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相似文献
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1.
参考已发表的猪瘟病毒序列,设计并合成了一对引物,应用RTPCR 技术,扩增了猪瘟兔化弱毒(Hog cholera virus lapinized Chinese strain , HCLV) 和石门强毒株的E0 糖蛋白基因,并将其克隆到pGEMT 载体中,测定了其核苷酸序列,并推导了其氨基酸序列。结果表明我国这两株强弱不同毒株E0 糖蛋白核苷酸序列同源性和推导的氨基酸序列同源性分别为95-0 % 和94-3 % ,有13 个氨基酸的差异,HCLV 比石门株多了一个潜在的N糖基化位点。将我国这两株病毒与国外已报导的HCV 毒株E0 基因序列进行了比较,发现石门株与日本的两株毒株ALD 和GPE- 同源性较高,核苷酸序列同源性分别为97-4 % 和96-5 % ,氨基酸同源性分别为97-4 % 和96-0 % ,而与欧洲Brescia 株和Alfort 株同源性较低,核苷酸同源性分别为92-2 % 和86-5 % ,氨基酸同源性为95-2 % 和92-5 % , HCLV 与ALD、GPE- 、Brescia、Alfort 株核苷酸同源性分别为95-6 % 、94-9 % 、91-3 % 、85-5 % …  相似文献   

2.
对362名无症状高滴度HBsAg携带者用RIA法检测HBeAg、Anti-HBe、Anti-HCV、Anti-HDV。结果表明,HBeAg阳性率随HBsAg滴度的增高而增加,且有显著性差异(P<0.05)。重叠感染以HBV+HCV最高,占27.6%;其次是HBV+HDV,占9.1%;HBV+HCV+HDV最少,占6.4%。但是,以上重叠感染率均与HBsAg滴度及/或HBeAg阳性率高低无关(P>0.05)。调查显示,无症状HBsAg携带者中HBV+HCV,或HBV+HDV,或HBV+HCV+HDV的重叠感染均可发生。  相似文献   

3.
日本血吸虫26kD抗原基因在BCG中的表达   总被引:5,自引:0,他引:5  
研究了外源基因日本血吸虫26kD抗原(Sj26GST)在卡介苗(bacilusCalmete-Guerin,BCG)、耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)和大肠杆菌(E.coli)中的表达.运用重组DNA和聚合酶链反应(PCR)等分子生物学技术,以表达Sj26GST的E.colipGEX衍生质粒为模板,经PCR得到编码Sj26GST的全长cDNA片段.将其按正确的阅读框顺序,克隆到人结核杆菌热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70的启动子下游,再将HSP70启动子和Sj26GST基因一起亚克隆到E.coli-分枝杆菌穿梭质粒pBCG-2000中,得到E.coli-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG-Sj26.pBCG-Sj26电转化入BCG和M.smegmatismc2155中表达Sj26GST抗原,所表达的天然重组Sj26GST(rSj26GST)为可溶性蛋白,在SDS-PAGE上分子量为26kD处可见明显的表达蛋白带.其表达量分别占BCG和M.smegmatis菌体总蛋白的15%和10%.可见,Sj26GST基因能在BCG中高效表达.  相似文献   

4.
云南阿昌族的红细胞血型分布   总被引:2,自引:2,他引:0  
调查了102名云南阿昌族的ABO,NNSs,Rh和P系统的红细胞血型,结果表明,阿昌族的基因频率p(0.3874)是迄今国内调查过人群中的最高值,E(0.2459)和CDe(0.6936)基因或染色体频率较高,而S(0.0686)和P1(0.1089)频率较低;Ms(0.5950)连锁率高于Ns(0.3353);未发现SS和Rh(-D)阴性表现型。  相似文献   

5.
产二十二碳六烯酸等多不饱和脂肪酸真菌的筛选*   总被引:2,自引:0,他引:2  
从土壤中筛选出一株产二十二碳六烯酸(DHA)的丝状真菌,菌丝含油21.23%,DHA占总脂肪酸2.51%;同时含二十碳五烯酸(EPA),占总脂肪酸的0.41%;不饱和脂肪酸占总脂肪酸的80%。经鉴定为头孢霉属(Caphalosporiumsp.)真菌。同时发现两株菌含EPA,经鉴定为小克银汉霉(Cunninghamellasp.)和毛霉(Mucorsp.)。在这几个属中发现DHA和EPA尚属首次。头孢霉菌DHA产量及百分含量和斜面菌种在不同温度下储藏有关。菌种在20℃储藏10天,在液体PDA培养基上发酵,DHA可占总脂肪酸11.27%,产量达63.35mg/L。  相似文献   

6.
目的 探讨将维生素A缺乏(VAD)胎鼠作为先天性心脏病动物模型的可行性。方法取11-19d不同胎龄正常及VAD胎鼠心脏经石蜡包埋、切片及 HE染色观察其发育情况。结果 1.实验组饲料含维生素A(VA)7μg/100g,经VAD饮食喂养后实验组大鼠血清VA水平明显低于对照组[(0.168±0.059)μmol/L Vs(2.18±0.23)μmol/L,t=32.88, P<0.001]。 2.大鼠死亡百分比:饲养于屏障系统的VAD大鼠死亡百分比较饲养于开放系统中的要低4.6倍(10% Vs 45.83%.x 2=16.64, P<0.001),对照组为0。 3.实验组大鼠受孕百分比及每只孕鼠产仔数均低于对照组[58.33% Vs 81.5%, x 2=4.37,P<0.05:(6.97±2.79) Vs(13 ±1.05),t=7.16, P<0.001]。 4.经切片观察11~15 d胎龄胎鼠实验组心脏出现明显发育延迟的占36.67%, 16~19 d胎龄胎鼠实验组心脏畸形占41.43%,血管异常占18.57%。结论VAD胎鼠可用来作为先天性心脏病动物模型,但需改进饲养环境以减少异常死亡。  相似文献   

7.
通过培养的人主动脉平滑肌细胞(hASMC)及脐静脉内皮细胞(hUVEC),应用3H-TdR参入、Northernblot分析、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、放射免疫分析(RIA)、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)对hASMC和hUVECDNA合成的作用及对血小板源生长因子(PDGF)、PDGF受体、转化生长因子β(TGF-β)、内皮素-1(ET-1)或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达和肾素-血管紧张系统(RAS)的影响,结果显示,HSPG明显抑制培养的hASMC基础的DNA合成(cpm值为:10385±3263vs,25541±6421,P<0.01)及外源性PDGF诱导的DNA合成(cpm值为:9878±1947vs.13481±44l0,P<0.05);抑制PDGFA链、TGF-Bp和ET-1mRNA表达,提高PDGFa和β受体mRNA的表达;显著降低hASMC培养液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的浓度和血管紧张素转换酶(ACE)的活性,推测HSPG抑制PDGFA链、TGF-β及ET-1mRNA表达,降低ACE活性及AngⅡ浓度是其抑制hASMC增殖的重要机  相似文献   

8.
高产稳产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌的构建   总被引:7,自引:0,他引:7  
重组大肠杆菌Escherichia coliHMS174(pTZ18UPHB) 含有携带聚羟基烷酸(PHA) 合成基因( phaCAB)** 的质粒pTZ18UPHB,是很有潜力的PHA 生产菌,但存在着质粒不稳定和不能合成3羟基丁酸(3HB) 与3羟基戊酸(3HV) 共聚物[P(3HBco3HV)] 的缺陷。将RK2 质粒上的par DE 基因引入pTZ18UPHB 构成质粒pJMC2 ,该质粒可以在宿主E.ColiHMS174 中稳定遗传。将培养基中的磷酸盐浓度降至18 m mol/L,发现E.Coli HMS174(pJMC2) 能够以丙酸为前体合成P(3HBco3HV) ,其中3HV 在共聚物中的含量为5 % ~8 % 。在5L自动发酵罐中分批补料培养E.Coli HMS174(pJMC2) ,培养基初始磷酸盐浓度为15 m mol/L,30 h 后每升培养液中干菌体可达42-5 g,P(3HBco3HV) 占干重的70 % ,其中3HV 在共聚物中的含量为4-9 % 。  相似文献   

9.
从农药厂废水中分离到6株能以除草剂阿特拉津为唯一氮源生长的细菌,即假单胞菌(Pseu-domonas spp.)AD1、AD2和 AD6,土壤杆菌(Agrobacterium sp.)AD4,黄单胞菌(Xanthomonas sp.)ADS,欧文氏菌(Erwinia sp.)AD7。AD1菌株能使无机盐培养基中的 0.3g/L阿特拉津在72h内降解99,9%。当以AD1、AD2、AD4、AD5、AD6和AD7菌株的总DNA为模板进行PCR扩增时,除A  相似文献   

10.
用生物膜的拆离与重建方法将从牛脑皮层膜中纯化的激活型GTP结合蛋白(Gs)和腺苷酸环化酶(AC)在含有不同极性头部或不同脂肪酸侧链的磷脂组成的脂质体上重建形成脂酶体,测定脂酶体中AC的基础活力及Gs激活AC的活力。实验结果表明,磷脂影响AC的基础活力和Gs激活AC活力的顺序依次为:PE>PS>PC;含不同脂肪酸侧链的混合磷脂对Gs的激活活力的影响大于含单一脂肪酸侧链的纯磷脂,如PEDPPE,PSDPPS,PCDPPC。含不同脂肪酸侧链的磷脂影响Gs的活力的顺序为DLPC>DMPC>DPPC。用反映磷脂分子的堆积程度的荧光探剂MC540和脂双层的流动性变化的DPH以及专一性标记蛋白质巯基(-SH)基团的荧光探剂acrylodan的测定结果表明,不同磷脂影响Gs的活力的差异主要是由于脂质物理状态的不同所致。  相似文献   

11.
Nm23-H1/NDPK-A基因在大肠杆菌中的高效表达及产物纯化的研究   总被引:15,自引:1,他引:14  
利用聚合酶链反应(PCR)技术扩增人二磷酸核苷激酶A亚基(NDPK-A)基因,即nm23-H1/NDPK-K基因的编码序列,经序列分析后,定向克隆于表达质粒载体pBV220,在大肠杆菌DH5α中高效表达出重组人NDPK-A.表达产物为可溶性的非融合蛋白,占菌体总蛋白42%.斑点ELISA法鉴定表明表达产物与NDPK-A标准抗血清呈阳性反应.以DEAE纤维素弱阴离子交换层析、CibacronBlue染料亲和层析结合高效液相排阻色谱技术纯化rNDPK-A,得纯度为96.7%的目标蛋白.以反相高效液相色谱法进行酶活性分析,表明纯化的rNDPK-A能催化ATP+UDP=ADP+UTP的反应,比活性为800U/mg蛋白.  相似文献   

12.
人GM—CSF cDNA的克隆和在大肠杆菌中的表达   总被引:3,自引:0,他引:3  
从诱导的人胚肺细胞HFL株中提取总RNA.经RT-PCR反应获取了人GM-CSFcDNA,DNA序列测定表明其顺序与文献报道完全一致。为了获得高效表达,应用PCR改造了人GM-CSF的cDNA5’端核苷酸序列,并将改造的人GM-CSF基因插入含T7启动子的质粒pET-11d构建成表达质粒pETC-5,将此质粒转化大肠杆菌株BL21(DE3)得到表达菌株BLEC4。表达菌株用0.5mol/LIPTG诱导2小时后,产生大量重组蛋白并形成包涵体。SDS—PAGE电泳图谱扫描结果表明,rhGM-CSF产量占菌体总蛋白量的16%。ELISA和TF-1细胞培养测定表明,初步纯化和复性的rhGM-CSF具有天然的hGM-CSF生物活性。  相似文献   

13.
采用8-(6-氨己基)-氨基-5'-AMPSepharose亲和层析法和DEAE-Sepharose离子交换层析法从大熊猫心肌中分离纯化出了乳酸脱氢酶同工酶H4.纯化的大熊猫LDH-H4,比活为445U/mg蛋白,经SDS-PAGE,PAGE,等电聚焦电泳鉴定均为一条带,其亚基分子量为36000,等电点为5.45.经测定大熊猫LDH-H亚基N端被封闭,C端氨基酸残基经测定为Leu.氨基酸组成分析表明每个亚基含有5个Cys,9个Met.  相似文献   

14.
兔阑尾中一种新的21kD的钙结合蛋白的纯化与鉴定   总被引:3,自引:0,他引:3  
纯化与鉴定了B淋巴细胞中一种新的分子量为21kD的钙结合蛋白(CaBP21)。兔阑尾淋巴细胞匀浆经热变性,Phenyl-Sepharose与DEAE-Sepharose柱层析,自每1kg细胞沉积物中获得SDS-PAGE均一的CaBP215.3mg。HCl水解后的酸性氨基酸(Asp+Glu)含量为26%。如同大多数钙结合蛋白一样,N末端封闭阻止其进行Edman降解。CaBP21中疏水性氨基酸(计Gly,不计Trp)约占46%,碱性氨基酸10%,酸性氨基酸与极性氨基酸约44%。CaBP21有较高的Ser、Tyr含量。肽谱分析等确证CaBP21为2个相同或相似亚基二聚体。以ArsenazoⅢ作Ca2+结合分析表明每分子CaBP21可结合4分子Ca2+,对Ca2+的结合常数约为10-5mol/L。各种性质表明CaBP21是一种不同于其他已知钙结合蛋白的新钙结合蛋白。  相似文献   

15.
本文研究了实验性高胆固醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)活性变化及有氧运动时LDLR活性调节的影响。发现,高脂(HC)组肝组织匀浆LDLR活性较正常对照(NC)组降低37%(P<0.05),同时血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)及血清载脂蛋白B(ApoB)均显著高于NC组(P<0.01);高脂+运动(HE)组TC、LDLC及ApoB均明显低于HC组,而LDLR活性则较HC组增高26%(P<0.05)。结果提示:(1)高胆固醇负荷时细胞可通过下行调节影响LDLR活性;(2)运动可能通过增加对细胞内胆固醇利用和降解,反馈作用于下行调节过程影响LDLR的合成,增加对LDLC摄取而显著改善血脂水平。  相似文献   

16.
光系统Ⅱ核心天线CP43的纯化及性质   总被引:7,自引:0,他引:7  
菠菜放氧的PSII核心复合物经0.8mol/LTris-HCl(pH8.0)洗涤后,用温和的非离子去垢剂DM和高浓度的LiClO4增溶,再经DEAE-Toyopearl-650S离子交换柱层析分离,可得到PSII核心天线43kD叶绿素a结合蛋白(CP43)。SDS-PAGE显示一条43kD蛋白质带。根据Arnon法和Markewll法的结果表明,每个蛋白质分子结合20~21个分子的叶绿素a。室温条  相似文献   

17.
安徽省宁国县畲族红细胞血型分布   总被引:2,自引:0,他引:2  
调查160名安徽省宁国县畲族村民的ABO、Rh、P、MN系统红细胞血型,结果显示ABO血型表型频率分布为O(0.4687)〉B(0.2375)〉A(0.2250)〉AB(0.0688),基因频率p=0.1500,q=0.1575,r=0.6925;Rh血型表型频率分布为CCdee(0.5385)〉CCDE(0.1667)〉CcDE(0.1474)〉CcDee(0.0961)〉ccDE(0.0321  相似文献   

18.
破伤风毒素C部分的克隆及在大肠杆菌中的表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
用CR方法从破伤风杆菌基因组DNA上坟增出破伤风毒素C部分(tetanus toxin fragment C,TTC),经测序其基因片段由1356bp组成,可编码451个氨基酸残基的多肽。将其插入原核表达载体pET-28a(+)中,并在大肠杆力BL219DE3)中表达,其表达量占可溶性总蛋白质的8.2%;SDS-PAGE和免疫印迹分析表明,TTC基因(该基因GenBank登录号为AF15482)表  相似文献   

19.
本文研究了实验性在醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体(LDL-R)活性变化及有氧运动时LDL-R活性调节的影响,发现,高脂(HC)组肝组织匀浆LDL-RI自古以来生较正常对照(NC)组降低37%(P〈0.05),同时血清大醇(TC)、低密度脂收白胆固醇(LDL-C)及血清栽脂蛋白B(ApoB)均显著高于NC组(P〈0.01);高脂+运动(HE)组TC、LDL-C及ApoB均明显低于HC组,而LDL-R  相似文献   

20.
在应用双歧杆菌活菌制剂治疗慢乙肝期间,重点观察了T细胞亚群(CD3,CD4,CD8)、NK细胞(CD(16))、白细胞介素Ⅱ(IL-2)分泌细胞、肿瘤坏死因子(TNF)等细胞免疫指标治疗前后的动态变化,同时观察了病人血内毒素水平的动态变化和乙肝病毒标志物(HBVM)的改变。结果表明:(1)与对照组比较,双歧杆菌活菌制剂可使慢乙肝病人CD3+,CD4+数目明显增多,而对CD8+细胞数目无明显影响;(2)双歧杆菌活菌制剂可使CAH组的CD16+细胞显著增多(p<0.05);使CAH组和CPH组的IL-2分泌细胞均有非常显著和显著增加(分别p<0.01和p<0.05);(3)CAH组病人血中内毒素和TNF水平在双歧杆菌活菌制剂治疗后,匀出现非常显著降低(p<0.01);CPH组TNF水平较对照组无显著变化,但内毒素水平较对照组显著降低(p<0.05);(4)满疗程后(60天)CAH组有6例,CPH组有5例HBeAg阴转(分别为26.06%和25.0%),而对照组仅2例阴转(13.33%),两治疗组与对照组比较有显著性差异(p<0.05)。  相似文献   

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