~60h期间,NADPH、黄递的阳性反应及NO荧光有增强趋势,并主要分布在不定根分生组织中.L-NAME既减弱NADPH-黄递酶的阳性反应和NO荧光,也延缓不不定根发生;而c-PTIO对NO荧光及不定根生均有抑制作用.上述结果证明:NO在不定根发生及发育过程中有重要作用,而且此过程中的NO很可能由类似的NOS催化产生.     

牛蛙视网膜诱导型一氧化氮合酶免疫组化定位

用免疫组织化学方法研究了诱导型一氧化氮酶（iNOS)在牛蛙视网膜中的表达。结果显示,在正常状态视网膜中,无长突细胞呈弱阳性反应;节细胞层、双极细胞,水平细胞和光感受器内段呈阴性反应,在暗适应状态下,神经节细胞,内核层的无长突细胞呈强阳性反应;一些双极细胞,水平细胞和光感受器内段呈弱阳性反应,提示NO主要在暗适应状态下参与视网膜的信息传递过程。     

柞蚕幼虫期神经系统一氧化氮合酶的NADPH-d组织化学

运用NADPH-d组织化学整体染色方法研究柞蚕Antheraea pernyi Gu rin-Meneville幼虫神经系统中一氧化氮合酶阳性细胞的分布、数量及形态特征。结果表明,柞蚕各龄期幼虫中枢神经的脑及各神经节中都有一氧化氮合酶阳性反应,阳性神经元根据其形态大小和染色特性可分为A,B,C3种类型:A型细胞沿神经节中线分布,阳性反应较强,胞体长径约30~70μm,各神经节中的数量恒定。B型细胞多分布于神经节周边部分,阳性反应较弱,胞体长径约8~20μm,各神经节中的数量变化较大,随着龄期增加有减少的趋势。C型细胞分布于咽下神经节和第8腹神经节,在3种细胞中阳性反应最强,胞体长径约16~50μm。     

NADPH-Diaphorase-Stained Neurons after Experimental Epilepsy in Rats

The aim of this study was to determine the neuronal participation of nitric oxide (NO) in experimental epilepsy. To reach this objective, we established the amount of cells presenting nitric oxide synthase (NOS) and the amygdaline concentrations in the -arginine–nitric oxide synthesis pathway. A group of fully epileptic rats, induced by the kindling procedure and that had reached at least 10 generalized seizures, was studied. We evaluated behavioral stages, electroencephalographic activities, and histochemical NOS-positive cells and carried out high-pressure liquid chromatography (HPLC) determinations of arginine, citrulline, and glutamic acid. Our results showed that behavioral and electrographic frequency, and duration of epileptic activities, were increased during the kindling process. Image processing system of NOS cells showed two types of intensities in cell stains in hippocampus, caudate-putamen, and amygdala. When we independently counted the two types of NOS stain cells, a selective increase in the number and density of weak-stained cells was observed, while dark-stained cells did not change in the studied structures. Additionally, arginine, citrulline, and glutamic acid concentrations in amygdala increased in kindled animals. The differential and specific increase in the stained cells expressing the nitric oxide synthase, as well as the increase in concentrations of the -arginine–nitric oxide pathway in amygdala, suggested a relationship with the progressive augmentation in the electrophysiological hyperactivity characteristic of generalized epilepsy.     

尾加压素对新生大鼠心肌细胞一氧化氮合成的影响

应用半定量逆转录－多聚酶链反应法,观察尾加压素（urotensin Ⅱ,UⅡ）对培养的新生SD大鼠心肌细胞内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS)mRNA表达的影响,并测定UⅡ对心肌细胞内一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS)活性和一氧化氮（nitric oxide,NO)释放的影响。结果显示：UⅡ抑制培养的新生大鼠心肌细胞eNOS mRNA表达、抑制NOS的活性及NO释放;0.1μmol/L浓度的UⅡ呈时间依赖性抑制心肌细胞NOS的活性及NO生成。上述实验结果提示UⅡ的心血管作用可能与NO合成系统有关。     

东方扁虾卵子发生的超微结构

根据卵细胞的形态、内部结构特征及卵母细胞与滤泡细胞之间的关系,东方扁虾的卵子发生可划分为卵原细胞、卵黄发生前卵母细胞、卵黄发生卵母细胞和成熟卵母细胞等四个时期。卵原细胞胞质稀少,胞器以滑面内质网为主。卵黄发生前卵母细胞核明显膨大,特称为生发泡;在靠近核外膜的胞质中可观察到核仁外排物。卵黄发生卵母细胞逐渐为滤泡细胞所包围;卵黄合成旺盛,胞质中因而形成并积累了越来越多的卵黄粒。东方扁虾卵母细胞的卵黄发生是二源的。游离型核糖体率先参与内源性卵黄合成形成无膜卵黄粒。粗面内质网是内源性卵黄形成的主要胞器。滑面内质网、线粒体和溶酶体以多种方式活跃地参与卵黄粒形成。卵周隙内的外源性物质有两个来源:滤泡细胞的合成产物和血淋巴携带、转运的卵黄蛋白前体物。这些外源性物质主要通过质膜的微吞饮作用和微绒毛的吸收作用这两种方式进入卵母细胞,进而形成外源性卵黄。内源性和外源性的卵黄物质共同参与成熟卵母细胞中富含髓样小体的卵黄粒的形成。卵壳的形成和微绒毛的回缩被认为是东方扁虾卵母细胞成熟的形态学标志。       

人胎胃壁内NOS阳性神经元发育的研究

研究用NADPH-d组织化学法对第3个月胎龄至足月人胎胃壁内NOS阳性神经元的分化,迁移和生长发育进行了观察。结果表明：第5个月龄时,肌层神经节处的圆形细胞出现一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS)阳性反应。第6个月龄时,NOS阳性细胞分化演变成NOS阳性神经细胞,细胞呈圆形或椭圆形,核大,细胞质极少,由细胞发出短小的6个月龄时,NOS阳性细胞分化演变成NOS阳性神经细胞,细胞呈圆形或椭圆形,核大,细胞质极少,由细胞发出短小的突起,有部分NOS阳性细胞分化演变成梭形的NOS阳性神经细胞,呈条索状排列和粘膜下层延伸,吸的到达粘膜层,在粘膜层形成网状细胞,第7个月龄时,神经元细胞明显增大,细胞质增多,染色加深,在肌层形成神经节,神经节细胞突起投射到整个肌层,第8-10个月龄时,肌层和粘膜下层神经元日趋成熟,细胞质增多,染色强度加深,肌层神经纤维分布密度增加,大多数神经纤维增粗,有的呈弹簧样弯曲,其走向与肌纤维长轴平行。结果提示;人胎胃壁内NOS阳性神经元来源于胚胎早期肌层神经节处的圆形细胞,通过分化,生长发育形成成熟的NOS阳性神经元。     

一氧化氮合酶的遗传、生理研究进展

一氧化氮具有广泛的生理功能,哺乳动物体内的NO是由NO合酶(NOS)氧化L-精氨酸而合成的,合成后的NO迅速跨膜扩散释放,NO合成失调能介导多种疾病。催化NO生物合成的NOS有三种亚型:神经元型NOS(nNOS)、内皮型NOS(eNOS)和诱导型NOS(iNOS),目前,人的三型NOS已纯化并且已分子克隆成功,对一氧化氮合酶的遗传研究确认了NOS家族的基因结构和染色体定位。     

胰岛素促进血管内皮细胞产生一氧化氮的实验研究

目的：探讨胰岛素对血管内皮细胞增殖、NO产生和NOS基因表达的影响。方法：培养牛主动脉内皮细胞,测定培养上清液中NO氧化产物NO2^－的水平并应用定量RT－PCR技术检测内皮细胞NOS mRNA的表达水平。结果：①胰岛素对大血管内皮细胞无细胞毒作用,也不影响细胞增殖;②在1－15μg/ml浓度范围内,胰岛素加强内皮细胞释放NO,且呈剂量依赖的方式,NOS特异性抑制剂L－NAME可阻抑之;③胰岛素轻度增加NOS mRNA表达水平,但无统计学意义。结论：胰岛素既不影响大血管内皮细胞增殖,也不影响内皮细胞NOS mRNA表达水平,但以剂量依赖的方式加强内皮细胞产生NO,推测其诱导NO产生的机制可能是通过酶活性的诱导,加速NO的合成。     

Ultrastructural localization of NADPH-diaphorase and colocalization of nitric oxide synthase in endothelial cells of the rabbit aorta

This is the first report on the ultrastructural pattern of distribution of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate diaphorase (NADPH-d) in endothelial cells, using the rabbit aorta, and its colocalization with the neuronal isoform (type I) of nitric oxide synthase. About 30% of the endothelial cells showed a positive reaction for NADPH-d compared to about 6% for nitric oxide synthase immunoreactivity. Simultaneous double histochemical-immunocytochemical labelling procedures indicate that all of the cells displaying nitric oxide synthase-positive reactivity also contained NADPH-d; the remainder of NADPH-d-positive endothelial cells were negative for this isoform of nitric oxide synthase. Nitric oxide synthase-immunogold labelling was mostly associated with free ribosomes, while NADPH-d activity was distributed largely in patches in the cytoplasm and in association with the cell membrane.     

白细胞介素—10对血管一氧化氮／一氧化氮合酶系统的影响

为探讨抗炎因子－－白细胞介素－10（IL－10）对大鼠主动脉一氧化氮（NO）／一氧化氮合酶（NOS）系统的影响,应用Griess试剂、^3H－瓜氨酸生成及蛋白免疫印迹杂交等方法,测定IL－10孵育对血管NO释放、NOS活性及表达的影响。结果发现细菌脂多糖（LPS）呈浓度领带性地激活诱导型NOS（iNOS）,促进NO生成。IL－10（10^-10-10^-8g/ml）呈浓度依赖性地上调内皮型NOS（eNOS）蛋白表达及其活性,但对iNOS活性及表达无明显影响,IL－10（10^-9-10^-8g/ml）显著抑制10μg/ml LPS诱导的NO生成和iNOS激活;而高浓度IL－10（10^-7g/ml）则上调iNOS的活性,对eNOS蛋白的表达知活性无明显影响。因此IL－10对NO／NOS系统具有双重影响,一方面可抑制炎症介质诱发的作为炎性物质的iNOS的表达及激活,另一方面可上调内皮源扩血管物质NO的释放。     

黄胫小车蝗卵子发生及卵母细胞凋亡的显微观察

对黄胫小车蝗(Oedaleus infernalis)卵子发生过程和卵母细胞凋亡进行显微观察。结果表明,黄胫小车蝗卵子发生可明显分为3个时期10个阶段,即卵黄发生前期、卵黄发生期和卵壳形成期。第1阶段,卵母细胞位于卵原区,经历减数第一次分裂;第2阶段,卵母细胞核内染色体解体成网状,滤泡细胞稀疏地排列在卵母细胞周围;第3阶段,滤泡细胞扁平状,在卵母细胞周围排成一层;第4阶段,滤泡细胞呈立方形排在卵母细胞周围;第5阶段,滤泡细胞呈长柱形排在卵母细胞周围,滤泡细胞之间、滤泡细胞与卵母细胞之间出现空隙;第6阶段,卵母细胞边缘开始出现卵黄颗粒;第7阶段,卵母细胞中沉积大量卵黄,胚泡破裂;第8阶段,滤泡细胞分泌卵黄膜包围卵黄物质;第9阶段,滤泡细胞分泌卵壳;第10阶段,卵壳分泌结束,卵子发育成熟。卵母细胞发育过程中的凋亡发生在卵黄发生前期,主要表现为滤泡细胞向卵母细胞内折叠,胞质呈团块状等特征。