不同方法分离的成人睾丸支持细胞与胰岛共移植的效果对比

目的比较成人睾丸支持（Sertoli）细胞不同分离方法的效果,建立成人Sertoli细胞简便高效的分离方法。方法将质量相等的睾丸组织按照不同分离方法随机分为3组：A组采用胰蛋白酶、DNA酶、胶原酶和透明质酸酶一步消化法;B组采用胰蛋白酶和DNA酶第一步消化,胶原酶和透明质酸酶第二步消化;C组采用胰蛋白酶和DNA酶第一步消化,透明质酸酶第二步消化,胶原酶第三步消化;D组为对照组。采用形态学观察和免疫组化鉴定Sertoli细胞;MTT法和流式细胞仪法测定3组Sertoli细胞的活性和纯度;应用生存分析方法比较3组Sertoli细胞与胰岛共移植至糖尿病鼠的效果。结果分离获得的细胞经形态学和免疫组化鉴定,具有Sertoli细胞的特征,A、B、C三组Sertoli细胞的纯度分别为（85．17±1．8）％、（92．33±2．5）％和（93．12±2．6）％,B组和C组的Sertoli细胞纯度显著高于A组（t=7．35,t=7．95,P=0．00,P=0．00）。B组Sertoli细胞活性于培养14d时达到峰值,此后缓慢下降。B组Sertoli细胞活性显著高于A组和C组（t=4．02,t=2．77,P=0．00,P=0．01）,且B组Sertoli细胞与胰岛共移植术后胰岛移植物存活时间显著高于A、c、D组（F=165．548,P=0．000）。结论采用两步消化的方法能够获得纯度和活性较高的Sertoli细胞,其与胰岛共移植能够显著延长移植物存活。     

特发性腹膜后纤维化误诊为输尿管癌1 例报告并文献复习

目的:分析并掌握腹膜后纤维化的诊疗特点,避免对该病的误诊误治。方法:回顾性分析1例腹膜后纤维化患者分别因两侧肾积水先后两次住院并最终确诊的诊疗过程中的临床资料,包括临床表现、影像特点、病理结果、治疗方法及预后等,并结合相关文献进行复习。结果:患者因右肾积水首次入院诊断为右输尿管癌而行右侧肾输尿管切除术,后患者因左肾积水来我院住院诊断为腹膜后纤维化,行腹腔镜输尿管松解+腹腔内置术,术后长期随访疗效满意。结论:腹膜后纤维化作为一种少见病,缺乏对其认识极易导致误诊误治,掌握该疾病的临床特点及选择适宜的治疗方案,对本病的诊疗具有重要意义。     

不同品种玉米在盐碱复合胁迫下的幼苗生长差异及其生理机制

为探明玉米的耐盐碱机制,推动耐盐碱玉米品种的选育,以“郑单958”和“ZN451”为试验材料,用25 mmol·L^-1 Na₂CO₃和100 mmol·L^-1 NaCl对幼苗进行盐碱复合胁迫处理,探究盐碱复合胁迫对玉米幼苗生长及生理指标的影响。结果表明：处理组“郑单958”的株高、地上干重、单株总干重均极显著低于其对照组,根冠比高于对照组但差异不显著;脯氨酸含量显著高于对照组,可溶性蛋白含量比对照组低但降幅不显著;MDA含量显著高于对照组,SOD活性极显著高于对照组,POD活性显著低于对照组;SPAD值显著低于对照组,G_s、C_i、P_n、F_v/F_m、PI值均极显著低于对照组;ABA、JA含量均极显著高于对照组;处理组“ZN451”的株高、地上干重均显著低于其对照组,单株总干重低于对照组但降幅不显著,根冠比极显著高于对照组;脯氨酸、可溶性蛋白含量均显著高于对照组;MDA含量显著高于对照组但差异不...     

碳酸氢钠+载药微球经肝动脉化疗栓塞治疗中晚期肝癌的临床效果

目的:探讨碳酸氢钠+载药微球经肝动脉化疗栓塞治疗中晚期肝癌的临床效果及安全性。方法:选择2015年2月到2018年6月在我院诊治的中晚期肝癌患者78例,根据随机数字表法将其均分为两组,每组各39例。对照组给予载药微球经肝动脉化疗栓塞治疗,实验组给予碳酸氢钠+载药微球经肝动脉化疗栓塞治疗,比较两组的临床疗效,治疗前后CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+T细胞比例的变化,治疗期间不良反应的发生情况及预后。结果:治疗后,实验组与对照组的治疗总有效率分别为74.4%和43.6%,实验组显著高于对照组(P0.05)。实验组治疗期间的发热、腹痛、腹胀、呕吐等不良反应发生情况与对照组的对比差异无统计学意义(P0.05)。两组治疗前后CD3CD4~+T比例对比差异无统计学意义(P0.05),两组治疗后的CD3~+CD8~+T比例显著低于治疗前,且实验组明显低于对照组(P0.05)。治疗后,实验组的躯体功能、心理功能、社会功能、共性症状及副作用评分都低于对照组(P0.05)。结论:碳酸氢钠+载药微球经肝动脉化疗栓塞治疗中晚期肝癌能提高治疗效果,改善机体的免疫功能,提高患者的生活质量,且不会增加不良反应。     

联合应用大鼠血管内皮细胞和胰岛培养对胰岛功能的影响

目的 探讨通过体外共培养胰岛和血管内皮细胞能否改善胰岛的功能.方法 SD 大鼠分离纯化出胰岛细胞,分为两组:A 组胰岛单纯培养组,B 组胰岛和内皮细胞共培养组.从大鼠的胸主动脉分离纯化出血管内皮细胞,胰岛分离纯化后通过AO/PI 染色和胰岛素释放实验来判断两组胰岛的活性.结果 共培养组胰岛在7 d 内维持正常的形态,9...     

联合应用大鼠血管内皮细胞和胰岛培养对胰岛功能的影响

目的 探讨通过体外共培养胰岛和血管内皮细胞能否改善胰岛的功能.方法 SD 大鼠分离纯化出胰岛细胞,分为两组：A 组胰岛单纯培养组,B 组胰岛和内皮细胞共培养组.从大鼠的胸主动脉分离纯化出血管内皮细胞,胰岛分离纯化后通过AO/PI 染色和胰岛素释放实验来判断两组胰岛的活性.结果 共培养组胰岛在7 d 内维持正常的形态,90﹪的胰岛通过AO/PI 染色显示良好的活性;胰岛素释放实验显示第7 天（2.21 ± 0.21）和第14 天（2.53 ± 0.21）共培养组和单纯培养组（1.94 ± 0.15,1.71 ± 0.19）刺激指数差异有统计学意义（P 〈 0.05）.结论 应用大鼠血管内皮细胞和胰岛共培养能够改善胰岛的存活及分泌功能.     

foxp3转染的CD4~+ CD25~- T细胞治疗急性肺损伤的研究

目的通过基因转染技术将foxp3基因导入CD4+CD25-T淋巴细胞,生成CD4+CD25-Foxp3+T细胞,通过输入急性肺损伤小鼠模型体内,促进炎症消退,为体外定向操纵调节T细胞生成和细胞过继治疗急性肺损伤奠定基础。方法采用RT-PCR法从小鼠胸腺来源cDNA文库中扩增获得foxp3 cDNA,亚克隆至构建pIRES2-EGFP质粒中,构建并筛选出重组质粒pmFoxp3-IRES2-EGFP;采用免疫磁珠法分离CD4+CD25-T淋巴细胞,穿孔法转染Foxp3基因至CD4+CD25-T淋巴细胞,流式细胞仪检测CD4+和EGFP共表达的细胞比例;将foxp3基因转染的小鼠CD4+CD25-T细胞通过尾静脉输注急性小鼠体内,通过ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液中TNF-α以及IL-1β细胞因子的表达,通过肺组织病理研究肺部炎症的消退状况。结果成功构建双基因共表达重组质粒pmFoxp3-IRES2-EGFP;免疫磁珠法较高纯度分离CD4+CD25+、CD4+CD25-T淋巴细胞,电穿孔法成功将重组质粒pmFoxp3-IRES2-EGFP转染致CD4+CD25-T细胞,CD4+和EGFP共表达的细胞比例为35.5%;过继Foxp3基因转染的小鼠CD4+CD25-T细胞以及Treg均能抑制急性肺损伤小鼠肺泡灌洗液中TNF-α以及IL-1β炎性细胞因子的表达,促进炎症的消退。结论转染Foxp3基因的CD4+CD25-细胞同Treg(CD4+CD25-)细胞一样可以通过细胞过继治疗急性肺损伤。     

褪黑素抑制原代培养鸭肾上皮细胞c－fos的表达

本研究采用Ｆｏｓ蛋白免疫组化染色方法观察了胎牛血清对原代培养鸭肾上皮细胞ｃ─ｆｏｓ表达的刺激作用及褪黑素的阻断作用。以每一视野Ｆｏｓ染色阳性细胞的百分比为指标,每组实验观察１４至１７个视野。实验结果显示,正常对照组平均每视野Ｆｏｓ染色阳性细胞为４４．３１±２．７７％,胎牛血清刺激组为６３．０７±３．９３％,明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）,胎牛血清加１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ褪黑素组为３５．２９±３．２２％,明显低于单纯胎牛血清刺激组（Ｐ＜０．０１）,但与对照组无明显差异（Ｐ＞０．０５）。该结果表明褪黑素可以抑制原代培养鸭肾上皮细胞ｃ─ｆｏｓ表达。     

NLRP3炎症小体表达与慢性阻塞性肺疾病合并肺癌的相关性研究

目的:分析核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体表达与慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺癌的相关性。方法:选取2015年1月-2018年2月我院收治的COPD合并肺癌患者62例作为实验组及同期88例COPD患者作为对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组患者外周血IL-1β、IL-18浓度,免疫组化法检测两组患者术后肺病理组织中Caspase-1、ASC、NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白相对表达量,并比较不同病理特征下患者术后肺病理组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白相对表达量的差异,并分析其与COPD合并肺癌的相关性。结果:实验组患者外周血IL-1β、IL-18水平均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);实验组患者术后肺病理组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白相对表达量均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05);中低分化、临床分期Ⅲ期、淋巴结有转移的急性加重期COPD合并肺癌患者术后肺病理组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白相对表达量高于高分化、临床分期Ⅰ-Ⅱ期、淋巴结无转移的稳定期COPD合并肺癌患者,差异具有统计学意义(P0.05)。经Spearman秩相关性分析发现,患者术后肺病理组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白相对表达量与COPD合并肺癌患者病情严重程度、淋巴结转移情况、分化程度以及病情所处时期均呈正相关(r0,P0.05)。结论:NLRP3炎症小体通路可能参与了COPD合并肺癌的发展过程,其释放的细胞因子IL-1β、IL-18水平升高可能与患者持续炎症有关,并进一步导致机体免疫病理损伤,促进疾病进展。