柱前衍生反相高效液相色谱法测定绞股蓝茶叶中17种游离氨基酸含量

建立2,4-二硝基氟苯柱前衍生化-反相高效液相色谱法测定绞股蓝茶叶中17种游离氨基酸的含量。以Phenomenex Gemini NX C18(4.6mm×250mm,5μm)为分析柱,采用梯度洗脱,流动相A为0.05mol·L-1乙酸钠(pH=6.4,含0.1%N,N-二甲基甲酰胺),流动相B为乙腈-水(1∶1,v/v),检测波长为360nm,柱温35℃;经方法学考察,该方法具有良好的稳定性和重现性。测定结果表明,绞股蓝茶叶中17种游离氨基酸总量为39.79mg·g-1,其中人体必需氨基酸占游离氨基酸总量的36.57%。从氨基酸含量考虑,绞股蓝茶叶具备一定的开发利用价值。     

福建产太子参氨基酸成分分析

采用日立L8800全自动高速氨基酸分析仪,从福建柘荣产太子参中检出18种氨基酸,全氨基酸总质量分数为77.7g.kg-1,其中精氨酸(Arg)高达20.8 g.kg-1;此外,还发现太子参中含有丰富的γ-氨基丁酸,质量分数高达16.5 g.kg-1。采用RT-HPLC(柱前衍生-反相液相色谱分离)检测质量分数为20.5 mg.kg-1,验证了HPCEC(离子交换色谱分离-柱后衍生法)氨基酸自动分析结果。     

柱前衍生化HPLC同时测定霍山石斛中13种游离氨基酸含量

为建立柱前衍生化HPLC同时测定霍山石斛中13种游离氨基酸的方法。采用Waters XBridge C_(18)色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm);流动相为0. 1 mol/L醋酸钠缓冲液-乙腈∶水(4∶1),梯度洗脱;流速1. 0 mL/min,柱温35℃;检测波长254 nm。在该色谱条件下霍山石斛中13种游离氨基酸分离较好,平均加样回收率为92. 7%~104. 3%,RSD 2. 5%。该方法简便、准确、重现性好,适用于霍山石斛中13种游离氨基酸的同时测定。     

不同产地滇重楼须根中氨基酸类成分的UPLC分析与评价

建立柱前衍生-超高效液相色谱法测定滇重楼须根中15种氨基酸含量,对不同产地样品进行分析评价。采用UPLC-PDA仪器,使用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm),流动相A为0.1 mol/L乙酸钠溶液(冰醋酸调节pH=6.5)-乙腈(97∶3),B为乙腈-水(4∶1),梯度洗脱,检测波长254 nm,流速0.2 mL/min。滇重楼须根中检出15种氨基酸线性关系良好(r≥0.999 7),平均回收率RSD均小于3.00%。各产地均以天门冬氨酸和谷氨酸含量为最高,栽培滇重楼须根氨基酸平均含量高于野生品。本研究建立了分析评价滇重楼须根中氨基酸类成分的方法,为滇重楼须根的资源开发与利用提供科学依据。     

应用不同柱前衍生法于HPLC测定西洋参中的氨基酸

通过微波水解衍生方法与柱前衍生方法测定西洋参中的氨基酸成分并进行对比,评价两种方法使用的合理性与应用价值。通过微波水解衍生及柱前衍生两种不同的衍生方法测定同一来源的西洋参药材中的氨基酸成分含量,比较两种实验方法的操作性、准确合理性及测定氨基酸成分含量。两种实验方法平均回收率及相对标准偏差为:柱前衍生法回收率90.1%~101.7%、RSD 0.9%~3.9%,微波水解衍生法90.1%~113.1%、RSD 1.1%~9.5%(除个别氨基酸在酸水解过程中易被破坏)。柱前衍生法主要测定游离氨基酸的含量,其中西洋参根中的精氨酸占总量的59%。微波衍生法明显缩短了氨基酸分析时间,实验操作上体现显著优势。柱前衍生法准确、可靠,测定产物稳定。测定西洋参干燥根中游离的精氨酸含量占游离氨基酸总量的一半以上,含量最高,为西洋参的化学成分与药理作用的进一步研究提供参考依据。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定马尾松(Pinus massoniana )针叶中γ-氨基丁酸和17种游离氨基酸

建立了自动在线柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定γ-氨基丁酸(GABA)和17种游离氨基酸含量的方法.以邻苯二甲醛-9-芴基甲基氯甲酸酯(OPA-FMOC)为衍生试剂进行衍生,Agilent Hypersil AA-ODS-C18色谱柱分离,梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,在19min内分离测定了马尾松苗木针叶中GABA 和17种游离氨基酸的含量.该方法测定氨基酸的回收率高于90.1%,精密度和重现性均较好(相对标准偏差为0.21%～2.81%),经测定,发现马尾松被马尾松毛虫取食后,所测18种氨基酸总量明显降低,从418.3μg · g-1降低到310.4μg · g-1鲜重.     

伊枯草菌素A发酵过程中游离氨基酸的HPLC分析

建立一种快速、高效测定游离氨基酸含量的异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生高效液相色谱法,并利用此方法分析检测iturin A发酵过程中游离氨基酸的动态变化。以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,采用Venusil-AA(4.6 mm×250 mm,5μm)氨基酸分析专用柱,并优化HPLC检测色谱条件。结果表明:梯度洗脱程序、流动相pH值、色谱柱温对分析时间、色谱峰分离及峰型具有重要影响。当最优色谱条件为:流动相A为0.1 mol/L无水乙酸钠缓冲溶液(pH6.4±0.1)-乙腈(66∶5),流动相B为乙腈-水(4∶1),流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,色谱柱温40℃,梯度程序洗脱,35 min内可完全分离16种氨基酸,且各氨基酸在一定浓度范围内线性关系良好(R2均大于0.9986),加标回收率在83.84%-108.02%之间,RSD值均小于2.77%。该方法耗时短、操作简便、准确可靠,具有良好的精密度和稳定性。通过此方法研究分析伊枯草菌素A发酵过程中各游离氨基酸含量变化规律,发现其氨基酸浓度变化规律大致分为三类。     

反相高效液相色谱法测定血清中γ-氨基丁酸

建立一种高灵敏度的氯甲酸芴甲酯柱前衍生荧光检测反相高效液相色谱法测定血清中γ-氨基丁酸的方法.内标为己氨酸, 固定相为Shim-Pack CLC-ODS(M), 4.6 mm×150 mm, 填充料为5μm; 流动相采用二元梯度洗脱, A相为0.05 mol/L醋酸钠缓冲液∶水∶四氢呋喃∶冰乙酸(250∶100∶15∶2.2), B相为乙腈∶甲醇(4∶1).系统研究了pH值、反应时间、离子强度及衍生化试剂用量对衍生化反应的影响, 确定最佳反应条件和最佳色谱条件.方法的精密度为批内变异系数＜4.6%,批间变异系数＜6.1%;最低检出限(信噪比＝2)为3.1 nmol/L;线性范围为50～1000 nmol/L, γ²＝0.9992;平均回收率为97.1%.     

两种柱前衍生反相高效液相色谱法测定血液和尿液中游离氨基酸

建立以PITC法和AQC法为柱前衍生试剂测定血液和尿液中游离氨基酸含量的测定方法。采用Waters-e2695操作系统,色谱柱为Shim-vp,ODS(250mm×4.6mm,5μm)(日本,岛津公司),以甲醇/乙腈/水和醋酸钠溶液(pH 6.5)为流动相,梯度洗脱。分别采用紫外和荧光检测器对血液和尿液中游离氨基酸进行含量测定。结果显示,两种衍生化方法灵敏度好、分离度高,具有良好的线性范围(r>0.990 0),准确度高(平均回收率为75.1%～127.0%),进样精密度好(RSD为0.12%～3.42%)。PITC法在尿液中游离氨基酸含量测定中显示了良好的测试准确性;而AQC法测定尿液中组氨酸、苏氨酸、脯氨酸超出线性范围,需要对尿样的前处理进行深入研究。     

传统藏药材波棱瓜的氨基酸分析

采用FDBN柱前衍生高效液相色谱法测定了藏药材波棱瓜中氨基酸的含量。结果表明,波棱瓜中氨基酸总量为189.4g·kg-1,其中8种必需氨基酸含量占氨基酸总量的33.47%。     

柱前衍生氨基酸的高效液相色谱分析

综述了目前柱前衍生氨基酸高效液相色谱分析技术的最新进展和现状,分别详细介绍了应用最广、技术最先进的几种柱前衍生氨基酸分析技术和方法。     

2种HPLC-柱后衍生化-荧光检测法测定远志中黄曲霉毒素的比较

对远志中测定黄曲霉毒素的2种柱后衍生化方法(碘衍生化和光化学衍生化)进行分析比较。样品经过免疫亲和柱净化，HPLC-柱后衍生化-荧光检测器检测；采用C₁₈(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱，荧光检测。柱后衍生化系统：(1)碘衍生化法，以甲醇-乙腈-水(25∶20∶55)为流动相；衍生溶液为0.05%碘溶液，流速为0.3 m L·min^-1，衍生反应温度为70℃；(2)光化学衍生化法，以甲醇-乙腈-水(35∶15∶50)为流动相。碘衍生化方法中，黄曲霉毒素B₂、G₂在3.8～19 pg范围内线性关系良好，B₁在10.4～52 pg范围内线性关系良好，G₁在10.8～54 pg范围内线性关系良好；在光化学衍生化方法中，黄曲霉毒素B₂、G₂在1.9～45.6 pg范围内线性关系良好，B₁在5.2～124.8 pg范围内线性关系良好，G₁在5.4～129.6 pg范围...     

异硫氢酸苯酯法(PITC)分析氨基酸

<正> 自从1958年Moore等人建立氨基酸测定方法以来,氨基酸分析方法发展迅速,日新月异。除采用阳离子交换柱,茚三酮柱后反应测定氨基酸方法外,70年代起,各种采用柱前衍生,反相色谱法分离测定氨基酸方法相继问世,为氨基酸分析开辟了新的领域。异硫氢酸苯酯(PITC)法作为其中一种,以其灵敏度高(可检测,1Pmal),分析速度快(水解液为10分钟,生理体液40～60分     

反相高效液相色谱用于几种氨基酸的定量分析

采用高效液相色谱法等浓度的洗脱天门冬氨酸、谷氨酸、天门冬酰胺、谷氨酰胺,分析氮代谢中几个主要氨基酸。由邻苯二甲醛(OPT)和β-巯基乙醇柱前衍生反应,在14分钟内可同时测定四种氨基酸。测试样品经预处理。生成荧光性的衍生物1-硫代烃基-2-烃基异吲哚。反应是瞬时的,其荧光量子     

云南会泽引种玛卡中氨基酸组成与含量对营养与风味的影响

采用柱前衍生-液相色谱法(RP-HPLC)对云南会泽引种玛卡中水解氨基酸与游离氨基酸的种类与含量进行了测定。通过对玛卡中水解氨基酸的分析,发现玛卡中含有全部18种氨基酸,人体所必需的8种氨基酸占总氨基酸比例为36.75%,表明玛卡是具有较高营养价值的农作物,人体所必需的氨基酸中苯丙氨酸、络氨酸、蛋氨酸和半胱氨酸含量不足,影响了其整体营养价值;对影响感官的游离氨基酸进行分类,研究了各类味觉氨基酸对玛卡风味的影响。     

条斑紫菜(Porphyra yezoensis)游离氨基酸组成分析

采用邻苯二甲醛/9-氯甲酸芴甲酯(OPA/FMOC)柱前衍生反相高效液相色谱法(RP-HPLC),对江苏南通海区栽培的12个条斑紫菜(Porphyra yezoensis)样品游离氨基酸组成进行分析.结果显示:供试样品游离氨基酸总量在19.82～38.91 mg·g-1之间,共检出16种游离氨基酸,其中Ala、Arg、...     

AccQ·Tag法测定绿豆蛋白酶解液中氨基酸含量

采用柱前衍生高效液相色谱法(AccQ·Tag法)同时测定17种氨基酸,氨基酸浓度在10～100μmol·L-1(胱氨酸浓度在5～50μmol·L-1)时,其峰面积和氨基酸浓度的线性相关系数均在0.99以上,17种氨基酸的加标回收率在92.1%～103.7%之间,用此法测定了绿豆蛋白酶解液氨基酸的含量,取得了满意的结果。     

青海循化线辣椒中氨基酸含量分析

采用柱前衍生高效液相色谱法对循化线辣椒中精氨酸、丙氨酸、丝氨酸等17种氨基酸的含量进行测定。结果表明:线辣椒所含17种氨基酸中,必需氨基酸含量合理,利于人体吸收。     

贵州五种野山茶种子氨基酸及脂肪酸成分含量的研究

采用高效液相色谱(HPLC)和氨基酸比值系数法,对贵州五种野山茶种子氨基酸和主要脂肪酸成分含量进行了研究。结果表明:(1)五种野山茶种子中均含有13种氨基酸,不同种类的氨基酸总量差异极显著,必需氨基酸和非必需氨基酸含量的差异显著(P0.01,P0.05),且第一限制性氨基酸含量不同;长柱红山茶(Camellia longistyla)和贵州红山茶(C.kweichouensis)的氨基酸总量及人体必需氨基酸含量分别为33.01、13.29和26.33、10.38 mg·g~(-1)。(2)不同种类种子的千粒重、含油率、含水率皆呈显著差异(P0.01,P0.05),种子含油率与不饱和脂肪酸含量显著正相关(R=0.556、P0.05),种子不饱和脂肪酸含量与棕榈酸、饱和脂肪酸含量极显著负相关(R=-0.791,P0.01;R=-0.776,P0.01),其中长柱红山茶和贵州红山茶种子的含油率和不饱和脂肪酸含量分别为43.93%、71.89%和43.91%、71.85%。(3)小黄花茶(C.luteoflora)、皱叶瘤果茶(C.rhytidophylla)、贵州红山茶、长柱红山茶、美丽红山茶(C.delicata)所含必需氨基酸与总氨基酸比值分别为44.9、43.3、39.0、40.9、33.8,必需氨基酸与非必需氨基酸比值分别为81.6、76.4、64.0、67.4、51.0,除了美丽红山茶的比值系数偏低外,其余4种均达到了WHO/FAO的理想蛋白质标准,种子蛋白质均具有较高的营养价值,其中长柱红山茶和贵州红山茶的种子含油脂质量等级指标接近我国现行茶油标准(GB11765—2003),可以作为重要的优质油茶种质资源加以开发利用。     

反相高效液相色谱法测定血清中γ—氨基本酸

建立一种高灵敏度的氯甲酸芴甲酯柱前衍生荧光检测反相高效相色谱法测定血清中γ－氨基丁酸的方法,内标为己氨酸,固定相为Ｓｈｉｍ－ＰａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ（Ｍ）,４．６ｍｍ＊１５０ｍｍ,填充料５μｍ;流动相采用二元梯度洗脱,