玉米胚性愈伤组织的长期继代及其染色体分析

对５种基因型幼胚诱导的愈伤组织继代培养表明,玉米胚性愈伤组织的长期继代受基因型,培养基成分,激素,培养条件的影响。适时继代,逐代筛选对胚性保持起重要作用。适当降低培养温度（１２±２℃）有利于愈伤组织的保存和胚性保持,可以减少愈伤组织长期继代所需的物质和工作量。长期继代培养的胚性愈伤组织,胚状体发生能力和植株再生率无显著变化,但正常苗的再生频率显著下降。观察愈伤组织细胞染色体发现：（１）基因型对不同倍性细胞的比例有明显影响。（２）随着继代时间的延长,二倍体细胞下降,四倍体和非二倍体细胞增多。（３）愈伤组织中出现多种染色体结构变异,这些结构变异有可能导致非整倍体细胞的形成。     

6-BA、NAA和2,4-D不同配比对荠菜愈伤组织诱导、生长及植株再生的影响

以野生荠菜[Capsella bursa-pastoris （L.） Medic]无菌苗为试材,选取下胚轴、子叶、真叶和叶柄作为外植体,研究了不同外植体的出愈情况,不同植物生长调节剂及配比对愈伤组织诱导、继代及植株再生的影响。结果表明：（1）下胚轴作为外植体出愈情况最好,继代后生长快;（2）下胚轴愈伤组织的最适植株再生培养基为MS＋2～3mg·L-16-BA＋0.2~0.6mg·L-1NAA;（3）愈伤组织培养阶段的2,4-D浓度对其植株再生能力有影响。     

提高小麦愈伤组织分化频率的因素

研究了影响小麦愈伤组织诱导、芽分化及其植株再生的一些因素。结果表明：在愈伤组织诱导和继代过程中添加ＡＢＡ（１．０ｍｇ／Ｌ）有利于小麦中晚期幼胚致密愈伤组织的诱导及再生能力的保持;外植体来源尤其是基因型对长期培养的愈伤组织再生能力有很大影响;不同的外源激素（ＫＴ、６－ＢＡ、ＩＡＡ、ＴＤＺ和玉米素等）也影响芽分化频率,其中ＴＤＺ可明显提高芽分化频率;在转入分化培养前对愈伤组织进行干燥处理可有效地提高其     

玉米自交系幼胚培养能力与遗传关系研究(简报)

玉米幼胚培养获得的胚性愈伤组织具有较强的长期继代能力和再生植株能力,常被用于构建转基因受体系统。然而基因型是制约玉米组织培养植株再生的重要因素之一,不同玉米基因型的幼胚培养能力关系到其遗传转化研究的结果[1]。     

提高小麦愈伤组织分化频率的因素

研究了影响小麦愈伤组织诱导、芽分化及其植株再生的一些因素。结果表明：在愈伤组织诱导和继代过程中添加ＡＢＡ（１ ．０ｍｇ／Ｌ） 有利于小麦中晚期幼胚致密愈伤组织的诱导及再生能力的保持;外植体来源尤其是基因型对长期培养的愈伤组织再生能力有很大影响; 不同的外源激素（ ＫＴ、６ＢＡ、ＩＡＡ、ＴＤＺ和玉米素等） 也影响芽分化频率,其中ＴＤＺ可明显提高芽分化频率;在转入分化培养前对愈伤组织进行干燥处理可有效地提高其芽分化频率;在生根培养基中添加适量的ＩＡＡ 或ＮＡＡ 可有效促进生根。     

籼稻体细胞胚胎发生及器官发生的比较研究

在以幼穗为外植体的诱导培养及其以后的继代培养与悬浮培养中,从以下几个方面对３个籼稻品种的体细胞胚胎发生（Ｅ）与器官发生（Ｏ）的特点作了比较研究．在形态上,（Ｅ）型愈伤由胚状体组成,具有层次分明的结构．胚状体由胚芽、胚根及盾片组成．而（Ｏ）型的愈伤没有上述组织的分化．没有层次结构。植株再生能力方面．与器官发生途径相比较,体细胞胚胎发生途径之分化频率高．保持再生能力持续的时间长．从每个愈伤上发生的再生植株数多．（Ｏ）型愈伤结构较疏松．建立结构良好的、细胞团较小的悬浮细胞系容易．但这种细胞系在液体条件下几乎丧失再生能力．而（Ｅ）型愈伤则相反．建立好的悬浮细胞系．需要时间较长．但在悬浮条件下仍然具有再生植株的能力。在诱导条件方面．２,４－Ｄ及激动素分别作用时可诱导器官发生,共同作用时则诱导体细胞胚胎发生．再生植株途径方面,由于水稻同时具有器官发生及体细胞胚胎发生的特点．无论在诱导条件上还是在（Ｅ）与（Ｏ）本身的特点上均不似萝卜或烟草那样专一．并且有（Ｅ）与（Ｏ）相互转化和混合发生的复杂情况．     

籼粳杂交水稻FI 种子胚愈伤组织诱导及再生体系建立

研究了籼粳杂交F1种子胚愈伤组织诱导与2,4-D浓度变化的关系,在愈伤组织继代培养一段时间后,通过预培养和再生培养阶段,获得了从愈伤组织直接分化而来的再生植株。     

籼粳杂交水稻F1种子胚愈伤组织诱导及再生体系建立

研究了籼粳杂交Ｆ１种子胚愈伤组织诱导与２,４＿Ｄ浓度变化的关系,在愈伤组织继代培养一段时间后,通过预培养和再生培养阶段,获得了从愈伤组织直接分化而来的再生植株     

普通小麦×栽培大麦杂种体细胞无性繁殖系建立

取小大麦杂种幼穗在含有2,4-D 2mg/l的N_6培养基上诱导出愈伤组织。在继代培养中不断产生胚状体和再生植株。经过筛选,N_6+KT1.0mg/l+IBA0.5mg/l和N_6+KT1.0mg/l+ZT0.1mg/l,为较好的继代分化培养基。培养近三年,继代23次,仍具有增殖分化能力。小植株移入土中均能成活及正常生长。     

月季愈伤组织的诱导及植株再生

以可在黑龙江地区露地越冬的5个现代月季（Rosa chinensis）品种为实验材料,分别以其无菌苗的叶片和茎段为外植体,研究了愈伤组织诱导及植株再生方法。实验结果表明：5个寒地月季品种的叶片和茎段均可诱导出愈伤组织,2,4-D诱导愈伤组织的效果较好,高浓度的细胞分裂素不适合用于月季叶片和茎段愈伤组织的诱导;TDZ在月季愈伤组织分化培养过程中具有重要作用,光照培养可促进月季愈伤组织的分化,愈伤组织的分化能力随着继代次数的增加呈下降趋势。该实验成功地从2004-8和2004-9（2个月季品种）愈伤组织中诱导出再生植株,其愈伤组织的分化率分别为45%和38%。     

在继代培养中玉米花粉愈伤组织的分化能力及其染色体稳定性

具有分化能力的玉米花粉愈伤组织,经过20个月的继代培养,分化能力发生显著变化:有的完全丧失,有的仍保持分化能力。通过不断分离筛选,使具有分化和再生植株能力的细胞大量增殖而保留下来。但它们的染色体倍性稳定,体细胞染色体 2n=x=10的细胞占90%以上,都是属于单倍体类型。     

白Qian胚性愈伤组织长期继代培养中的分化能力及染色体稳定性 …

白Ｑｉａｎ（Ｐｉｃｅａ ｍｅｙｅｒｉ Ｒｅｈｄ．ｅｔ．Ｗｉｌｓ．）的胚性愈伤组织ＭＳ＋２,４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ的培养基上继代３年,增殖能力和分化潜力仍保持在原来的水平,没有明显降低的趋势。但随着继代时间的增长,胚性愈伤组织内有细胞的染色体数目发生了无规律的变化,而再生植株根尖细胞染色体数目比较稳定（２ｎ＝２８）。     

提高籼稻愈伤组织再生频率的研究

为了提高籼稻愈伤组织的植株再生频率,研究了影响再生的各种因素,如：在诱导培养基或继代培养基中加细胞分裂素和萘乙酸（ＫＴ、ＢＡＰ、玉米素或Ｚｉｐ１毫克／升）,或加Ｔｈｉｄｉａｚｕｒｏｎ（０．５毫克／升）,以及愈及组织的部分干燥处理等。这些措施明显地提高籼稻愈伤组织的再生频率。结合使用这些处理可使ＴＮ１、ＩＲ７２和ＩＲ６４的愈伤组织再生植株频率较对照提高５－１４倍。     

平贝母花粉植株的诱导及无性系的建立

采用附加植物激素的MS、N_6、百合、米勒和改良怀特培养基,培养平贝母单核中期的花药,诱导出一些愈伤组织(平均诱导频率为0.20％),其中MS培养基的诱导效果最好。绝大多数再生植株出现在不加任何激素的1/2MS(其大量元素的含量是MS的一半)培养基上。再生植株的根尖细胞的染色体计数表明,约有1/4的细胞2n=12,证明再生植株是来源于花粉细胞的单倍体植株。在愈伤组织的分化培养中,建立起了能继代繁殖、不断保持绿苗分化能力的愈伤组织无性系。     

芦笋抗S—（2—氨乙基）—L—半胱氨酸（AEC）变异体的筛选

S-(2-氨乙基)-L-半胱氨酸(AEC)可抑制芦笋愈伤组织的生长,此抑制作用可被赖氨酸或甲硫氨酸部分解除。用0.5mmol/L的AEC进行筛选,得到抗性愈伤组织AR10并再生植株。AR10愈伤组织经一年多的继代培养,在离开选择剂组培继代两代后仍保持对AEC的抗性。抗性系愈伤组织还表现出对2mmol/L的半胱氨酸具交叉抗性,对1mmol/L的赖氨酸加苏氨酸表现部分交叉抗性。AR10再生植株一部分保持对AEC的抗性,而一部分则无抗性。对抗性愈伤组织及其再生植株的氨基酸分析表明,愈伤组织内游离赖氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸都有增加,而在再生植株内却发现半胱氨酸和赖氨酸的特异性增加,分别是对照植株的5.4和4.6倍。     

影响籼稻幼胚愈伤组织形成和植株再生的若干因素

基因型和取材部位可影响籼稻愈伤组织形成，基因型和继代次数又是影响稻植株再生的重要因素。继代次数的增多使籼稻再生能力显著下降，愈伤组织诱导率主穗优于分蘖穗，主穗与分蘖穗中又均以底部穗粒为最高，选材时以主穗底部为最佳。     

影响籼稻幼胚愈伤组织形成和植株再生的若干因素(简报)

基因型和取材部位可影响籼稻愈伤组织形成,基因型和继代次数又是影响籼稻植株再生的重要因素。继代次数的增多使籼稻再生能力显著下降,愈伤组织诱导率主穗优于分孽穗,主穗与分孽穗中又均以底部穗粒为最高,选材时以主穗底部为最佳。     

疣粒野生稻体细胞超低温保藏与原生质体培养体系的确立

疣粒野生稻是原产于我国的 3种野生稻之一 .疣粒野生稻具有优异特性但极难培养 .从疣粒野生稻的幼穗诱导出无再生能力的愈伤组织 ,经过继代培养和超低温保藏后获得了胚性愈伤组织 ,建立了悬浮细胞系 ,分离出原生质体并再生出植株 .人工接种鉴定表明 ,再生植株的强抗病性没有改变 ,但获得了培养力高的特性 .研究结果证明了植物愈伤组织的超低温保藏可能是获得胚性细胞系的一种新途径 .原生质体再生体系的确立是应用原生质体融合技术转移疣粒野生稻有用基因的重要一步 .     

水稻原生质体制备条件的优化及其细胞壁变化的快速检测

以疣粒野生稻和栽培稻02428的成熟种子为材料,对愈伤组织的诱导和继代、胚性悬浮细胞系建立、原生质体制备、再生细胞团分化及植株再生进行研究。结果表明：（1）水稻愈伤组织诱导的最佳2,4-D浓度为0.014 mmol/L;（2）胚性悬浮细胞系建立的最佳条件为AA 悬浮培养基+ 0.009 mmol/L 2,4-D ,每25 mL液体培养基加入0.4 g愈伤组织的初始接种量,7 d的继代周期;（3）原生质体制备的最佳条件为20 g/L纤维素酶+ 1 g/L果胶酶,酶解5 h,800 r/min离心5 min;（4）用荧光增白剂（VBL）细胞壁染色液可以快速、准确的检测原生质体制备及培养过程中细胞壁的变化情况。     

栽培大麦×普通小麦属间杂种的无性系变异

本实验中首先由栽培大麦×普通小麦的杂种幼胚诱导出愈伤组织,经过若干次继代培养,再由愈伤组织诱导出再生植株。采用此法在半年时间内由最初接种的一个杂种幼胚获得了上百株杂种植株。在愈伤组织细胞、再生植株的根尖细胞和中期Ⅰ花粉母细胞中,都看到了不同染色体数的镶嵌现象,其中在愈伤组织细胞和根尖细胞中还看到了染色体的自发加倍现象。在移栽成活的再生植株中出现了明显的无性系变异,这种变异既发生在不同植株之间,也发生在同一株的不同分蘖之间。杂种愈伤组织经过15个月的保存后仍然具有一定的分化能力,只是生长速度已明显下降。