EphA3基因稳定表达细胞模型的建立与分析

目的：建立稳定表达外源EphA3基因的小鼠成纤维细胞株模型,初步探讨EphA3基因表达对肿瘤发生、发展的影响。方法：通过脂质体介导的方法,将真核表达载体pcDNA3.1（-）/myc-his-EphA3转染NIH3T3细胞,用Western印迹确定外源EphA3基因表达;通过MTT实验、软琼脂集落形成实验,观察EphA3基因表达对NIH3T3细胞生物学特性的影响。结果：建立了稳定转染EphA3基因的NIH3T3细胞株;EphA3基因表达的小鼠成纤维NIH3T3细胞生长速度没有明显变化,但在软琼脂上锚着非依赖生长的能力加强。结论：建立了稳定表达外源EphA3基因的NIH3T3细胞株,EphA3基因稳定表达具有诱导正常NIH3T3细胞发生恶性转化的重要生物功能。     

信号转导和转录活化因子3通过趋化因子CX3C配体1促进血管内皮细胞增殖迁移

信号转导和转录活化因子3 (STAT3)与趋化因子CX3C配体1 (Fractalkine/CX3CL1)在血管炎症和损伤中起重要作用,为了探讨STAT3是否通过CX3CL1促进血管内皮细胞增殖和迁移,在血管内皮细胞(HUVEC)中过表达或敲降STAT3,通过quantitative real-time PCR、Western blotting实验确定STAT3对CX3CL1表达的影响。构建含有STAT3结合位点及突变STAT3结合位点的CX3CL1启动子荧光素酶报告基因质粒,利用荧光素酶活性分析实验研究STAT3对CX3CL1启动子转录活性的作用。利用MTT实验检测过表达或敲降STAT3或CX3CL1对血管内皮细胞增殖率的影响。利用划痕实验检测过表达或敲降STAT3或CX3CL1对血管内皮细胞迁移率的影响。结果显示,过表达STAT3可以促进CX3CL1表达,敲降STAT3可以使CX3CL1表达下调。STAT3可以直接结合到CX3CL1的启动子促进其转录激活,其促进作用依赖于CX3CL1启动子上的GAS位点。敲降STAT3可以抑制血管内皮细胞的迁移,过表达CX3CL1拮抗该抑制作用。总结得出,STAT3通过结合到CXCL1启动子促进CX3CL1转录与表达进而促进血管内皮的增殖与迁移。     

人组氨酸磷酸酶蛋白PHP14的过表达及其对NIH-3T3细胞体外增殖和非锚定依赖性生长的影响

目的:获取人组氨酸磷酸酶蛋白PHP14基因,并构建其N端和C端GFP融合的真核表达载体,建立过表达PHP14的NIH-3T3细胞系,并观察其对NIH-3T3细胞体外增殖和非锚定依赖性生长的影响.方法:以HeLa cDNA为模板,PCR扩增PHP14的全长编码基因,分别克隆到pEGFP-N2和pEGFP-C3载体中,构建pEGFP-N2-PHP14和pEGFP-C3-PHP14真核表达载体,利用脂质体将构建的载体转染到NIH-3T3细胞中,MTT法检测细胞增殖,软琼脂成集落法检测体外非锚定依赖性生长能力.结果:成功构建了过表达PHP14的真核表达载体pEGFP-N2-PHP14和pEGFP-C3-PHP14,并在NIH-3T3细胞中检测到了目的基因的过表达,PHP14在NIH-3T3细胞中过表达并不影响NIH-3T3细胞的体外增殖,但赋予了NIH-3T3细胞非锚定依赖性生长的能力.结论:成功构建了过表达PHP14的NIH-3T3细胞模型,在NIH-3T3细胞中过表达PHP14并不影响NIH-3T3细胞的体外增殖,但赋予了NIH-3T3细胞非锚定依赖性生长能力.     

14-3-3:保护性信号转导调节蛋白

14 3 3蛋白家族是真核细胞中高度保守的可溶性蛋白。在哺乳动物 ,14 3 3蛋白主要存在于脑。 14 3 3蛋白与许多蛋白结合 ,在细胞凋亡、生长、增殖的信号转导过程中发挥关键的调节作用 ,是细胞内重要的保护性蛋白。 14 3 3蛋白还是一些脑疾病的诊断标志。 14 3 3蛋白有可能成为治疗一些疾病的靶点     

RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌细胞增殖的影响

旨在研究RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌NCI-H460细胞增殖的影响。针对STAT3基因mRNA设计合成5条短发夹DNA,构建重组SiRNA-ST3质粒(命名为SiRNA-ST3-1,2,3,4,N)。用重组质粒分别转染NCI-H460细胞,RT-PCR法检测转染24 h后STAT3 mRNA的表达;Western blotting法检测转染24 h和48 h后STAT3、pSTAT3蛋白表达;MTT法检测转染24 h、48 h、72 h后NCI-H460细胞增殖情况。结果显示,SiRNA-ST3载体构建成功。RT-PCR和Western blotting检测结果表明,NCI-H460细胞转染重组质粒SiRNA-ST3-2和SiRNA-ST3-3后STAT3基因mRNA转录和STAT3、pSTAT3蛋白表达都明显下降(P<0.05)。与未转染组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力24 h、48 h降低明显(P<0.05);与SiRNA-ST3-N组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力48 h降低明显(P<0.05)。由此证实,构建的重组质粒SiRNA-ST3-2、SiRNA-ST3-3能有效靶向沉默STAT3基因,并抑制人大细胞肺癌NCI-H460细胞的增殖能力。     

产淀粉脱支酶菌株XUEX3的分离及其诱变选育

本研究以铜山烟草(中烟100)生产田根际土壤为材料,通过以支链淀粉作为碳源的固体鉴别培养基的分离培养获得3株产淀粉脱支酶菌株,将其依次编号为XUEX1、XUEX2和XUEX3,采用DNS法测定了3株菌的产酶活性,经过32h的连续发酵,XUEX3菌株的酶活性峰值达到了16.3 U/mL,XUEX1和XUEX2的峰值均未超过9 U/mL.选取产酶活性最高的XUEX3作为出发菌株进行紫外线诱变选育.结果 表明,试验获得的3个正突变菌株XUEX3-1、XUEX3-2和XUEX3-3的产淀粉脱支酶活性与出发菌株相比均有显著提高,其中XUEX3-3的HC值达到了出发菌株XUEX3的3.2倍;经过32 h的连续发酵,XUEX3-1、XUEX3-2和XUEX3-3产酶活性的峰值分别为39.7 U/mL、43.1 U/mL和35.3 U/mL;与对照相比,突变株XUEX3-2的产酶峰值出现的时间提前了4h,XUEX3-1和XUEX3-3的则推迟了4h,但经过连续5代的传代培养,正突变菌株XUEX3-1、XUEX3-2和XUEX3-3的遗传稳定.研究结果丰富了产淀粉脱支酶菌株的遗传资源库,为后期的应用开发提供了更多选项.     

基因甲基化导致鼻咽癌组织14-3-3σ表达下调

为探讨14-3-3σ基因甲基化在鼻咽癌发病中的作用,以75例鼻咽癌活检组织和25例正常鼻咽黏膜活检组织作为研究对象,采用甲基化特异性聚合酶链式反应 (MSP)检测14-3-3σ基因甲基化状态,逆转录聚合酶链式反应 (RT-PCR)检测　14-3-3σ mRNA表达,免疫组织化学染色检测14-3-3σ蛋白质表达．结果发现,鼻咽癌组织14-3-3σ基因完全甲基化、不完全甲基化和未甲基化的例数分别为4例、59例和12例,正常鼻咽黏膜组织不完全甲基化和未甲基化的例数分别为7例和18例,鼻咽癌14-3-3σ基因甲基化频率显著高于正常鼻咽黏膜组织(84% vs 28%,χ2=28,P < 0.05)．RT-PCR和免疫组织化学染色结果显示：14-3-3σ基因完全甲基化的组织样本无14-3-3σ表达,不完全甲基化的组织样本14-3-3σ表达显著降低,14-3-3σ基因甲基化与鼻咽癌淋巴结转移及鼻咽癌临床分期正相关． 研究结果表明,鼻咽癌组织14-3-3σ基因存在高频甲基化,14-3-3σ基因甲基化导致14-3-3σ表达降低或缺失,14-3-3σ表达水平与鼻咽癌淋巴结转移及其临床分期相关．     

新构建的含DF3启动子和白喉毒素A片段的重组表达载体对人乳腺癌细胞的特异性杀伤作用

目的研究新构建的含人乳腺癌DF3启动子和白喉毒素A片段的重组表达载体PGL3-DF3-DTA对人乳腺癌细胞的影响。方法构建重组表达载体PGL3-DF3-DTA,并用其转染DF3阳性和阴性的乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231。通过MTT法测定PGL3-DF3-DTA在体外对乳腺癌细胞生长的影响,建立裸鼠动物模型观察PGL3-DF3-DTA在体内对乳腺癌细胞的杀伤效应。结果成功构建出重组表达载体PGL3-DF3-DTA并建立了人乳腺癌裸鼠动物模型,经重组表达载体PGL3-DF3-DTA作用后的DF3阳性人乳腺癌细胞出现明显的凋亡现象,Ki-67、bcl-2基因表达水平降低,bax基因表达水平升高。结论重组表达载体PGL3-DF3-DTA能对DF3阳性的乳腺癌细胞产生特异性杀伤作用。     

干细胞因子逆转录病毒表达载体的构建及体外性质研究

目的通过逆转录病毒介导两种类型人干细胞因子在NIH3T3细胞中稳定表达,并研究它们对白血病细胞的作用。方法用DNA重组技术构建并鉴定可溶型及膜结合型干细胞因子的重组逆转录病毒表达载体MSCV—PGK—GFP—sSCF、MSCV—PGK—GFP—mSCF,与空载体对照MSCV—PGK—GFP分别转染Phoenix细胞包装病毒,并感染NIH3T3细胞,流式分选术获得3种阳性细胞,CCK8法分别检测与其共培养的K562细胞的增殖情况。结果成功构建了sSCF、mSCF逆转录病毒表达载体;经Phoenix包装的重组及对照逆转录病毒成功感染NIH3T3细胞,获得了稳定表达细胞株NIH3T3-S、NIH3T3-M和对照细胞株NIH3T3-V。共培养中NIH3T3-S、NIH3T3-M均可促进K562细胞的增殖,且在低血清条件下,NIH3T3-M的作用高于NIH3T3-S。结论可溶性及膜结合SCF分别通过旁分泌和并置性作用促进白血病细胞的增殖。     

植物叶面吸收~3H-GA_3速率的类双曲线特性(简报)

采用氖(~3H)示踪法测定3种植物(葡萄、大豆和水稻)叶面吸收~3H-GA_3 的时间进程表明,3种植物叶面吸收~3H-CA_3 的平均速率与时间的关系具有类似于双曲线的特性。     

Some New Taxa and New Records of Scenedesmus from China

Anhui Province is situated in the subtropical and temperate zones. With favorable climate this district is rich in algae. During 1982-1986, the author made a number of collections of the algal specimens-about 1000 samples from 36 counties and cities of the province. The identification result shows that there are about 30 species and 15 varieties of Scenedesmus in the province. In present paper, however, reported are only some new taxa and new records of Scenedesmus. The 4 new species are Scenedesmus anhuiensis, S. huangshanensis, S. quadrialatus and S. wuhuensis, the 2 new varieties are Scenedesmus prismaticus var. spinosus and S. smithii var. spinulosus, and the 4 new records of distribution in China are Scenedesmus denticulatus var. australis Playfair, S. prismaticus Bruhl et Biswas, S. quadricauda var. dentatus Dedussand S. smithii Teiling.     

安徽植物增补及地理新分布II

本文第二次增补《安徽植物志》未记入的植物22种5变种。其中20种3变种为安徽地理新分布, 3属(白屈菜属、离子芥属和石莲属)为安徽地理新分布属。本文所引用的植物标本,全部收藏于安微大学资源植物标本室。     

值得注意的中国南部植物

通过整理和研究华南植物园标本馆(IBSC)、中山大学植物标本馆(SYS)等馆藏标本,发现我国南部生长的而在《中国植物志》或“Flora of China”有未收载的物种及需处理1个新组合和2个新异名外,还有省级新记录等情况。现补充增加3个归化种白花假马鞭、毛苘麻和大花假番薯;广西2个新记录夜牵牛和红岩野桐(新组合);广东1个新记录粘毛苘麻,并处理本种的1个新异名;粗糠柴为西藏新记录。此外,处理隶于东南野桐的1个新异名;补充隶于草牵牛的1个异属名。     

值得注意的中国植物

近年为研究中国的大戟科、檀香科等科的植物,对中山大学生物系植物标本馆（ＳＹＳ）、华南植物研究所标本馆（ＩＢＳＣ）等的标本予以重新鉴定．现将中国植物区系中一些属或种作必要的修订,增加《中国植物志》未收载的２个新记录种,处理１个新异名．     

大兴安岭阿尔山沼泽鼓藻类中国新记录

大兴安岭阿尔山是我国沼泽分布最集中的地区之一,其中鼓藻类植物十分丰富。2004年7月,2005年8月、10月和2006年5月,作者先后4次在该地区采集标本共260号,在对标本鉴定过程中,发现有中国新记录鼓藻10个分类单位,隶属于4个属,包括8种2变种:厚皮鼓藻加厚变种Cosmarium pachydermumvar.incrassatum、穿孔鼓藻C.perforatum、伸长鼓藻C.protractum、具齿角星鼓藻Staurastrum denticulatum、不等角星鼓藻S.dispar、分叉角星鼓藻具螺纹变种S.furcigerumvar.armigera、近阿维角星鼓藻S.subavicula、近十字角星鼓藻S.subcruciatum、超凡叉星鼓藻Staurodesmus insignis和孟它凹顶鼓藻Euastrum montanum。     

菊科新资料

记述了菊科6个属的一些新分类群和新分布,包含1个新组、3个新种、3个新变种、1个新名称、1个新组合和5个种的新记录。这些新分类群是黄鹌菜属蓝舌组、振铎黄鹌菜、蓝花黄鹌菜、青海乳苣、黄苞垂头菊、尼泊尔橐吾和半裂橐吾。     

Novelities of Asteraceae

Seven new taxa, including one new section, three new species and three new varieties, are described; one new name, Ligularia pojarkovana S. W. Liu et T. N. Ho, and one new combination, Ligularia liatroides (C. Winkl.) Hand.-Mazz. var. shifangensis (G. H. Chen et W. J. Zhang) S. W. Liu et T. N. Ho are made; five species are mentioned as new records. The seven new taxa are Youngia sect. Cyanoglossa S. W. Liu et T. N. Ho, Youngia zhenduoi S. W. Liu et T. N. Ho, Y. cyanea S. W. Liu et T. N. Ho, Mulgedium qinghaicum S. W. Liu et T. N. Ho, Cremanthodium campanulatum (Franch.) Diels var. flavidum S. W. Liu et T. N. Ho, Ligularia amplexicaulis DC. var. nepalensis S. W. Liu et T. N. Ho, and L. paradoxa Hand. Mazz. var.palmatifida S. W. Liu et T. N. Ho.     

华南植物的增补

报道华南地区3种植物：山柚子科的茎花山袖（Champereiamanillanavar．longistamined）是新组合的变种,其花序和嫩叶可供蔬食;大朝科的美洲珠子草（Phyllanthusamarus）是具有药用价值的归化种;台湾核果木（Drypetesformosana）生长于珠江口东侧的海岛,为广东新纪录种。     

The grass genus Andropogon in the United States

A key is provided for Andropogon and the segregate genera, Schizachyrium, Bothriochloa, and Dichanthium, as represented in the United States. Included also is a listing of the native and introduced species of each: 17 species of Andropogon (all native) ; 11 species of Schizachryium (all native) ; 14 species of Bothriochloa (8 native + 6 introduced) ; 3 species of Dichanthium (all introduced). New combinations are proposed for: Schizachryium niveum; S. rhizomatum; S. sericatum; S. scoparium var. divergens, var. frequens, var. littoralis, var. neomexicanum, and var. virile.     

A taxonomical study on the genus Kengyilia Yen et J. L. Yang

Kengyilia Yen et J L Yang is a recently established genus in trib. Tritieeae of Poaceae. In this paper, this genus is taxonomically revised, and a new taxonomic system is presented. The new system includes 3 sections, 26 species and 6 varieties, of which 3 sections and 1 species are described as new, 7 taxa are treated respectively in the ways of new status or combination and reduction. Three new sections, sect. Kengyilia, sect. Stenachyra L. B. Cai and sect. Hyalolepis (Nevski) L. B. Cai, are differentiated by the length and width of spike, the growing position of spikelet, the relative length of glume, the colour of anther and so on. The sect. Kengyilia contains 9 species, distributed in northwestern China, extending westward to Kazakhstan, Kirghizia, Tadzhikistan, Afghanistan and Iran; the sect. Stenachyra L. B. Cai comprises 10 species and 3 verieties, distributed in western China, mainly in the Qinghai-Xizang Plateau; and the sect. Hyalolepis (Nevski) L. B. Cai consists of about 7 species and 3 varieties, distributed in western China, extending westward to Kirghizia and Tadzhikistan. Twenty-six species of Kengyilia are recognized on the basis of the same criterion of specific concept, and the other taxa below the rank of species are also checked in terms of their external morphology. As a result, Kengyilia pen~ dula L. B. Cai is reported as a new species; K. hirsuta var. obviaristata L. B. Cai is raised to a species; K. melanthera (Keng) J. L. Yang, Yen et Baum is reduced to a variety under K. thoroldiana (Oliver) J. L. Yang, Yen et Baum; Roegneria hirsuta var. leiophylla Keng et S. L. Chen is reduced as a synonym of K. hirsuta var. hirsuta; Agropyron thoroldianum var. lasciusculum Melderis is reduced to K. grandiglumis (Keng et S. L. Chen) J. L. Yang, Yen et Baum; Roegneria rigidula var. intermedia Keng et S. L. Chen to K. rigidula (Keng et S. L. Chen) J. L. Yang, Yen et Baum; R. hirsuta var. variabilis Keng et S. L. Chen and R. rnelanthera var. tahopaica Keng et S. L. Chen to K. hirsuta (Keng et S. L. Chen)J. L. Yang, Yen et Baum. In addition, new records onthe geographical distributions of some taxa are also reported in this paper.