用平截末端使大豆根瘤菌苹果酸脱氨酶基因插入失活及电激法转化

本实验用平截末端连接法把卡那霉素抗性基因插入到大豆根瘤菌（Ｂｒａｈｙｒｈ;ｚｏｂｉｕｍｊａｐｏｎｉｃｕｍ）１１０的苹果酸脱氢酶（ｍｄｈ）基因中,致使ｍｄｈ基因失活,再通过电激法把这一重组基因转入大豆根瘤菌（Ｂｒａｈｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｊａｐｏｎｉｃｕｍ）２１４３中,进而探讨ｍｄｈ基因失活对大豆固氮作用的影响。     

野生大豆和栽培大豆光合机构对NaCl胁迫的不同响应

本文以东营野生大豆（Glycine soja Sieb. et Zucc. ZYD 03262）和山东栽培大豆（Glycine max (L.) Merr. 山宁11号）为实验材料,通过研究2种大豆植株和离体叶片对不同浓度NaCl（0,100和200 mM）处理的响应,探讨2种大豆光合机构对NaCl胁迫响应的差异和机理。结果表明：NaCl处理完整植株后,2种大豆植株叶片的光合速率（Pn）、PSII最大光化学效率（Fv/Fm）、PSII实际光化学效率（ΦPSII）和叶绿素含量都明显降低,而且生长也均受到抑制。但是,NaCl胁迫对栽培大豆各方面的抑制均显著大于野生大豆;野生大豆叶片中的Na 含量、Na /K 值都显著低于栽培大豆,而野生大豆根中的Na 含量却明显高于栽培大豆。当用100和200 mM NaCl处理2种大豆的离体叶片时,野生大豆的Fv/Fm、ΦPSII、单位面积有活性反应中心的数目（RC/CS）和光化学性能指数（PI）的下降幅度却显著大于栽培大豆;叶片中的Na 含量也显著高于栽培大豆。这些结果表明,实验所用的野生大豆的光合机构并不抗盐。但是,在盐胁迫条件下,野生大豆植株却能够有效地避免过多Na 进入叶片光合组织,以维持光合机构较高的光合活性,这是野生大豆比栽培大豆更抗盐的原因之一。     

大豆卵磷脂对小鼠的抗疲劳和抗氧化作用研究

目的：研究大豆卵磷脂的抗疲劳及抗氧化作用。方法：小鼠经口给予大豆卵磷脂30天后,采用负重游泳实验,观察记录小鼠游泳死亡时间;检测血清尿素氮、肝糖原;测定血清和肝匀浆超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）活力、丙二醛（MDA）含量。结果：给予大豆卵磷脂后,与对照组相比,实验组小鼠负重游泳时间明显延长,肝糖原消耗量减少,降低运动后血清尿素氮水平（P〈0．05）;升高小鼠血清和肝匀浆SOD活性及GSH-Px活力,降低MDA的含量（P〈0．05）。结论：大豆卵磷脂具有抗疲劳和抗氧化作用。     

大豆叶片C4循环途径酶

以不同产量水平的大豆（Glycine max(L.)Merr.)品种“黑农40”和“黑农37”为实验材料,研究了苗期,开花期,初荚期和鼓粒期等不同发育时期的叶片中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPCase),NADP－苹果酸氢酶（NADPMDH）,NADP－苹果酸酶（NADP－ME）,丙酮酸磷酸双激酶（PPDK）等C4途径的主要酶和1,5－二磷酸核酮糖羧化酶（RuBPCase）的活性变化,结果表明两种大豆叶片均含有上述4种酶,而且从PEPCase/RuBPCase的比值看,C4酶在高产大豆“黑农40”叶片中表达较高,表明C4循环途径与大豆产量密切相关,这一结果还暗示有可能通过检测C4途径酶的表达水平及比例,筛选出具有高产潜力的大豆种质。     

大豆异黄酮对大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径的影响

本实验研究了大豆异黄酮对SHZ-88大鼠乳腺癌细胞内cAMP／PKA信号途径的影响。实验设3组：空白对照组、50μg／ml大豆黄酮及15μg／ml染料木素组。采用放射免疫测定法（RIA）检测了胞内cAMP的浓度、腺苷酸环化酶（adenylate cyclase,AC）和磷酸二酯酶（phosphodiesterase,PDE）的活性,用（γ-^32P）ATP掺入法测定cAMP依赖性PKA的活性,半定量RT-PCR法分析cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein,CREB）mRNA表达的变化。结果表明：在处理后5min,大豆黄酮组和染料木素组细胞的cAMP浓度分别比对照组升高了9．5％和11．0％（P〈0．05）：10min时,分别比对照组升高31．0％和40.3％（P〈0．01）。3组细胞的AC活性在处理时间内没有明显变化。但在处理后5min,大豆黄酮组和染料木素组细胞的PDE活性分别降至对照组的71．8％和71．6％（P〈0．05）。处理后20min,大豆黄酮组和染料木素组细胞PKA活性分别上升到对照组的125．8％和122．3％（P〈0．05）;到40min时仍维持在高水平。大豆黄酮组和染料木素组细胞CREB mRNA的表达量在处理后3h分别比对照组增加31．6％和51．1％（P〈0．05）;6h后开始下降。这些结果提示,大豆异黄酮能够激活大鼠乳腺癌细胞内cAMP／PKA信号途径;而且是通过抑制磷酸二酯酶的活性,导致胞内cAMP浓度升高而实现的。     

外源赤霉素GA3对大豆光合作用的促进和叶片内源赤霉素GA1+3水平

在营养生长阶段大豆正在扩展和刚刚完全扩展的叶片（4-12天龄）观察到外源赤霉素GA3引起净光合速率增高,但是在成龄叶片（17-22天龄）观察不到这种效应（图1）。在扩展着的叶片（4-8天龄）中用免疫实验检测的内源赤霉素GA1 3含量低于成龄叶片中的含量（图2）。由这些结果得出结论：外源赤霉素GA3对大豆叶片光合作用的促进作用是以内源有生物活性的赤霉素含量低为前提的。     

大豆小肽促进益生菌增殖作用的研究

本实验复合蛋白酶酶解处理豆粕制备大豆小肽,酶解产物经SephadexG-25凝胶过滤层析,并对其各组分分子量分布及其促进益生菌发酵作用进行了研究,结果显示,大豆蛋白酶解物经SephadexG-25分离后得到了六个肽片段,分子量大部分在1 000 D以下,体外单细菌培养方法测定了大豆小肽对动物肠道常见益生菌的4个菌株（包括粪链球菌、蜡样芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、酵母菌）增殖的影响,结果表明SBP（Soybeanpeptides）能促进这4株细菌的增殖。添加大豆小肽后益生菌Q68与致病菌混合培养实验中,40 h内可以彻底清除金黄色葡萄球菌,48 h内可以完全消灭大肠埃希菌,大豆肽可以促进有益菌的增殖,抑制有害菌的生长。     

大豆疫霉根腐病抗源筛选

由大豆疫霉菌引起的大豆疫霉根腐病是大豆生产的重要病害,该病已在我国大豆主要产区发生,并在局部地区造成较大产量损失。利用抗病品种是防治大豆疫霉根腐病最有效的方法。本研究目的是筛选大豆疫霉根腐病抗源,为病害防治和抗病品种的选育提供参考。用下胚轴创伤接种方法对120个栽培大豆品种（系）进行接种,鉴定其对10个具有不同毒力大豆疫霉菌菌株的抗性。有110个品种（系）分别抗1～10个大豆疫霉菌菌株,其中以河南大豆品种（系）对疫霉菌的抗性最丰富,安徽、湖北和山西大豆品种（系）也具有抗性多样性。120个大豆品种（系）对10个大豆疫霉菌菌株共产生57个反应型,有4个抗性反应型分别与单个抗病基因的反应型一致,有7个抗性反应型与2个已知基因组合的反应型相同,其他抗性反应型为新的类型。一些大豆品种（系）中可能存在有效的抗大豆疫霉根腐病新基因。     

中国大豆品种生态区划的修正Ⅱ.各区范围及主要品种类型

根据我国各地256份代表性大豆地方品种在南京分期播种,延长或缩短光照长度各处理条件下的生育期表现,结合供试材料来源地的地理与气候条件,播种季节类型,熟期组类型以及光温反应特性等因素,将我国大豆品种生态区划分为：北方一熟制春作大豆品种生态区（Ⅰ）,黄淮海二熟制春夏作大豆品种生态区（Ⅱ）,长江中下游二熟制春夏作大豆品种生态区（Ⅲ）,中南多熟制春夏秋作大豆品种生态区（Ⅳ）,西南高原二熟制春夏作大豆品种生态区（Ⅴ）,华南热带多熟制四季大豆品种生态区（Ⅵ）等六大区,10亚区,并阐述各区的一般生态条件及代表生态类型。     

用三粒黄豆进行的一组酶的实验

用三粒黄豆进行的一组酶的实验陈平平（南京教育学院生物学系２１００１７）孙美姝（南京市第三中学２１０００２）本文介绍用黄豆种子进行“酶是生物催化剂，具有高效性、专一性和多样性”的一组简便、快速的实验方法。大豆（ＧｌｙｃｉｎｅｍａｘＬ．Ｍｅｒｒ）约合脂肪...     

代表性大豆种质异黄酮主要组分含量鉴定

采用HPLC检测方法,对100份不同来源的代表性大豆种质进行异黄酮含量分析,结果显示大豆种质中主要含有6种异黄酮组分,分别为黄豆苷（D）、黄豆黄苷（GL）、染料木苷（G）、丙二酰基黄豆苷（MD）、丙二酰基黄豆黄苷（MGL）和丙二酰基染料木苷（MG）,且异黄酮含量在不同生态区间和品种间均存在显著差异,变异丰富;南方产区大豆品种的异黄酮总含量最高（2465.48ug/g）,黄淮大豆产区次之（2308.48ug/g）,北方大豆产区最低（1705.89ug/g）;6 种主要异黄酮组分含量的变异系数变化范围为33.44%～52.03%。相关分析表明异黄酮总含量与各主要组分含量之间均呈极显著正相关,与脂肪含量呈极显著负相关（r = -0.323**）。在此基础上,筛选出高异黄酮含量的大豆种质2份,分别为平顶黑豆（4459.91 ug/g）和PI-567479（4073.95 ug/g）,低异黄酮含量的大豆种质2份,分别为茶色豆（857.74 ug/g）和牡丰1号（922.82 ug/g）,可以用于大豆异黄酮育种或遗传研究。     

大豆黄酮对母猪免疫功能和血清及初乳中GH、PRL、SS水平的影响

研究口服大豆黄酮对妊娠母猪及其仔猪的免疫功能和血清、初轧中生长激素（ＧＨ）、催乳素（ＰＲＬ）、生长抑素（ＳＳ）水平的影响，结果表明：１）大豆黄酮能明显提高母猪血清和初乳中特异性抗体（猪瘟抗体或溶血素）的水平，表明母猪整体和乳腺器官的体液免疫功能明显增强。２）通过对初乳的吸收，其新生仔猪血清中母源抗体水平明显高于对照组。３）母猪血清和初乳中ＧＨ、ＰＲＬ含量明显高于对照组，而血清ＳＳ含量显著低于对照组。本实验结果提示：垂体ＰＲＬ、ＧＨ和体内ＳＳ可能参与了大豆黄酮对猪免疫功能的调节过程。     

豆科植物的体细胞杂交

包括许多重要粮食和饲料作物在内的豆科植物的体细胞杂交研究已有20多年历史。早在70年代，Kao等[15]即利用豌豆、大豆原生质体与其它植物原生质体进行融合，观察到可以分裂的大豆（＋）豌豆、玉米（＋）大豆、小麦（＋）大豆异核体，大麦和大豆融合细胞最后形成细胞团，同时指出核融合发生在融合后的第一次分裂过程中。1974年，Kartha等[16]将大豆（Glycinemax）悬浮培养细胞原生质体与油菜原生质体融合，也得到细胞团。1976年，Constabel等[10]得到了大豆悬浮培养细胞与豌豆、Viciahajastana（一种野豌豆）、烟草、番红花叶肉细胞原生质…     

田间大豆叶片光合作用与活性氧清除酶的日变化

开花期大豆叶片光合速率（Pn）在晴天中午伴随气孔导度（Gs）下降而降低,而叶温（TL）、光呼吸速率（Pr）以及Pr／Pn比值在中午前后明显上升。胞间CO2浓度（Ci）在上午下降,之后则逐渐增加。在最高光量子通量密度（PFD）低于1．2mmol·m-2·s-1的多云天气,大豆叶片Pn与Pr的日变化依赖于PFD、Ci与Pr／Pn比值在一天中基本恒定。晴天与多云天气大豆叶片细胞活性氧清除系统的超氧物歧化酶（SOD）、过氧化氨酶（CAT）、谷胱甘肽还原酶（GR）与抗坏血酸过氧化物酶（ASA－POD）活性均出现明显的日变化,中午前后酶活性明显增加。文中讨论了大豆叶片细胞活性氧清除酶系统日变化的适应性意义。     

大豆皂甙对高盐饮食小鼠血压和肠道菌群的影响

目的：探究大豆皂甙通过影响肠道菌群对高盐引起的小鼠高血压的调控,并筛选起到稳定血压作用的目标肠道菌群,为新的功能食品和益生菌的开发提供科学依据。方法：15只健康成年雄性小鼠被随机分成3组：（1）喂食含0.5%NaCl的饲料（正常饮食,NSD组）;（2）喂食含8%NaCl的饲料（高盐饮食,HSD组）;（3）喂食含8%NaCl的饲料,高盐饮食9w后,饮食中添加大豆皂甙Bb,持续3w（高盐饮食+大豆皂甙,HSD_SI组）。实验结束前,分别收集3组小鼠新鲜粪便,提取粪便总DNA,并对16s rDNA的V3 V4区进行高通量测序,微生物多样性分析和差异OTU比对。结果：大豆皂甙可以显著降低由高盐饮食诱导的小鼠血压升高。同时减少部分在高盐饮食过程中显著增加的OTU的丰度,这部分OTU中可能包含使机体血压升高的有害菌;另外使部分在高盐饮食过程中减少的OTU的丰度得到恢复和增加,这部分OTU中可能存在潜在的可以降低机体血压的益生菌。推论：大豆皂甙可能通过影响肠道菌群而调控血压。     

不同寄主植物对截形叶螨生长发育及繁殖的影响

在28℃下用叶盘法研究了５种寄主植物对截形叶螨生长发育及繁殖的影响。结果表明,在不同寄主植物上,截形叶螨各螨态历期、单雌产卵量、日均产卵量、产卵期、净增殖率、周限增长率、内禀增长率、世代平均周期和种群加倍时间等均有明显差异; 雌螨完成一代所需时间长短依次为9.3天（黄瓜）、9.3天（菜豆）、9.6天（大豆）、11.0天（茄子）和11.6天（玉米）,产卵期依次为9.9天（茄子）、11.2天（黄瓜）、12.9天（菜豆）、15.8天（玉米）和17.9天（大豆）;单雌产卵量和净增殖率在大豆上最高,分别为115.0和51.7,而在茄子上最低,分别为38.0和11.7。幼、若螨期存活率大小依次为93.6%（大豆）、91.7%（玉米）、89.9%（黄瓜）、84.3%（菜豆）和61.6%（茄子）,存活曲线均为Ⅰ型。大豆是其最嗜食寄主植物,其次是玉米,再次为黄瓜和菜豆,对茄子的嗜食性最差。     

大豆品种(系)和种植密度对豆天蛾幼虫存活及生长发育的影响

豆天蛾Clanis bilineata tsingtauica Mell幼虫,是一种食用昆虫,富含蛋白质、维生素和矿质元素,具有很高的营养、药用和经济价值。了解适宜豆天蛾幼虫生长发育的大豆品种（品系）和种植密度,可为豆天蛾幼虫规模化饲养提供理论基础。研究通过设置两因素裂区实验,在10个品种（品系）大豆和2个种植密度水平下,测定豆天蛾幼虫生物学参数,明确适宜豆天蛾幼虫养殖的大豆品种（品系）和种植密度。结果表明,不同大豆品种（系）和种植密度对豆天蛾幼虫存活及生长发育均有显著影响;其中使用连151、淮豆9号、东辛3号和H0573大豆饲养的豆天蛾幼虫产量和存活率较高,虫体长度较长,发育历期较短;大青豆饲养的豆天蛾幼虫产量较低,幼虫发育整齐度较差,发育历期长。当种植密度为40 cm×30 cm时,豆天蛾幼虫存活和发育历期整齐度均显著高于种植密度40 cm×15 cm。综上所述,较适宜豆天蛾幼虫养殖的大豆品种（品系）为连151、淮豆9号、东辛3号和H0573,种植密度为40 cm×30 cm。     

硫素对不同大豆品种成熟期AM真菌群落多样性的影响

研究硫素对不同大豆品种成熟期丛枝菌根（arbuscular mycorrhizal,AM）真菌群落多样性的影响,探索有利于提高3个特定大豆品种根围土壤和根系AM真菌多样性的最佳施硫量,为提高大豆产量和改善大豆品质提供理论依据。试验采用盆栽,选用黑农44（HN44）、黑农48（HN48）、黑农37（HN37）3个大豆品种作为试验材料,设4个硫素处理S1（对照）,S2（0.02g/kg）,S3（0.04g/kg）和S4（0.06g/kg）。采用PCR-DGGE技术分析3个大豆品种根围土壤和根系中AM真菌群落多样性。结果表明：在S2处理下HN37和HN44根围土壤和根系AM真菌多样性最高,而在S3处理下HN48根围土壤和根系AM真菌多样性最高;DGGE图谱中各样品优势种群变化显著,球囊霉属Glomus和柄囊霉属Funneliformis真菌为3个大豆品种根围土壤和根系中AM真菌的优势菌群。由此可见,硫素对不同大豆品种根围土壤和根系AM真菌群落多样性有显著影响,适量施硫能够提高大豆根围土壤和根系中AM真菌的多样性,不施或过高施硫反而抑制AM真菌的多样性。     

响应面法优化酶法水解大豆异黄酮糖苷

采用 Design-Expert 软件中 Central Composite Design（CCD）响应面分析方法对β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷的4个主要因素（水解温度、水解时间、pH 以及加酶量）进行优化。方差分析发现,影响大豆异黄酮糖苷水解最主要的因素有温度、水解时间和 pH。对各因素进行回归拟合,得到最佳实验条件分别为：温度46．2℃,反应时间94 min,pH 5．1,酶量61单位,此时大豆异黄酮苷元含量达到0．096 g·L－1,比优化前提高了22％。     

大豆成熟种子萌发叶片体细胞胚的高频诱导和遗传转化（英文）

目的 虽然大豆遗传转化取得了较大进展,但其转化效率仍然偏低。因此,有必要建立一个更加简单和高效的大豆转化系统。本研究的目的是以大豆成熟种子萌发产生的叶片（MSDL）为靶外植体,高频诱导和转化大豆体细胞胚（somatic embryos,SEs）。方法 萌发7 d的大豆幼苗上摘取叶片,并将其切成1.2 cm×1.2 cm的外植体。将叶片外植体置于胚胎诱导培养基（EIM）上诱导体细胞胚发生。将叶片外植体浸入携带p CAMBIA1301植物表达载体的农杆菌EHA105菌液进行遗传转化。结果 MSDL （包括初生叶和次生叶）均能被诱导产生SEs。大多数SE发生在叶片切口处。所试的不同基因型均能诱导SEs。SEs的最高诱导率为95.0%。β葡糖醛酸糖苷酶（GUS）染色结果表明,平均转化效率达到75.4%。DNA印迹（Southern blot）结果表明,目的基因稳定整合在大豆基因组中,拷贝数为1～3个。结论 本研究建立了以大豆MSDL为靶组织的体细胞胚高频诱导和遗传转化。该系统有望在大豆基因组编辑技术的开发上得到应用。