褪黑素抑制原代培养鸭肾上皮细胞c－fos的表达

本研究采用Ｆｏｓ蛋白免疫组化染色方法观察了胎牛血清对原代培养鸭肾上皮细胞ｃ─ｆｏｓ表达的刺激作用及褪黑素的阻断作用。以每一视野Ｆｏｓ染色阳性细胞的百分比为指标,每组实验观察１４至１７个视野。实验结果显示,正常对照组平均每视野Ｆｏｓ染色阳性细胞为４４．３１±２．７７％,胎牛血清刺激组为６３．０７±３．９３％,明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）,胎牛血清加１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ褪黑素组为３５．２９±３．２２％,明显低于单纯胎牛血清刺激组（Ｐ＜０．０１）,但与对照组无明显差异（Ｐ＞０．０５）。该结果表明褪黑素可以抑制原代培养鸭肾上皮细胞ｃ─ｆｏｓ表达。     

Fos蛋白在脑挫伤皮质和海马中表达的研究

目的探讨脑挫裂伤后Fos因蛋白在皮质和海马中表达的变化.方法取成年大鼠45只分为正常对照组、实验对照组和模型组.用Feemey's自由落体法将其中32只复制脑挫伤动物模型;脑挫伤后30min、1h、2h、4h、8h、12h、24h和48h,分别取脑;石蜡切片,免疫组织化学染色.结果正常对照组脑内无Fos阳性细胞;实验对照组局部皮质有Fos微弱表达;模型组脑挫伤侧皮质和海马有Fos阳性表达.30min后已有阳性细胞;2～4h达高峰,阳性细胞多,而且着色较深,8～24h逐渐减弱,48h则不见阳性细胞.结论脑创伤可以导致伤侧皮质和海马c-fos基因蛋白过表达,而且各时间段表达强度不同,观察c-fos基因表达强度,可以作为临床提示脑部受伤时间的参考指标.     

兔肝细胞体外分离及培养方法的实验研究

目的：研究体外兔肝细胞分离及培养方法,比较不同培养基条件下兔肝细胞培养过程。方法：采用非灌注胶原酶消化法分离兔肝细胞,分别采用RPIM1640培养液（含10％新生牛血清）,DMEM培养液（含10％新生牛血清）,DMEM培养液（含10％胎牛血清）培养,计数法观察原代细胞增殖变化,MTF法观察传代细胞增殖情况。培养细膨采用PAS染色法鉴定,电镜观察细胞超微结构。结果：分离的肝细胞细胞活率大于85％;DMEM培养液（含10％胎牛血清）培养肝细胞生长状态较另两种培养液中的肝细胞强,DMEM培养液（含10％新生牛血清）中的细胞增殖能力较RPIM1640培养液（含10％新生牛血清）高,具有统计学意义。PAS染色和透射电镜观察培养细胞胞质中有大量糖原颗粒。结论：本实验采用的分离方法可获得较纯的肝细胞,而且操作简便实用。DMEM培养液较RPIM1640培养液更加适宜原代培养肝细胞生长,胎牛血清对培养肝细胞的生长促进作用明显高于新生牛血清。     

维甲酸对高氧暴露下原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞和成纤维细胞增殖与凋亡的影响

探讨高氧暴露对原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）、成纤维细胞（LFs）增殖和凋亡的影响以及维甲酸（RA）的保护作用机制。通过建立高氧暴露原代培养的胎鼠AECⅡ和LFs模型,以RA作为干预方式,采用流式细胞术（膜联蛋白V—PI双标记）检测AECⅡ和LFs凋亡,Western印迹检测AECⅡ增殖细胞核抗原（PCNA）、p53及caspase-3表达和LFs PCNA表达。结果发现：（1）与空气对照比较,高氧暴露12h,膜联蛋白V（＋）PI（-）和膜联蛋白V（＋）PI（＋）标记AECⅡ数均显著升高（14．41±1．15 vs 2．80±0．19,P＜0．01;61．07±3．06 vs 1．49±0．11,P＜0．01）;RA对空气暴露下AECⅡ坏死、凋亡无明显影响,但明显下调高氧暴露下膜联蛋白V（＋）PI（-）和膜联蛋白V（＋）PI（＋）标记AECⅡ数（8．04±0．79 vs 14．41±1．15,P＜0．01;27．57±2．32 vs 61．07±3．06,P＜0．01）。（2）高氧、RA对LFs坏死、凋亡无明显影响。（3）高氧暴露12h,明显降低AECⅡPCNA表达（P＜0．01）,显著提高其p53（P＜0．01）和caspase-3活性片段（P＜0．01）表达;RA显著上调高氧暴露下AECⅡPCNA表达（P＜0．01）,下调其p53和caspase-3活化片段表达（P＜0．01）。（4）高氧、RA对LFs PCNA表达无明显影响。由此提示,高氧暴露,导致AECⅡ大量凋亡、坏死,增殖受到抑制,同时,LFs所受影响较小,两种细胞对高氧暴露的差异性行为可能是导致未成熟肺组织异常重构的重要原因;RA通过降低AECⅡ凋亡、坏死从而对高氧肺损伤具有保护作用。     

眼镜蛇毒对大鼠延髓c-fos表达的影响

目的 探讨眼镜蛇毒对大鼠延髓c-fos表达的影响.方法 采用免疫组织化学方法,观察并比较c-fos阳性细胞在眼镜蛇毒组、生理盐水组、正常对照组大鼠延髓中的表达.结果 眼镜蛇毒组大鼠延髓外侧网状核c-fos阳性细胞明显多于生理盐水组和正常对照组(P＜0.01).结论 眼镜蛇毒对大鼠延髓c-fos表达有上调作用.     

褪黑素对大鼠空间学习记忆的影响及其机制研究

本研究运用Morris水迷宫和电生理学方法 ,以逃避潜伏期、穿环系数和海马CA1区突触长时程增强(long termpotentiation ,LTP)为指标 ,研究褪黑素对大鼠空间学习记忆能力的影响。实验结果显示 :( 1)在Morris水迷宫 6d训练中 ,对照组大鼠后 4d平均逃避潜伏期为 18 4 4± 2 7s,褪黑素组为 3 0 0 2± 3 6s,两者有显著差异 (P <0 0 1) ;训练 6d后 ,褪黑素组穿环系数为 2 5 68± 2 3 2 % ,明显小于对照组的 4 3 3 3± 2 85 % (P <0 0 1)。( 2 )采用微量注射法给予海马CA1区褪黑素 ,强直后 60min ,fEPSP斜率为基准值的 114 2 8± 1 80 % ,显著低于对照组的 169 71±6 4 8% (P <0 0 1)。( 3 )预先给予东莨菪碱 ,不影响褪黑素对海马CA1区LTP的抑制 ,强直后 60minfEPSP斜率为基准值的 113 70± 5 5 5 %。( 4 )提前给予荷包牡丹碱后给予褪黑素 ,强直后 60minfEPSP斜率为基准值的 162 2 9±10 5 2 % ,明显大于褪黑素组 (P <0 0 1) ,而与对照组无显著差异 (P >0 0 5 )。上述结果表明 ,褪黑素对大鼠的空间学习记忆能力及海马CA1区LTP均有明显的抑制作用 ,两者相关 ;东莨菪碱不能阻断褪黑素对海马CA1区LTP的抑制作用 ,而荷包牡丹碱可以阻断褪黑素对LTP的抑制 ,提示褪黑素的作用可能不是由胆碱能系统所介     

蛋白激酶C对CNE-2Z细胞p53基因表达的影响

用抗人ｐ５３蛋白单抗,进行免疫细胞化学染色,研究了蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）对ＣＮＥ－２Ｚ细胞ｐ５３基因表达的影响。结果发现：对照组Ｐ５３蛋白阳性细胞百分比为６７．６９±２．９７。ＰＫＣ催化区抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）和调节区抑制剂Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ）终浓度分别为２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ和４×１０－５ｍｏｌ／Ｌ诱导细胞２４ｈ后,Ｐ５３阳性细胞百分比分别为３０．４４±４．２５和２９．１９±２．３９,较对照组均明显降低,Ｐ＜０．０１。用终浓度为２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ的ＴＰＡ和终浓度为４ｕｇ／ｍｌ的ＯＡＧ分别作用２４ｈ后,Ｐ５３阳性细胞百分比分别为３３．７５±４．３４和６８．１８±４．４２,前者较对照组明显降低,Ｐ＜０．０１,后者变化不明显。阳性细胞中对照组和ＯＡＧ组以胞核和胞浆均着色为主,而ＳＳ、ＳＴ和ＴＰＡ组以胞核着色为主。以上结果表明：突变型ｐ５３基因在ＣＮＥ－２Ｚ细胞中有较高表达;通过抑制细胞ＰＫＣ活性和耗竭ＰＫＣ含量后,均可降低ｐ５３基因的表达;ＰＫＣ激活剂ＯＡＧ对该细胞ｐ５３基因的表达无明显影响。     

维生素A缺乏胎鼠作为先天性心脏病动物模型的实验研究

目的　探讨将维生素Ａ缺乏（ＶＡＤ）胎鼠作为先天性心脏病动物模型的可行性。方法取１１－１９ｄ不同胎龄正常及ＶＡＤ胎鼠心脏经石蜡包埋、切片及 ＨＥ染色观察其发育情况。结果 １．实验组饲料含维生素Ａ（ＶＡ）７μｇ／１００ｇ,经ＶＡＤ饮食喂养后实验组大鼠血清ＶＡ水平明显低于对照组［（０．１６８±０．０５９）μｍｏｌ／Ｌ Ｖｓ（２．１８±０．２３）μｍｏｌ／Ｌ,ｔ＝３２．８８, Ｐ＜０．００１］。 ２．大鼠死亡百分比：饲养于屏障系统的ＶＡＤ大鼠死亡百分比较饲养于开放系统中的要低４．６倍（１０％ Ｖｓ ４５．８３％．ｘ ２＝１６．６４, Ｐ＜０．００１）,对照组为０。 ３．实验组大鼠受孕百分比及每只孕鼠产仔数均低于对照组［５８．３３％ Ｖｓ ８１．５％, ｘ ２＝４．３７,Ｐ＜０．０５：（６．９７±２．７９） Ｖｓ（１３ ±１．０５）,ｔ＝７．１６, Ｐ＜０．００１］。 ４．经切片观察１１～１５ ｄ胎龄胎鼠实验组心脏出现明显发育延迟的占３６．６７％, １６～１９ ｄ胎龄胎鼠实验组心脏畸形占４１．４３％,血管异常占１８．５７％。结论ＶＡＤ胎鼠可用来作为先天性心脏病动物模型,但需改进饲养环境以减少异常死亡。     

高脂饮食对小鼠附睾内质网应激的影响及褪黑素的干预作用

目的探讨内质网应激在高脂饮食引起的ApoE基因敲除小鼠附睾损伤中的作用及褪黑素（MT）的干预机制。方法将12只ApoE基因敲除的C57BL／6J雄性小鼠随机分为高脂饮食组及MT处理组。高脂饮食组为ApoE基因敲除小鼠,给予高脂饮食;MT处理组给予高脂饲养外,并MT灌胃。以6只野生型C57BL／6J雄性小鼠作为对照组,给予普通饮食。饲养12w后,取附睾组织制片,HE染色观察附睾的病理学形态,免疫组化检测GRP78和CHOP的表达。结果HE染色显示,高脂饮食组小鼠,附睾上皮细胞形态结构不清,细胞萎缩。对照组和褪黑素处理组小鼠附睾上皮细胞形态结构完整,细胞排列整齐。免疫组化显示高脂饮食组小鼠附睾中GRP78、CHOP表达增强（P〈0．01）。MT处理组和高脂饮食组相比,附睾中GRP78、CHOP表达下调（P〈0．01）。结论内质网应激参与高脂饮食导致的附睾损伤;MT可能通过抑制附睾内质网应激,减轻高脂饮食对小鼠附睾的损伤。     

烫伤对大鼠下丘脑室旁核内皮素—1合成和分泌的影响

目的研究烫伤后下丘脑室旁核(PVH)内皮素-1(ET-1)的合成和分泌改变,探讨PVHET-1在烫伤中的病理生理学意义。方法用原位杂交和免疫组织化学方法观察了烫伤后PVHET-1合成和分泌的变化,并用通用图象颗粒分析法检测单位面积内ET-1mRNA阳性杂交信号的强度和ET-1样免疫反应物(ET-1-ir)免疫反应强度。结果烫伤后15minPVH神经元胞浆内ET-1mRNA阳性杂交信号与对照组相比未见明显差异,烫伤后60min和180minPVH神经元胞浆内ET-1mRNA阳性杂交信号较对照组(100％±25％)明显增多,强度明显增高,分别为138％±26％(P<0．05)和167％±18％(P<0.01);而烫伤后15minPVH神经元胞浆内ET-1阳性反应物明显减少,免疫反应物强度为6．3％±1．5％,显著低于对照组(P<0．01),烫伤后60min和180min逐渐回升,分别为23．1％±2．9％和44．1％±3．8％,但仍显著低于对照组(P＜0．01)。结论烫伤后PVHET-1合成和分泌增加。     

冷冻前后的低渗应激对小鼠孵化囊胚存活率的影响

本试验用10％或20％GL预处理5min,再移入GFS40中平衡0．5min二步法冷冻保存的小鼠孵化囊胚,解冻后24h内恢复率高达93％－97％,与对照组(99％)相比无显著差异(P＞0．05)。新鲜孵化囊胚在低渗液中平衡30min,0．25×PBS组恢复率达92％,而0．20×PBS组恢复率仅为50％,与对照组相比差异极显著(P＜0．01)。冷冻解冻后孵化囊胚直接进行低渗处理,结果0．50×PBS组的恢复率(72％)与对照组(88％)差异显著(P＜0．05),而0．30×、0．25×和0．20×PBS组的恢复率分别为58％、11％和0％。解冻后经培养的孵化囊胚对低渗处理的耐受力增强,0．50×PBS处理组的恢复率达94％,与对照组(98％)相比无显著差异(P＞0．05),0．30×、0．25×和0．20×PBS组的恢复率与对照组相比虽有极显著差异(P＜0．01),但与解冻后直接进行低渗处理组相比恢复率有较大提高(82％－26％)。     

改良PAS染色法在急性肝损伤中的应用

目的：观察改良肝脏糖原PAS染色法,并观察肝脏糖原染色在急性肝损伤中的应用。方法：复制CCl4急性肝损伤模型,首次100％CCl43 mL／kg皮下注射,此后50％CCl4橄榄油溶液2 mL／kg每周2次共4次皮下注射,诱导大鼠急性肝损伤模型。计算大鼠肝体比;HE染色观察肝组织炎症病理;试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBil）、白蛋白（Alb）。肝脏常规PAS染色与改良PAS染色观察肝糖原染色。结果：与正常组相比,模型组ALT、AST活性与TBil含量明显升高（P＜0．05）,Alb含量明显降低（P＜0．05）;HE染色示,模型组肝小叶结构排列紊乱,肝细胞脂肪变、气球样变明显。常规PAS染色,正常组肝组织PAS染色阳性占肝脏面积为32．38％±5．50％;与正常组相比,模型组肝组织PAS阳性染色明显减少（P＜0．01）,占肝脏面积为8．60％±3．34％。改良PAS染色提示,正常组肝脏可见大量PAS阳性染色,占肝脏面积为75．50％±9．02％;与正常组相比,模型组肝组织PAS阳性染色明显减少（P＜0．01）,占肝脏面积为17．61％±3．53％。在空白对照组与模型肝组织中,肝糖原改良PAS染色阳性率明显高于常规PAS染色法（P＜0．01）。改良PAS染色肝糖原阳性染色面积更真实反映急性肝损伤程度。结论：改良肝脏糖原PAS染色法有助于急性肝损伤程度评估。     

细胞外信号调节激酶1/2信号通路在慢性哮喘模型大鼠支气管平滑肌细胞迁移功能变化中的调控作用

本研究旨在探讨细胞外信号调节激酶1／2(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)信号通路在慢性哮喘模型大鼠支气管平滑肌细胞(bronchial smooth muscle cells,BSMCs)迁移能力改变中的调控作用。应用卵清蛋白致敏和雾化方法制备大鼠慢性哮喘模型,体外培养大鼠BSMCs,采用免疫荧光细胞化学、Western blot和RT-PCR方法检测ERK1／2信号通路的表达,分别用平面迁移实验和跨膜迁移实验来评价BSMCs的活动和趋向迁移能力,并比较用和不用ERK1／2信号通路干预剂的差异。Western blot结果显示慢性哮喘模型大鼠BSMCs中总ERK1／2(9．13±0．87)较对照组(4．68±0．59)明显增加,磷酸化ERK1／2(p-ERK1/2)占总ERK1／2的比值(0．55±0．05)较对照组(0．48±0．04)显著提高(n=10,P<0．01)。慢性哮喘组ERK1和ERK2 mRNA的表达(1．83±0．24和1．07±0．11)较对照组(0．58±0．14和0．51±0．12)明显增高(n=10,P<0．01)。在平面迁移实验中,慢性哮喘大鼠BSMCs的迁移最远距离是对照组的(2．9±0．1)倍,在ERK1／2激动剂表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)刺激下增加到(5．0±0．2)倍,而在30μmol／L PD98059的作用后下降到(1．7±0．2)倍。正常对照大鼠BSMCs平面迁移能力对PD98059的反应较慢性哮喘组弱,仅在100μmol／L PD98059的作用下下降到(0．8±0．1)倍。跨膜迁移实验中,慢性哮喘大鼠BSMCs的跨膜迁移细胞是对照组的(1．9±0．1)倍,在EGF刺激下增加到(3．1±0．2)倍,而在30μmol/L PD98059作用后下降到(1.45±0.2)倍。这些结果表明慢性哮喘模型大鼠BSMCs的迁移能力明显增强,ERK1／2信号通路在该功能变化的调控中可能发挥了重要作用。     

小鼠骨髓源性树突状细胞体外诱导培养方法的比较研究

目的探讨最佳体外诱导培养小鼠成熟树突状细胞（dendritic cells,DC）的方法。方法分离、纯化6周龄C57BL／6小鼠骨髓单核细胞,以含10％胎牛血清、20ng／ml重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）和10ng／ml重组小鼠白细胞介素-4（IL-4）的RPMI-1640培养基培养7d,然后将细胞分成对照未刺激组、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）刺激组和TNF-α＋脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）刺激组。继续培养48h后,观察各组细胞形态,检测IL-12、IL-6浓度及细胞表面标志CD11c、CD80、CD86和MHC II。结果培养9d后,两刺激组培养的细胞经相差显微镜观察有DC生长。TNF—α刺激组细胞培养上清液中IL-6、IL-12含量显著高于对照组（P〈0．01）,但显著低于TNF—α＋LPS刺激组（P〈0．05）。3组均高表达CD11c,各组间无显著差异;而CD80、CD86和MHC II表达阳性率TNF-α刺激组显著高于对照组（P〈0．01）,TNF-α＋LPS刺激组显著高于单纯TNF—α刺激组（P〈0．05）。结论联合使用TNF-α与LPS刺激可使DC成熟度提高,分泌IL-6、IL-12增加。     

化学刺激或电刺激大鼠穹窿下器官诱发的饮水行为和脑内c-fos表达

目的对化学刺激和电刺激穹窿下器官(subfornical organ, SFO)诱发的饮水量和脑内c-fos表达的结果是否不同进行比较. 方法向大鼠SFO内微量注射L-谷氨酸作为化学刺激,用恒流刺激SFO作为电刺激,记录诱发的1 h内饮水量,用免疫组化方法检测脑内Fos蛋白表达.结果电刺激和化学刺激SFO均能诱导相似的饮水行为,其诱饮率分别为75%和85.7%,1 h平均饮水量分别为(0.28±0.22) ml 和(0.31±0.15) ml ,明显高于各自的对照组(P<0.05),并均能使前脑的 11个脑区(终板血管器官, 正中视前核,室旁核,视上核,下丘脑外侧区,丘脑室旁核,联合核和中央内侧核,终纹床核,穹窿周背区和无名质)和后脑的4个脑区(最后区,孤束核,臂旁外侧核和中缝背核)相似的Fos蛋白表达.结论刺激SFO所诱导的饮水行为和脑内Fos蛋白表达是激活其神经元胞体的结果.     

呼伦贝尔草原黄羊体况的初步评价

对呼伦贝尔草原地区黄羊肾脏重量和肾脏中心脂肪指数的变化进行了研究。初步评价了不同年龄－性别组黄羊以及不同季节黄羊体况的差异。发现：黄羊左肾重量大于右肾,不同年龄－性别组黄羊间肾重存在极显的差异（P＜0．01）,并且肾重与体重呈显的正相关性（P＜0．01）;黄羊肾重存在季节性差异,春季肾重大于秋、冬二季;KMFI值在不同的年龄－性别组间也呈明显的差异性（P＜0．01）,KMFI值亦与体重吴正相关性（P＜0．01）;不同的季节,黄羊KMFI值差异明显（P＜0．01）。黄羊秋季体况最好,而冬末春初则较差。     

松果体及其褪黑素对大鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的探讨松果体及其褪黑素对胸腺细胞凋亡的影响以及Caspase-3的表达。方法选用清洁级SD大鼠,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除 褪黑素腹腔注射7.5mg/kg/d组和松果体摘除 褪黑素腹腔注射15mg/kg/d组。术后4、8周取材。运用TUNEL法检测胸腺细胞的凋亡程度,用ABC法染胸腺Caspase-3阳性细胞,计算机图像分析仪测量阳性细胞面积及其染色强度。以RT-PCR法检测褪黑素干预原代培养胸腺细胞Caspase-3的表达。结果松果体摘除后8周时胸腺细胞凋亡显著增加,补充褪黑素则能明显减少胸腺细胞的凋亡。Caspase-3阳性细胞主要见于胸腺皮质,松果体摘除后胸腺皮质Caspase-3阳性细胞面积增加明显,补充褪黑素则使其下降。褪黑素能上调培养胸腺细胞Caspase-3的表达水平。结论松果体能调控大鼠胸腺细胞的凋亡,松果体摘除促进胸腺细胞的凋亡,补充褪黑素能缓解相关影响。     

神经途径在肢体缺血预处理抗脑缺血/再灌注损伤中的作用

目的：探讨神经途径在肢体缺血预处理（limbi schemic preconditioning,LIP）抗脑缺血／再灌注损伤中的作用。方法：脑缺血采用四血管闭塞模型,重复短暂夹闭放松大鼠双侧股动脉3次作为LIP。将凝闭椎动脉的大鼠随机分为sham组、脑缺血组、股神经切断＋脑缺血组、LIP＋脑缺血组、股神经切断＋LIP＋脑缺血组。于Sham手术和脑缺血后7d处死大鼠,硫堇染色观察海马CA1区锥体神经元迟发性死亡的变化。于Sham手术和脑缺血后6h心脏灌注固定大鼠,免疫组化法测定海马CAI区c-Fos表达的变化。结果：硫堇染色结果显示,与sham组比较。脑缺血组和股神经切断＋脑缺血组大鼠海马CAI区均有明显组织损伤。LIP＋脑缺血组CAI区无明显细胞缺失,神经元密度明显高于脑缺血组（P〈0．01）。而股神经切断＋LIP＋脑缺血组大鼠海马CA1区明显损伤,锥体细胞缺失较多,与LIP＋脑缺血组组比较,神经元密度显著降低（P〈O．01）,提示LIP前切断双侧股神经取消了LIP抗脑缺血／再灌注损伤作用。c—Fos免疫组化染色结果显示,Sham组海马CAI区未见明显的c-Fos蛋白表达。脑缺血组海马CAI区偶见c—Fm的阳性表达。LIP＋脑缺血组c—Fos表达增强,数量增加,与Sham组和脑缺血组比较。c-Fos阳性细胞数和光密度均明显升高（P〈0．01）。而股神经切断＋LIP＋脑缺血组c-Fos表达明显减少,仅见少量弱阳性e-Fos表达。结论：LIP可通过神经途径发挥抗脑缺血／再灌注损伤作用,而LIP诱导c—Fos表达增加可能是LIP诱导脑缺血耐受神经途径的一个环节。     

高效的多巴胺能神经元原代培养方法及其影响因素的研究

目的：建立一种简单高效的中脑多巴胺神经元细胞原代培养方法,并观察胰酶消化对中脑多巴胺能神经元突起生长的损伤作用。方法：以Nakai等经典神经元细胞原代培养方法为基础,通过使用低日龄胎鼠,初次培养液加入胎牛血清等步骤,促进中脑多巴胺能神经元细胞贴壁和生长;在无胰酶消化组直接使用内口外翻的小口径硅化吸管轻柔吹打离散细胞,比较两种方法间神经元细胞突起形成的差异。结果：接吹打组其多巴胺能神经元细胞突起的生长程度（2124-10um）明显高于胰酶消化组（113＋9μm）（P〈0．01）,而两组间多巴胺阳性细胞比例未见显著差异（P〉0．05）。结论：在中脑多巴胺能神经元细胞原代培养中,低日龄胎鼠及免胰酶消化离散细胞可减少神经元细胞损伤,有利于细胞突起的生长。     

利血平预处理抑制低频电刺激对大鼠脑组织Hsp-70和c-fos水平的上调

目的观察利血平对低频电刺激引起的应激的影响。方法给予Wistar大鼠利血平预处理再给予低频电刺激,即刻剥取脑组织,用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组织化学(IHC)检测脑组织中c-fos和Hsp-70基因的表达。结果电刺激组大脑前额叶皮层(PFC)、中脑腹侧背盖区(VTA)、海马(Hipp)组织中Hsp-70和c-fos水平比对照组相应区域均显著升高,免疫反应阳性细胞数明显增多;利血平处理使电刺激产生的Hsp-70和c-fos水平的增加和免疫反应阳性细胞数的增加均明显减少。结论利血平预处理可减轻低频电刺激引起的应激损伤。