胡黄连药材的指纹图谱研究

利用HPLC—DAD—MS法,研究胡黄连的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。采用C18色谱柱,甲醇-水（含0．1％的甲酸）梯度洗脱;流速为1．0mL／min,检测波长290nm;柱温为室温。对不同产地的胡黄连药材进行指纹图谱分析,通过HPLC—MS技术指认指纹图谱共有模式中共有峰的归属。比较5种产地胡黄连药材指纹图谱确定了16个共有峰,并指认了含量超过50％的胡黄连苷Ⅱ和苷Ⅰ。发现产地不同,其指纹图谱有差别。试验方法和结果具有较好的准确性和稳定性,可以为胡黄连药物研究提供参考资料,对胡黄连药材的质量评价具有重要的参考价值。     

肿节风药材HPLC指纹图谱研究

采用反相高效液相色谱法建立了肿节风药材的指纹图谱,色谱柱为Hypersil C18(4.6 mm × 250 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行二元梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温35 ℃,检测波长300 nm.对10批不同产地的肿节风药材进行了检测,并应用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"生成了共有模式色谱图,共有16个色谱峰,各色谱峰分离情况良好.精密度、重复性和稳定性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%,符合指纹图谱要求.该方法简便,可靠,精密度、稳定性和重复性良好,可用于肿节风药材的质量评价.用该方法比较了肿节风药材不同部位指纹图谱的差异,为最佳用药部位的确定提供了理论依据.     

连钱草药材的高效毛细管电泳指纹图谱研究

建立了不同产地连钱草药材的高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱,并进行了比较。连钱草药材采用体积分数75%乙醇蒸馏提取;采用毛细管区带电泳法制定指纹图谱,电泳条件如下:未涂层融熔石英毛细管50μm I.D.×375μm O.D.(总长62 cm,有效长度53.5 cm),电泳缓冲液为含体积分数15%乙腈的50 mmol.L-1硼酸缓冲液(pH9.2),检测波长278 nm,操作电压25 kV,柱温25℃;以对乙酰氨基酚为参照物,建立了连钱草药材的数据化指纹图谱(相对迁移时间和相对峰面积)。结果表明:5种连钱草药材(4个产地和对照药材)具有16个共有指纹峰,不同产地连钱草药材指纹图谱的峰重叠率都低于60.3%,共有峰相对峰面积及8强峰均差异较大;连钱草药材的主要化学成分种类和质量分数均因产地不同而有差异;HPCE指纹图谱法具有较好的稳定性、精密度和重现性,简便,快速,可作为连钱草药材的质量控制方法。     

叶下珠药材HPLC指纹图谱的比较研究

采用反相高效液相色谱法,对叶下珠药材不同产地、不同采收期、不同部位指纹图谱进行测定和比较分析,并与中成药叶下珠胶囊的HPLC指纹图谱进行了比较研究。结果显示:(1)建立了叶下珠药材的HPLC特征指纹图谱,标定18个共有峰,利用对照品指认4个峰;11批(来源地不同)叶下珠样品的HPLC图谱相似度(相合系数,均值)在0.89~0.99之间。(2)7批不同采收期的叶下珠药材的HPLC指纹图谱相似度在0.94以上,各共有峰的峰面积大多随生长期而增加,至10月5日达到最高,建议叶下珠药材应于每年的10月上旬进行采收。(3)不同部位叶下珠药材HPLC指纹图谱相似度分析发现,叶、果的相似度较高(0.98~0.99),根、茎的相似度较低(0.86~0.87),说明根、茎中各成分含量较低,建议采收叶下珠药材的地上部分即可。(4)比较叶下珠胶囊和叶下珠药材的指纹图谱,发现二者的化学成分非常相似,但峰面积差异较大,其差异可能是由于加工过程所致。该研究所建立的HPLC指纹图谱分析方法简便、重现性好,可用于叶下珠药材及中成药的鉴定与质量评价。     

不同产地水飞蓟药材HPLC指纹图谱研究

目的建立水飞蓟药材的HPLC指纹图谱分析方法,并对不同产地水飞蓟药材进行指纹图谱比较研究。方法采用反相高效液相色谱法,Shimadzu C18(150 mm×4.6 mm)为色谱柱,流动相为甲醇-水-冰醋酸(48:52:1),流速:1.0 mL/min,检测波长为287 nm,柱温40℃,进样量10μl。对水飞蓟药材的指标成分水飞蓟宾进行了定性定量,并以相似度鉴别药材质量。结果建立了水飞蓟药材的HPLC指纹图谱,标定了12个共有峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求,经相似度计算11个不同产地药材之间的相似性均高于0.944。结论本法简便准确、结论可靠,可用于不同产地水飞蓟药材的指纹图谱测定和质量评价,为有效控制水飞蓟药材的内在质量提供了实验依据。     

基于HPLC指纹图谱和含量测定的不同产地半边莲药材质量评价研究CSCD

建立半边莲药材高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并对有效成分地奥司明和蒙花苷的含量进行测定,为不同产区半边莲药材的质量评价提供参考。HPLC指纹图谱的建立采用Thermo Acclaim C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液,流速为1.0 mL/min,梯度洗脱,检测波长为340 nm,柱温为35℃,进样量为10μL;通过质谱分析结合对照品比对,对共有峰进行鉴定;借助中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版本)对指纹图谱进行相似度评价,通过聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别式分析(OPLS-DA)比较不同产区半边莲药材的质量差异;并对半边莲药材地奥司明和蒙花苷的含量进行测定。结果显示,18批半边莲药材指纹图谱具有11个共有峰,质谱分析和对照品比对,共确证4个共有峰,分别为木犀草素7-二葡萄糖苷酸、海常黄苷、地奥司明和蒙花苷;与mzCloud标准数据库比对,对另外4个共有峰进行了结构预测。相似度评价结果显示,河南、安徽两个产区的半边莲药材较为相似,另外4个产区的半边莲药材相似度较为一致。HCA和PCA均将不同产区的半边莲药材分为两类,其中河南、安徽两个产区的样品归为一类,湖北、贵州、江西和湖南产区的样品归为另一类,结果与相似度评价结果基本一致。OPLS-DA发现7个差异性标志物,根据VIP值排序,分别为峰2>峰1>峰10>峰11>峰3>峰8>峰5。含量测定结果显示,3批河南产区和安徽产区的半边莲药材地奥司明和蒙花苷的含量明显高于其他产区。该方法可以有效评价不同产区半边莲药材的质量差异性,为其质量控制和药材选购提供参考。     

广西产拳卷地钱HPLC指纹图谱研究

为了对广西产拳卷地钱药材进行质量控制,采用HPLC指纹图谱法对8批药材进行了研究,色谱条件为安捷伦ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(B)-0.1%磷酸水溶液(D),梯度洗脱,检测波长为230 nm,柱温为25℃。结果表明:建立了参考指纹图谱,共有峰6个,8批广西产拳卷地钱药材HLPC指纹图谱相似度均大于0.75,其精密度、重复性、稳定性实验均符合指纹图谱技术要求。HPLC指纹图谱分析,数据稳定可靠,方法简便高效,可为广西产拳卷地钱质量评价提供参考。     

化学模式识别结合HPLC指纹图谱的僵蚕质量评价研究

建立HPLC指纹图谱结合化学模式识别技术对僵蚕药材进行质量评价。采用Insertsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长365 nm,流速0.8 mL/min,进样量10μL,柱温30℃。采用相似度评价、聚类分析、主成分分析等化学模式识别方法,对不同来源的20批僵蚕药材进行质量分析和评价。建立的指纹图谱标定了9个共有峰,指认了5个峰,1号峰为芦丁,2号峰为金丝桃苷,4号峰为紫云英苷,6号峰为槲皮素,7号峰为山奈酚,并将9个共有峰峰面积与其性状、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物及白僵菌素含量进行相关性分析。结果表明本研究建立的僵蚕HPLC指纹图谱结合化学模式识别的方法可靠、易行,方法重复性好、专属性强,与药材性状、总灰分、浸出物及白僵菌素含量等质控指标均有一定的相关性,为后续僵蚕药材的质量控制提供依据和参考。     

吉林12种蒲公英HPLC指纹图谱研究

通过比较吉林产不同种蒲公英HPLC指纹图谱,探讨吉林产蒲公英HPLC指纹图谱的特点,为蒲公英药材的质量控制提供理论参考。采用HPLC方法,以Agilent Extend-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以甲醇-0.5%冰醋酸水溶液梯度洗脱;检测波长为323 nm,流速为1.000 mL·min-1,柱温35℃,进样量为20μL,检测了12种吉林产不同种类蒲公英药材,确立了9个共有峰,建立了蒲公英对照指纹图谱,计算各被测样品的HPLC指纹图谱的整体相似度,并指认了绿原酸、咖啡酸、总黄酮3个特征峰,比较了上述成分在不同药材中的含量,定量结果表明,3种成分平均含量分别为0.027%、0.026%、0.128%。所建立的指纹图谱具有良好的精密度、重现性和稳定性,可作为吉林产蒲公英药材的质量控制标准。     

青海秦艽高效液相色谱指纹图谱的研究

利用高效液相色谱法建立了青海秦艽的色谱指纹图谱.色谱条件:K rom as il C18柱(250 mm×4.6 mm×5μm),甲醇∶磷酸水(0.04%)梯度洗脱,流速为1 mL/m in,检测波长222 nm.通过比较发现秦艽样品的13个主要共有峰,可作为鉴别秦艽药材的主要依据.对12批秦艽药材进行了相似度计算和聚类分析,结果表明,所建立的秦艽指纹图谱可用于秦艽药材的真伪鉴别和质量评价.     

银杏酚对5种蔬菜病原物的抑菌活性初探

银杏外种皮采用70%乙醇加热回流浸提得到含活性成分银杏酚的粗提物,用70%乙醚、5%Na₂CO₃、5% NaOH萃取分离,获得银杏酚;本实验采用气相色谱-质谱分析鉴定提取物为银杏酚。银杏酚对茄子白绢病菌抑制作用较强,EC₅₀为1.36 mg·mL^-1。     

银杏叶口腔崩解片的研制及质量评价

以明胶、甘露醇和阿司帕坦为矫味剂,以微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素和交联聚乙烯吡咯烷酮为崩解剂,采用直接压片法,制备银杏叶口腔崩解片,并测定了口感和体内外崩解时间,考察了硬度对崩解时间的影响。当明胶/甘露醇/阿司帕坦比例为1．5：1：0．1时,口感良好;当微晶纤维素／低取代羟丙基纤维素胶联聚乙烯吡咯烷酮的比例为9：1：2时,体内外崩解时间在60秒以内;当硬度在3～4kg时,崩解时间60秒以内。     

银杏提取物对大鼠肺缺血/再灌注损伤的保护作用

目的：观察银杏提取物（EGB）对大鼠体外循环肺缺血／再灌注损伤（I／R）的保护作用。方法：建立离体大鼠肺灌流模型．SD大鼠随机分成假手术组（Sham）、I／R组和EGB组,观察大鼠肺组织形态学改变、分别测定肺组织匀浆及灌流液中超氧化物歧化醇（SOD）、丙二醛（MDA）的含量、肺湿干重比（W／D）和平均肺动脉压（MPAP）。结果：HE染色显示EGB组肺损伤明显减轻、肺组织湿／干重比和MPAP显著低于I／R组：EGB组肺脏灌流液和组织匀浆中SOD的活性显著高于I／R组,MDA含量则显著低于I／R组。结论：EGB对大鼠肺I／R损伤具有保护作用。     

银杏外种皮提取物对芽孢杆菌生长的影响

用萃取法将银杏外种皮中的银杏酚酸成分提取出来,制成提取液。再用部分提取液乳化成乳化剂。采用液体生长抑制法和平皿培养抑制法分别对土壤中的细菌总量和芽孢杆菌进行抑菌试验。结果显示,在药浓度不断上升的情况下,相对应的细菌的存活率就越低。在液体生长抑制法中,芽孢杆菌菌悬液的OD值随药浓度的升高降低。在平皿培养法中,在药液浓度升高的情况下,土壤中细菌总量及芽孢杆菌总量受抑制程度加强。平皿培养法中用平皿表面涂布法要优于药敏纸片法。     

银杏叶提取物对豚鼠哮喘模型血红素氧合酶-1表达的影响

目的探讨银杏叶提取物(Egb761)对豚鼠哮喘模型血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响.方法 将30只豚鼠随机分为3组(n=10)(1)正常组;(2)哮喘组;(3)治疗组.测定全血一氧化碳血红蛋白(COHb)的百分比含量、气道阻力并观察气道壁嗜酸性粒细胞(EOS)浸润情况, 用免疫组织化学染色方法观察HO-1在豚鼠肺组织中的表达变化.结果各组气道上皮细胞HO-1阳性表达的平均吸光度分别为 0.170±0.020、0.707±0.058、0.397±0.034.哮喘组HO-1的表达水平显著高于正常组(P<0.01).治疗组HO-1的表达水平显著低于哮喘组(P<0.01). 结论银杏叶提取物能显著抑制哮喘豚鼠气道壁内上皮细胞HO-1的表达,提示银杏叶提取物抑制HO-1的表达可能是银杏叶提取物治疗哮喘的作用机制之一.     

银杏叶黄酮甙浸提工艺的研究

对黄酮含量偏低的银杏叶子进行浸提研究,确定浸提剂为50％～60％乙醇水溶液,液固比为8:1～6:1,浸提温度为60～70℃,浸提时间3～1h,两次。黄酮的浸提率在85％以上;选用A-1和A-2型树脂混合吸附,得到银杏叶提取物产品,黄酮含量26％～31％,得率为1.6％～1.9％。该工艺已用于中试生产,成本较低。     

不同状态银杏愈伤组织蛋白质电泳分析及电镜观察

通过对同一来源3种银杏愈伤组织中蛋白质、黄酮含量测定,蛋白质SDS-PAGE电泳分析,细胞超微结构观察等研究银杏不同状态愈伤组织的生长情况。结果表明,银杏的这3种愈伤组织代表愈伤组织细胞生长的3个阶段。绿色愈伤组织处于分生组织状态,细胞生长旺盛,蛋白质较多,蛋白质条带宽,细胞内物质丰富,但黄酮的含量并不是最高;微黄色愈伤组织细胞处于初生代谢向次生代谢转化的阶段,蛋白质含量开始减少,45.7、38.4、33.4kD的蛋白质开始减少,核膜不完整,淀粉含量较高,其黄酮含量高于绿色愈伤,属次生代谢的阶段;褐色愈伤组织蛋白质含量很低,条带数减少,有5条蛋白质条带消失,且黄酮的含量最低,细胞结构发生质壁分离现象,内含物解体,细胞核解体,是衰亡的主要特征。微黄色愈伤组织是获取高黄酮含量的最好材料。     

银杏开发造园模式的探讨

根据银杏生物学特性和生产栽培目的的不同以及目前银杏的生产状况,阐述了银杏开发的重要意义,概述了叶材兼用银杏园、果叶兼用银杏园、果材兼用银杏园的立地选择、栽培密度和抚育管理等方面的技术要求,分析了各类园的利弊,并对低效的银杏园提出了改造的建议。     

Changes in zinc levels and superoxide dismutase activities in the skin of acute, ultraviolet-B-irradiated mice after treatment with ginkgo biloba extract

Acute ultraviolet-B (UV-B) irradiation is known to act as an initiator in the formation of reactive oxygen species. These oxygen products are highly reactive and they are able to cause irreversible damage to cellular components. Oxygen free radicals are normally neutralized by very efficient systems in the body. These include antioxidant enzymes like superoxide dismutase (SOD). In a healthy subject, there is a balance between free radicals and the levels of antioxidants. In some pathological conditions such as oxidative stress, the level of antioxidants is significantly reduced. The skin contains relatively high levels of zinc (Zn), an essential element known to be a cofactor in some metabolic pathways. Zinc has also been reported to have antioxidant properties. In the present study, we investigated the effect of ginkgo biloba extract (Gbe), a potent free-radical scavenger, on UV-B-irradiated skin by measuring SOD activity and Zn levels in the skin, before and after treatment. The SOD activity was decreased after UV-B exposure, in comparison with the control group (p<0.05). After Gbe treatment, the SOD activity increased (p<0.05) as compared with the untreated UV-B irradiated group. The Zn levels changed in the same pattern as the SOD activity values.     

银杏外种皮提取物对病原菌﹙Cylindrocladium colhounii﹚的抑制作用

采用菌丝生长抑制法,研究了银杏外种皮3种不同提取物对病原菌（Cylindrocladium colhounii）的抑制作用并测定了这些提取物的MIC/MBC。结果表明,在相同实验天数内,抑菌效果（最小抑菌率）由高到低依次为银杏外种皮乙醇提取物（37.4%）、石油醚提取物（23.7%）和新鲜外种皮汁液（18.4%）。当提取物的浓度提升到一定程度时,三者的抑菌率均可达到100%;三种提取物的MIC/MBC分别为：86.25/86.25,172.5/276,293.25/345 mg·mL^-1。可见银杏外种皮具有明显抑制该病原菌生长的作用,且抑菌成分在乙醇中的溶解度较大。这为进一步研究该抑菌成分乃至生物农药的开发奠定了基础。