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人组氨酸磷酸酶蛋白PHP14的过表达及其对NIH-3T3细胞体外增殖和非锚定依赖性生长的影响
引用本文:徐安健,崔永,赵高潮,乌姗娜,吕志,靳庆娥,谷俊朝.人组氨酸磷酸酶蛋白PHP14的过表达及其对NIH-3T3细胞体外增殖和非锚定依赖性生长的影响[J].中国生物工程杂志,2013,33(6):7-11.
作者姓名:徐安健  崔永  赵高潮  乌姗娜  吕志  靳庆娥  谷俊朝
作者单位:1. 首都医科大学附属北京友谊医院 北京 100010; 2. 首都医科大学附属北京友谊医院病毒室 北京 100010; 3. 首都医科大学附属北京友谊医院胸外科 北京 100010; 4. 首都医科大学附属北京友谊医院检验科 北京 100010
摘    要:目的:获取人组氨酸磷酸酶蛋白PHP14基因,并构建其N端和C端GFP融合的真核表达载体,建立过表达PHP14的NIH-3T3细胞系,并观察其对NIH-3T3细胞体外增殖和非锚定依赖性生长的影响.方法:以HeLa cDNA为模板,PCR扩增PHP14的全长编码基因,分别克隆到pEGFP-N2和pEGFP-C3载体中,构建pEGFP-N2-PHP14和pEGFP-C3-PHP14真核表达载体,利用脂质体将构建的载体转染到NIH-3T3细胞中,MTT法检测细胞增殖,软琼脂成集落法检测体外非锚定依赖性生长能力.结果:成功构建了过表达PHP14的真核表达载体pEGFP-N2-PHP14和pEGFP-C3-PHP14,并在NIH-3T3细胞中检测到了目的基因的过表达,PHP14在NIH-3T3细胞中过表达并不影响NIH-3T3细胞的体外增殖,但赋予了NIH-3T3细胞非锚定依赖性生长的能力.结论:成功构建了过表达PHP14的NIH-3T3细胞模型,在NIH-3T3细胞中过表达PHP14并不影响NIH-3T3细胞的体外增殖,但赋予了NIH-3T3细胞非锚定依赖性生长能力.

关 键 词:PHP14  过表达  增殖  非锚定依赖性生长  
收稿时间:2013-02-15

The Overexpression of PHP14 and Its Effect on NIH-3T3 Cells Proliferation in vitro and Anchor Independent Growth
XU An-jian,CUI Yong,ZHAO Gao-chao,WU Shan-na,L&#,Zhi,JIN Qing-e,GU Jun-chao.The Overexpression of PHP14 and Its Effect on NIH-3T3 Cells Proliferation in vitro and Anchor Independent Growth[J].China Biotechnology,2013,33(6):7-11.
Authors:XU An-jian  CUI Yong  ZHAO Gao-chao  WU Shan-na  L&#  Zhi  JIN Qing-e  GU Jun-chao
Abstract:
Keywords:PHP14  Overexpression  Cell proliferation  Anchor independent growth
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