Y染色质阳性率的年龄效应

1970年Pearson等首次报道正常男性口腔粘膜细胞的间期核以喹吖因染色,可以观察到发荧光的Y染色质。Y染色质的发现为在临床实践中初步做出性别诊断并筛选出性染色体异常病例带来颇大帮助。本文拟对不同年龄对Y染色质阳性率的影响做初步探讨。     

性染色质观察与性染色体疾病

随着医学科学的发展 ,人类检测遗传病的手段越来越先进 ,许多遗传顽疾将被攻克 ,而利用间期核中特有的 X染色质 (Xchromatin)和 Y染色质 (Ychromatin)作为人类的一个重要遗传特征 ,在性别诊断 ,性染色体(Sex chromatin)异常所引起的疾病的诊断上 ,以及性连锁遗传病 (Sex- Linked inheritance Disease)的预防过程中 ,都将起着越来越重要的作用。1　材料与方法1.1　实验材料　女性口腔粘膜细胞、男性口腔粘膜细胞。1.2　实验器材　显微镜、荧光显微镜、牙签、载玻片、盖玻片、吸水纸、漱口杯、染色缸、乳头吸管、香柏油和二甲苯。1.3　试…     

X染色质标本制作与性别鉴定

X染色质和 Y染色质 ,可用来鉴定 1个人的性别。主要是对发病率有性别差异的遗传性疾病的预防有参考作用 ,如色盲 ,血友病等。1　材料与方法1.1　实验材料　正常女性口腔粘膜细胞1.2　实验器材　刻度离心管　牙签　载玻片　盖玻片　吸水纸　玻璃笔　离心机　吹风机　漱口杯　乳头吸管　染色缸　显微镜　水浴箱1.3　试剂　固定液 (无水乙醇 3:冰醋酸 1)　硫堇染液　 Giemsa染液　乳酸醋酸地衣红染液　磷酸缓冲液(p H6 .8)　结晶紫染液　 1mol/ L盐酸　 95 %酒精　蒸馏水　生理盐水　无水乙醇1.4　实验方法1.4 .1　方法 　 1)用口杯漱口后 ,…     

Y染色质阳性率的年龄效应

1970年Pearson等^[4]首次报道正常男性口 腔粘膜细胞的间期核以哇叮因染色,可以观察 到发荧光的Y染色质。Y染色质的发现为在临 床实践中初步做出性别诊断并筛选出性染色体 异常病例带来颇大帮助。本文拟对不同年龄对 Y染色质阳性率的影响做初步探讨。     

限制酶AluI显带和CA_3/DA/DAPI染色表达的家猪染色体结构异染色质

采用限制酶AluI显带、CA_(?)/DA/DAPI荧光染色和常规C带技术研究了家猪染色体着丝粒结构异染色质,结果表明:着丝粒结构异染色质至少可被区分为3类,并且在染色体组内各有其特异的染色体分布。将家猪染色体DA/DAPI荧光带和限制酶AluI显带与人类染色体比较,发现家猪13—18号端着丝粒染色体显带特征与人染色体1,9、16、Y一致。提示家猪13—18号端着丝粒区结构异染色质存在与人类随体DNA相似的DNA组成。     

He-Ne激光照射日本沼虾肌肉、眼柄和脑神经的组织细胞的光学显微镜观察

用He-Ne激光照射日本沼虾的肌肉、眼柄和脑神经,研究其对日本沼虾细胞形态结构的影响。结果表明：(1)实验组的肌肉组织细胞具有明显异染色质的细胞数量百分比要比对照组的增大2．78％;(2)实验组的眼柄和脑的神经细胞核的平均直径要比对照组的分别增大2．40μm和5．25μm,核内具有明显异染色质的平均直径比对照组的分别增大10．20μm和14．7μm,实验表明He-Ne激光照射后细胞核内异染色质发生明显凝集,神经细胞核内异染色质的凝集尤为明显。     

中华大蟾蜍第6染色体(核仁组成染色体)的研究——Ⅰ.巨大随体的发现及其遗传规律

在130只中华大蟾蜍中有17只个体(占13％)在第6染色体的随体部位出现了巨大随体。它们的大小在个体之间有显著的不同。这些大随体是额外增加的染色质,在染色质的性质上不同于次缢痕,也没有rDNA的转录活性。这些额外增大的随体与性别、年龄、季节和表型都没有相关的联系,并且以简单的孟德尔方式遗传。     

大鼠衰老过程中肝细胞核及染色质的体外转录活性

用同位素掺入法研究不同年龄大鼠的肝细胞核及染色质体外转录活性,所得结果表明:(1)老年大鼠肝细胞核的转录起始能力较断乳鼠及青年鼠分别下降68％及56％。(2)大鼠肝细胞核内与染色质结合的RNA聚合酶所致的转录活性随增龄呈近似线性下降,而不与染色质结合的RNA聚合酶所致的转录活性随增龄则无变化。(3)老年大鼠肝染色质体外转录活性较断乳鼠及青年鼠分别下降52％及35％。这些结果提示。老年大鼠肝染色质功能的改变可能是转录活性改变的主要原因。     

人的Y染色体异染色质与形态生理学变异

对55名Y染色体具有形态上相同的、异染色质几乎全部缺失的男性和55名Y染色体正常的男性进行了80项形态生理学性状的研究。发现在这两个组之间大部分性状的平均值并无显著性差异,但有些血液学指标有显著差异。用模式认辨法确定出20个性状的组合可以区分这两个组,其认辨误差为4.6%。认辨系统包括的有价值的性状为心电图指标(占性状的25%)、某些人类学指标、血液学指标和个体年龄。结果表明,Y染色体异染色质可能在人的个体发育过程中对形态生理学性状间的表型关系起一种修饰作用。     

利用染色质结构检测技术研究乳腺癌易感蛋白BRCA1转录激活区突变

乳腺癌易感基因BRCA1突变引起的遗传性乳腺癌中40％－50％,其突变引起的遗传性乳腺癌和卵巢癌的比例至少为80％,许多乳腺癌易感突变发生在BRCA1 C末端转录激活结构域（1560－1863aa),但该区域大部分突变导致何种表型（良性多态性或乳腺癌易感突变）目前还不清楚,由于染色质结构调节是基因转录调节的早期事件,该文基于lac阻遏物识别和结合lac操纵基因的原理,利用染色质结构检测技术比较BRCAI转录激活结构域不同突变体与野生型的染色质伸展活性,将1种野生型,2种良性多态型（S1613G和M16521）和4种乳腺癌易感突变型（A1708E,M1775R,W1837R和Y1853term)转录激活区片段以正确相位融合于lac阻遏物的下游,得到野生型重组质粒pwt和pS1613G,pM1652I,pA1708,pM1775R,pW1837R及pY1853tem6种突变型重组质粒,Western blot检测表明,这些重组质粒分别转染A03－1细胞后均表达了相应的融合蛋白。对这些重组质粒的染色质伸展活性检测表明：野生型pwt和两种良性多态性突变体不具有染色质伸展活性或只有极微弱的染色质伸展活性,而其他4种乳腺癌易感突变体均具有过强的染色质伸展活性,提示利用染色质伸展技术可预测BRCA1转录激活区基因型与乳腺癌发生风险的表现型的关系。     

百合花粉母细胞间细胞融合期间腺苷三磷酸酶活性的细胞化学定位及其与染色质胞间转移的关系

用标准的磷酸铅沉淀的细胞化学方法,对百合花粉母细胞间染色质穿壁运动期间及其前后三个时期中的腺苷三磷酸酶(ATP 酶)活性进行了超微结构的定位。结果表明:(1)在穿壁前,ATP 酶活性主要定位于质膜、胞间连丝及细胞间隙;在内质网、高尔基体、质体和某些局部的基质(groundplasm)中,也表现有 ATP 酶活性反应的产物;但在染色质和核仁中,一般都没有这种反应。(2)在穿壁时,染色质从一个细胞穿壁转移到另一个相邻细胞,同时看到染色质和核仁内出现密集的 ATP 酶活性反应产物;在内质网和高尔基体的腔内以及质体的片层上也产生明显的 ATP 酶活性反应;而在质膜、胞间连丝及细胞间隙内 ATP 酶活性明显降低,甚至看不到明显的活性反应。(3)在穿壁后,质膜及细胞间隙中又产生明显的 ATP 酶活性反应产物,但核内染色质上的 ATP 酶活性则显著降低,而核仁内则仍有较高的活性。同前二个时期一样,内质网、高尔基体和质体上的 ATP 酶仍表现明显的活性反应。最后讨论了三个不同发育时期 ATP 酶活性及其分布部位的改变与染色质胞间转移的关系。     

从口腔粘膜上皮细胞来识别男女性别的方法

性染色质系指细胞分裂间期核内的一种有明显特征的染色质。它在人体各组织如口腔上皮、阴道粘膜上皮、皮肤、羊水内的细胞、血球内都有存在。哺乳类、鸟类、爬行类以及昆虫体内多种组织均证实有性染色质。性染色质在正常的情况下只有雌性的动物具有,     

He-Ne激光照射日本沼虾心脏、鳃和腹神经组织细胞的光学显微镜观察

本文采用He-Ne激光照射日本沼虾的心脏、鳃和腹神经,研究其对日本沼虾组织细胞形态结构的影响。实验结果为：(1)实验组的心脏和鳃组织细胞具有明显异染色质的细胞数量百分比要比对照组的分别增大21．78％和13．23％;(2)实验组的腹神经分泌细胞核的平均直径比对照组的缩小0．82／an,核内有明显异染色质的平均直径比对照组的缩小1．69μm。实验表明：He-Ne激光照射后,细胞核内异染色质均发生凝聚现象。     

γ-射线对大鼠小肠粘膜上皮细胞RNA合成的影响及其机理的研究

本文观察了15戈瑞γ-射线全身照射后,大鼠小肠粘膜上皮细胞核体外转录活性,从染色质结合的RNA聚合酶和可溶性RNA聚合酶活性变化探讨辐射对核转录活性的抑制机理。实验结果表明:(1)照后2小时、8小时和24小时,核转录活性分别下降22.7％、20.8％和28.2％;(2)染色质结合的RNA聚合酶活性变化与细胞核转录活性变化基本平行,提示核转录活性降低与核内染色质损伤有关;(3)照后24小时,核分离的可溶性RNA聚合酶抑制58％,提示辐射至少部分是通过抑制RNA聚合酶而影响细胞核转录活性;(4)在细胞核和分离的RNA聚合酶都观察到RNA聚合酶Ⅱ抑制程度大于RNA聚合酶Ⅰ和酶Ⅲ,酶活性下降主要表现在RNA聚合酶Ⅱ提示不同类RNA聚合酶对辐射的敏感性不同,酶Ⅱ对辐射更敏感。     

小鼠Hep.A肝癌染色质磷酸化非组蛋白的研究——Ⅱ.染色质结合的蛋白激酶和核内磷蛋白磷酸酶的研究

建立了简易的制备~(32)P-酪蛋白和测定核内磷蛋白磷酸酶的方法。测定了Hep.A腹水肝癌染色质结合的蛋白激酶和核内磷蛋白磷酸酶活性。Hep.A肝癌染色质结合的蛋白激酶比活性大于正常肝,但核内磷蛋白磷酸酶的比活性反低于正常。这是引起Hep.A肝癌染色质总磷酸化修饰程度增加,非组蛋白含磷总量增加的重要原因。Hep.A肝癌染色质磷酸化作用的增长低于非组蛋白量的增加,可能是引起单位重量磷酸化非组蛋白所含磷酸基团低于正常肝的原因之一。     

小鼠Hep.A肝癌染色质磷酸化非组蛋白的研究——Ⅱ.染色质结合的蛋白激酶和核内磷蛋白磷酸酶的研究

建立了简易的制备~(32)P-酪蛋白和测定核内磷蛋白磷酸酶的方法。测定了Hep.A腹水肝癌染色质结合的蛋白激酶和核内磷蛋白磷酸酶活性。Hep.A肝癌染色质结合的蛋白激酶比活性大于正常肝,但核内磷蛋白磷酸酶的比活性反低于正常。这是引起Hep.A肝癌染色质总磷酸化修饰程度增加,非组蛋白含磷总量增加的重要原因。Hep.A肝癌染色质磷酸化作用的增长低于非组蛋白量的增加,可能是引起单位重量磷酸化非组蛋白所含磷酸基团低于正常肝的原因之一。     

东北梅花鹿染色体限制性内切酶显带

采用限制性内切酶Hae Ⅲ、Hind Ⅲ分别处理梅花鹿中期染色体标本,发现HaeⅢ处理标本21h左右,显出类似G带、C带带型,第1、4、11、18、27、28、31对染色体的结构异染色质区对HaeⅢ敏感而浅染,而HindⅢ处理标本18h左右能诱导梅花鹿中期染色体显出类似G带、C带,第2、6、15、18、29、32对染色体的结构异染色质区对HindⅢ较敏感而浅染,性染色体Y对HaeⅢ敏感呈浅染,性染色体X对HindⅢ敏感呈浅染。表明东北梅花鹿12对常染色体和两条性染色体结构异染色质在这两种酶处理时表现出异质性。     

植物三维染色质构型研究进展

染色质在细胞核内的缠绕、折叠及其在细胞核内的空间排布是真核生物染色质构型的主要特征。在经典DNA探针荧光原位杂交显微观察的基础上,基于新一代测序技术的Hi-C及ChIA-PET染色质构型捕获技术已经被广泛应用于动物及植物细胞核染色质构型的研究中,并以新的角度定义了包括:染色体(质)域(chromosome territory)、A/B染色质区室(compartment A/B)、拓扑偶联结构域(topological associated domains,TADs)、染色质环(chromatin loops)等在内的多个更为精细的染色质构型。利用以上两种主流技术,越来越多的植物物种染色质构型特征被鉴定、分析和比较。本文系统分析和总结了近年来以植物细胞为模型的细胞核染色构型领域取得的重要成果,包括各级染色质构型特征的组成、建立机制和主要影响因素等。在此基础上,分析了目前研究植物染色质构型技术的瓶颈和突破性的技术进展,并对后续研究主要关注的问题和研究内容进行了展望,以期为相关领域的研究提供更多的理论参考和依据。     

大鼠肝细胞核纯化、染色质分部及染色质非组蛋白双向凝胶电泳分析

本文使用改良的超离心法制备了大鼠肝细胞核,通过相差显微镜、电镜、转录活力及三种酶活力的测定,证实了所得细胞核较纯,其产率约为5％。使用羟基磷灰石(HAP)柱层析对染色质分部,并测定了各分部的紫外光谱。同时测定了核、染色质、染色质疏松结合非组蛋白(UP)、去up—染色质(UC)和HAP柱各分部的化学组成。对up和酚抽提法制得染色质紧密结合非组蛋白(NP)分别进行了双向凝胶电泳图谱分析。     

正常及白血病小鼠白细胞染色质和DNA的酶切分析

 本文应用的核酸酶为DNaseⅡ、微球菌核酸酶与限制性内切核酸酶BstNI、EcoRⅡ、HpaⅡ和MspⅠ,将它们作用于正常小鼠615和可移植性白血病小鼠L7712脾脏白细胞染包质及其DNA,根据酶切电泳谱及水解动力学分析表明:1.白血病小鼠染色质相对正常小鼠染色质易被DNaseⅡ微球菌核酸酶水解;2.白血病小鼠染色质比正常小鼠者易被MspⅠ水解,但其DNA的MspⅠ酶切电泳谱无明显差别;3.白血病小鼠染色质及其DNA较正常小鼠染色质及其DNA易被EcoRⅡ水解。这些观察说明,白血病小鼠脾脏白细胞染色质有较活跃的构象状态;其染色质DNA的CCATGC区段内有较低的甲基化程度。