姜黄素对晚期宫颈癌患者Bcl-xL、Bcl-2、EphA2及EphrinA1表达的影响

目的:探究姜黄素对宫颈癌晚期放疗患者Bcl-x L、Bcl-2、Eph A2与Ephrin A1表达的影响。方法:收集160例晚期宫颈癌放疗患者的宫颈癌石蜡标本,分为姜黄素组与对照组,均给予放射治疗,姜黄素组放疗期间加服姜黄素片剂,采用免疫组化等实验方法,观察两组病例标本Bcl-x L、Bcl-2、Eph A2与Ephrin A1的表达情况,比较两组病理标本化疗前后的凋亡细胞指数(AI)与微血管密度(MVD)。结果:姜黄素组的Bcl-x L、Bcl-2、Eph A2与Ephrin A1的表达阳性率分别为8.3%、43.33%、46.67%、15.0%,均显著低于对照组(P0.05);放疗后姜黄素组的AI显著高于对照组(P0.05),MVD显著低于对照组(P0.05)。结论:姜黄素可抑制Bcl-x L、Bcl-2的表达以促进肿瘤细胞凋亡,同时降低Eph A2与Ephrin A1的表达以减少肿瘤微血管形成,有显著的抗肿瘤与放疗增敏作用。     

鲫鱼生长激素Ⅰ基因内含子2的多态性分析

利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Denaturing-Polyacrylamid Gel Electrophoresis,DPAGE)和单链构象多态性(Single-Strand Conformation Polymorphism,SSCP)分析技术,在普通鲫鱼种群(7个野生鲫鱼群体和2个金鱼群体)和银鲫种群(1个方正银鲫群体)共162个个体生长激素Ⅰ(Growth HormoneⅠ,GHⅠ)基因的内含子2中检测到丰富的长度和序列多态性。在所有群体中,GHⅠ基因内含子2的长度存在7种类型,分别为A、B、c、D、E、F和G型,变异频率为4．32％;其序列存在15种单倍型,分别为Al、A2、A3、B、c1、C2、Dl、D2、D3、D4、D5、E1、E2、F和G型,变异频率为9．26%。对这15种单倍型的DNA序列进行分析,结果表明：1)鲫鱼GHⅠ基因内含子2的扩增DNA片段长为243～263bp,其中包括部分外显子2(3’端,33bp)、内含子2和部分外显子3(5’端,2lbp)。15种单倍型A、T、G、C碱基平均百分比组成分别为34．13％、37．36％、15．130A,、13．38％,其中G C(28．5l％)含量明显小于A T(71．49%)含量。内含子2与外显子2、3的接头区存在GT-AG保守序列,此为真核基因中mRNA剪接的识别信号。内含子2的5’端存在有一序列为GTAAGAT的保守区域,在其近3’端分布有一高丰度嘧啶区;2)内含子2的7种长度类型A、B、C、D、E、F和G型分别为189、196、204、205、206、207和209bp,其差异主要由单碱基T重复次数N不同(Ⅳ：0、8、9、10、11和13)和3种序列(TGAAAAC、TT和GAGTG)中1种或2种序列的缺失所引起;3)内含子2的15种单倍型的核苷酸序列中共有17个突变位点,包括2个碱基颠换突变位点和15个碱基转换突变位点,碱基转换突变频率为88．24％,明显高于颠换突变频率(11．76％)。普通鲫鱼种群中金鱼群体D11b、Dhr的GHⅠ基因内含子2均为长度类型A,含有两种序列单倍型(以下简称单倍型)即A1和A2;野生鲫鱼群体的内含子长度和序列变异较大,检测到A、B、C、D、E、F、G7种长度类型和14种单倍型(A1、A2、A3、B、C1、C2、D1、D2、D3、D4、E1、E2、F和G型)。在银鲫种群CaG中检测到c和D两种长度类型和4种序列单倍型(C1、C2、D2和D5),其中D5仅在此种群中检测到。     

Mina53在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨mina53基因在胃癌组织中的表达及其与临床分期的相关性.方法:分别应用RT-PCR和免疫组化技术,检测71例胃癌患者组织标本以及20例癌旁组织中mina53基因和蛋白的表达水平,并分析其与胃癌临床分期的相关性.结果:(1)RT-PCR结果显示20例癌旁组织中仅2例mina53基因呈弱阳性表达,阳性率为10.00％;71例胃癌组织标本中有43例mina53基因表达阳性,阳性率为60.56％ (P＜0.05);其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期胃癌组织标本中的阳性比例分别为11/23、15/29、12/14及5/5(P＜0.05).(2)免疫组化结果显示20例癌旁组织中仅3例mina53蛋白呈弱阳性表达,阳性率为15.00％;71例胃癌组织标本中有35例mina53蛋白表达阳性,阳性率为49.30％(P＜0.05);其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期胃癌组织标本中的阳性比例分别为7/23、13/29、11/14及4/5 (P＜0.05).结论:与癌旁组织相比,mina53在胃癌中的基因和蛋白水平存在高表达,并且随肿瘤分期的进展而表达量增高,检测mina53表达水平有助于胃癌早期诊断和预测肿瘤的侵袭程度.     

胃癌发展相关阶段中E-cadherin基因启动子甲基化及蛋白表达的研究

为了研究E cadherin基因启动子甲基化在胃癌发生及发展阶段中的作用 ,我们采用甲基化特异性PCR和免疫组化的方法对异型增生 (2 3例 )、早期胃癌 (2 0例 )和进展期胃癌 (2 0例 )石蜡标本进行启动子甲基化状态及蛋白表达的分析。结果表明E cadherin基因启动子在异型增生、早期胃癌和进展期胃癌中均有甲基化 ,其阳性率分别为78 3% ,80 %和 90 % ,经χ2 检验各病例组与正常组 (30 % )比较均有差异 (P <0 0 5 ) ,但各病例组间没有差异 (P >0 0 5 ) ;进展期胃癌E cadherin蛋白表达全部阴性 ,早期胃癌 70 %阴性 ,异型增生中无蛋白阴性 ,在早期胃癌和进展期胃癌 34例蛋白表达阴性的标本中 31例有启动子甲基化 (91 2 % ) ,蛋白表达与启动子甲基化呈明显负相关 (P <0 0 1)。表明E cadherin启动子甲基化是胃癌发生的早期事件 ,也是胃癌发生、进展的重要事件     

吲哚美辛对COPD 大鼠TNF-α 与Bcl-2 和Bax 表达的影响

目的:探讨吲哚美辛对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠趾长伸肌TNF-α及Bcl-2和Bax表达的影响。方法:100只健康Wistar大鼠随机分为模型组和对照组(A组)。模型组采用熏香烟和气管内滴注猪胰蛋白酶(PEE)法建立COPD模型大鼠,以低于A组大鼠平均体重的90%判断发生营养不良的标准,将模型组大鼠分为COPD营养正常组(B组)和COPD营养不良组,COPD营养不良组随机化原则分为COPD营养不良生理盐水组(C组)、吲哚美辛1组(D组)、吲哚美辛2组(E组)、吲哚美辛3组(F组)。A、B、C三组灌注等量生理盐水,D、E、F组给予不同剂量吲哚美辛(IND)灌胃干预。TUNEL法测定趾长伸肌细胞凋亡率,免疫组织化学法测定Bcl-2、Bax蛋白表达,双抗体夹心法测定血清及趾长伸肌肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。结果:吲哚美辛干预后,E组趾长伸肌细胞凋亡率、Bcl-2、Bax的蛋白表达、趾长伸肌匀浆和吲哚美辛干预后血清TNF-α浓度低于C、D、F组,但高于A、B组,P<0.05;E组趾长伸肌Bcl-2蛋白表达高于C、D、F组,低于A、B组,P<0.05。结论:Bcl-2、Bax及TNF-α参与COPD模型大鼠趾长伸肌细胞凋亡,适当剂量的吲哚美辛可改善COPD营养不良模型骨大鼠趾长伸肌的凋亡。     

雾化吸入雷公藤内酯醇对哮喘大鼠气道平滑肌增生及NF-κB、Bcl-2表达的影响

目的：探讨雷公藤内酯醇对哮喘气道重构及核因子-kappaB（NF-κB）、Bcl-2表达的影响。方法：将40只SD大鼠随机分为5组（n=8）：正常对照组（A组）;哮喘4周组（B组）;哮喘6周组（C组）;治疗4周组（D组）;治疗6周组（E组）。测定气道反应性并观察气道壁嗜酸性粒细胞浸润;图像分析软件测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度及支气管平滑肌细胞核数量;免疫组织化学染色、Western印迹法检测PCNA、NF-κB、Bcl-2蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测Bcl-2mRNA表达。结果：①B组、C组NF-κB的蛋白表达量显著高于A组（P均〈0.01）,E组上述指标较B组、C组、D组均显著降低（P〈0.01、P〈0.01、P〈0.05）;②B组、C组Bcl-2蛋白及mRNA表达水平显著高于A组（P〈0.01）;E组蛋白表达量较B组、C组、D周组均显著降低（依次为P〈0.05、P〈0.01、P〈0.01）,mRNA表达水平与上述各组比较亦均显著降低（P〈0.01）,E组蛋白及mRNA表达水平与A组相比仍较高（依次为P〈0.05、P〈0.01）;③B组、C组PCNA的蛋白表达量明显高于A组（P〈0.01）;④B组及C组支气管壁厚度、支气管壁平滑肌厚度、支气管壁平滑肌细胞核数量均较A组明显增加（P〈0.01）,而E组上述指标较B组、C组、D组均显著降低（P〈0.01）;⑤B组、C组的气道反应性均高于A组（P均〈0.01）,E组较B组、C组、D组均显著降低（P〈0.01、P〈0.01、P〈0.05）。结论：哮喘气道平滑肌增生与气道平滑肌细胞（ASMCs）凋亡不足相关。NF-κB可能通过抑制ASMCs凋亡,参与哮喘气道高反应性及气道重构过程。雷公藤内酯醇可能通过下调NF-κB而抑制Bcl-2的表达,从而促进ASMCs凋亡、抑制气道平滑肌增生。     

乳酸杆菌DM8909胞壁肽聚糖对小鼠阴道感染的免疫调节作用

目的 通过对小鼠阴道组织的细胞因子测定来反映乳酸杆菌肽聚糖对阴道局部的免疫调节作用.方法 6～8周龄昆明小鼠共36只,随机分为6组,每组6只,A组为正常对照组,其余各组用抗生素和大肠埃希菌EPEC104造成小鼠阴道感染模型后分别给予不同处置,其中B组为患病组,C组为自然恢复组,D组为生理盐水治疗组,E组乳酸杆菌治疗组,F组乳酸杆菌肽聚糖治疗组;对各组采用ELISA(酶联免疫吸附法)来测定小鼠阴道局部组织的细胞因子IL-2及IL-10的水平.结果 (1)各研究组中IL-2的水平:与A组比较,B、C、D组IL-2的水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01),E、F组差异无统计学意义(P＞0.05);与B组比较,A、E、F组IL-2水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01),C、D组差异无统计学意义(P＞0.05);而E组和F组比较差异也无统计学意义(P＞0.05).(2)各研究组中IL-I0的水平:与A组比较,B组IL-10的水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.0l),C、D组IL-10水平下降,差异有统计学意义(P＜0.05),E、F组差异无统计学意义(P＞0.05);与B组比较,A、E、F组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01),B、D组差异无统计学意义(P＞0.05);而E组和F组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乳酸杆菌肽聚糖作为乳酸杆菌免疫调节主要成分,通过影响细胞因子的表达,对阴道感染起到了免疫调节作用.     

Bcl-2、PIM1、P53基因异常在弥漫大B细胞淋巴瘤中的预后价值

目的:探讨B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、PIM1及P53基因异常在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的预后价值。方法:选取在2010年3月～2014年3月期间我院收治的DLBCL患者86例进行研究。采用间期荧光原位杂交检测Bcl-2、PIM1、P53基因。对患者进行为其5年的随访,采用Logistic多因素回归分析Bcl-2、PIM1、P53基因异常与预后的关系。结果:在86例患者中,29例(33.72%)患者存在P53基因缺失;27例(31.39%)患者发生Bcl-2基因多拷贝,3例(3.49%)患者发生Bcl-2基因易位;26例(23.26%)患者发生PIMI基因重排。各基因异常患者在性别、发病年龄、侵犯部位、LDH水平及β2-MG水平上比较,差异均无统计学意义(P0.05);但是各基因异常患者Ⅲ～Ⅳ期的比例显著高于Ⅰ～Ⅱ期,差异具有统计学意义(P0.05)。各基因异常组患者的无进展生存期(FPS)1年、总生存期(OS)3年比例显著低于各基因正常组,但在国际预后指数(IPI)评分指标上却显著高于各基因正常组,差异具有统计学意义(P0.05)。P53、PIMI及Bcl-2基因异常是患者的FPS、OS的独立影响因素。结论:Bcl-2、PIM1、P53基因在DLBCL患者的预后评估中具有重要的临床价值,且Bcl-2、PIM1、P53基因异常是患者预后不良的独立影响因素。     

谷氨酰胺对嗜水气单胞菌致病中华鳖的保护作用

为探讨谷氨酰胺(Gln)对嗜水气单胞菌致病中华鳖的保护作用,本试验选取健康中华鳖270只,随机分为5组(A~E组),每组3个重复,每个重复18只。A~D组腹腔注射嗜水气单胞菌(1.3×109cfu/mL,0.5 mL),E组注射等量生理盐水。6 d后,A、E组注射生理盐水,B、C、D组分别注射100 mg/kg·BW、200 mg/kg·BW、400 mg/kg·BW Gln注射液,隔天注射,共注射3次。观测各组中华鳖的存活率,血浆总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、溶菌酶(LZM),脾脏、肝脏和肠道的组织学以及肠道菌群变化。结果表明,A组血浆LZM极显著低于C、D、E组(P0.01),C、D组LZM含量极显著高于A组(P0.01);A组T-AOC极显著低于E组(P0.01),D组T-AOC极显著高于A、B、C组(P0.01);A组GSH-PX极显著低于其余各组(P0.01);A组MDA极显著高于E组(P0.01),B、C、D组MDA显著低于A组(P0.05);A组中华鳖脾脏的红髓脾窦淤血扩张,红髓和白髓的淋巴细胞和血细胞坏死。肝脏充血严重,大量肝细胞破裂,肝细胞间有大量红细胞浸润。中肠黏膜萎缩,较多皱襞断裂。随着Gln注射剂量的增加,B、C、D组脾脏红细胞充斥逐渐减少,红白髓的分界逐渐明显。肝脏出血点减少,肝细胞的大小与排布也渐趋正常。中肠皱襞破损脱落程度逐渐减轻;A组肠道嗜水气单胞菌和大肠杆菌明显高于E组(P0.05),而乳酸杆菌和芽孢杆菌明显低于E组(P0.05);D组嗜水气单胞菌和大肠杆菌明显低于A组(P0.05),而乳酸杆菌和芽孢杆菌明显高于A组(P0.05)。注射Gln可缓解嗜水气单胞菌对中华鳖的致病作用,有效恢复机体抗氧化及非特异免疫力,降低死亡率。     

雷公藤对哮喘大鼠气道重构及磷脂酰肌醇3激酶表达的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇对哮喘气道重构及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为5组(n=8):A组(正常对照组);B组(哮喘4周组);C组(哮喘6周组);D组(给药4周组);E组(给药6周组)。测定气道反应性并观察气道壁嗜酸性粒细胞浸润;图像分析软件测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度及支气管平滑肌细胞核数量;免疫组织化学染色、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PI3K蛋白及mRNA表达。结果:①B组、C组PI3Kp85α的蛋白及mRNA表达水平显著高于A组(P均<0.01),E组上述指标较B组、C组、D组均显著降低(P<0.01、P<0.01、P<0.05);②B组及C组支气管壁厚度、支气管壁平滑肌厚度、支气管壁平滑肌细胞核数量均较A组明显增加(P均<0.01),而E组上述指标较B组、C组、D组均显著降低(P均<0.01);③B组、C组的气道反应性均高于A组(P均<0.01),E组较B组、C组、D组均显著降低(P<0.01、P<0.01、P<0.05)。结论:气道平滑肌增生是气道重构的一个显著特征,PI3K可能在此起促进作用。雷公藤内酯醇可能通过下调PI3K的表达而减轻哮喘气道高反应性及抑制气道平滑肌增生,对哮喘气道重构有一定治疗作用。     

胃癌前病变及胃癌的血清学生物标志物研究进展

胃癌是死亡率极高的恶性肿瘤.胃癌的早期诊断有助于发现并选择合适的治疗方案以降低其死亡率.近年来随着分子生物学技术的发展,血清学标志物以其创伤小,痛苦少而成了研究的重点.由于胃癌通常由一系列癌前疾病发展而来,因此与胃癌前病变各个阶段相关的血清学生物标志物的检测对于胃部肿瘤的早期诊断同样具有重要的临床意义.本文综述了目前胃癌前病变阶段及胃癌诊断相关的血清学生物标记物研究的最新进展.这些血清学标志物对于病情估计以及胃癌的早期诊断、组织分型及判断预后等都具有重要意义.     

胃多导电刺激及胃液体排空犬动物模型的建立

目的建立胃浆膜多导联电刺激和胃排空动物模型。方法在12条英国比格犬的胃大弯浆膜层包埋四对心内起搏电极,距幽门40cm空肠近端行一造瘘口。结果①造瘘管收集食糜的方法简单易行,通过其排空量,能了解不同的电刺激和不同的电刺激参数对胃动力的作用。②胃浆膜多导联电极记录的胃体、胃窦慢波电信号清晰、稳定,能准确地记录不同时间和不同实验的胃慢波变化。③单导联和多导长脉冲电刺激均能控制胃慢波。结论胃浆膜多导联电极是研究胃电生理、胃电起搏及胃电起搏对胃排空的影响较理想的方法。英国比格犬是此模型的理想材料。     

胃楔形切除术致胃电节律改变的实验观察

目的:观察楔形切除胃的不同部位对术后胃电节律的影响。方法:将30只雄性新西兰兔按照完全随机原则分为胃体近端楔形切除组、胃体远端楔形切除组及对照组3个处理组,每组10只。记录在自然恢复状态下术后3日、6日、9日胃体近端及胃窦处30分钟内慢波总数及正常慢波次数并计算正常慢波百分比。用析因设计分析切除部位、测量部位、术后时间三因素对胃慢波节律的影响。结果:上述三因素均对术后慢波节律有影响,切除胃体近端与切除胃体远端相比,前者引发的术后胃电节律紊乱的程度更严重且恢复更缓慢;术后测量胃窦处与测量胃体处相比,前者发生的胃电节律紊乱的程度更严重且恢复更缓慢。结论:大弯侧胃底与胃体交医院界处的"胃电起始区域"即为"胃电起搏区","胃电起搏区"的切除对术后胃电节律的影响大于传导区域切除对其影响。     

胃楔形切除术致胃电节律改变的实验观察

目的：观察楔形切除胃的不同部位对术后胃电节律的影响。方法：将30只雄性新西兰兔按照完全随机原则分为胃体近端楔形切除组、胃体远端楔形切除组及对照组3个处理组,每组10只。记录在自然恢复状态下术后3日、6日、9日胃体近端及胃窦处30分钟内慢波总数及正常慢波次数并计算正常慢波百分比。用析因设计分析切除部位、测量部位、术后时间三因素对胃慢波节律的影响。结果：上述三因素均对术后慢波节律有影响,切除胃体近端与切除胃体远端相比,前者引发的术后胃电节律紊乱的程度更严重且恢复更缓慢;术后测量胃窦处与测量胃体处相比,前者发生的胃电节律紊乱的程度更严重且恢复更缓慢。结论：大弯侧胃底与胃体交医院界处的“胃电起始区域”即为“胃电起搏区”,“胃电起搏区”的切除时术后胃电节律的影响大于传导区域切除对其影响、     

Nutritional and Protein Deficiencies in the Short Term following Both Gastric Bypass and Gastric Banding

Background

The number of morbidly obese patients undergoing bariatric surgery (BS) has increased dramatically in recent years. Therefore, monitoring food intake and its consequences in terms of nutritional status is necessary to prevent nutritional deficiencies. The aim of this study was to analyze the effect of food restriction on nutritional parameters in the short-term (≤3 months) period after BS in morbid obesity.

Method

In a prospective study, we followed 22 obese women who underwent Roux-en-Y gastric bypass (GBP) or adjustable gastric banding (AGB) at baseline (T0) and 1 (T1) and 3 (T3) months after surgery. We evaluated food intake, nutrient adequacy and serum concentrations of vitamins and minerals known to be at risk for deficiency following BS.

Results

Before surgery, we observed suboptimal food intakes, leading to a risk of micronutrient deficiencies. Serum analysis confirmed nutritional deficiencies for iron and thiamine for 27 and 23% of the patients, respectively. The drastic energy and food reduction seen in the short term led to very low probabilities of adequacy for nutrients equivalent across both surgeries. Serum analysis demonstrated a continuous decrease in prealbumin during the follow-up, indicating mild protein depletion in 21 and 57% of GBP patients and 50 and 63% of AGB patients, respectively, at T1 and T3. Regarding vitamins and minerals, systematic supplementation after GBP prevented most nutritional deficiencies. By contrast, AGB patients, for whom there is no systematic supplementation, developed such deficiencies.

Conclusions

Our results suggest that cautious monitoring of protein intake after BS is mandatory. Furthermore, AGB patients might also benefit from systematic multivitamin and mineral supplementation at least in the short term.     

Survivin、Dnmt 和CD44 在胃溃疡及胃癌中表达的差异

胃溃疡(Gastric Ulcer GU)和胃癌(Gastrio Cancer Gc)均是我国乃至全世界人群中的常见病、多发病。近年来,虽然胃溃疡的发病率开始呈下降趋势,但仍属消化系统疾病中最常见的疾病之一,目前已被认为是癌前病变之一。据统计,5%左右的胃溃疡可发生癌变,甚至有统计最高达29.4%的胃癌来自胃溃疡[1]。在世界范围内恶性肿瘤中,胃癌位居第4,病死率位居第2,在我国则居第1位。胃癌发生的分子机制研究表明多基因变异是细胞发生癌变的内因[2]。各种癌基因、抑癌基因和错配修复基因、细胞信号传导通路的异常、细胞周期调控改变及相关产物均对胃癌的发生发展产生影响。如Survivin、DNA甲基化和CD44等均是近年来在胃癌组织中发现的并成为研究热点的基因。通过对Survivin、Dnmt和CD44三种基因在胃溃疡及胃癌中表达的差异的了解,有助于加深对胃癌发生、发展及转移机制的认识,更好的为临床应用中胃溃疡及胃癌的治疗提供理论依据和找到更好的治疗方法。