玉米果糖—6—磷酸，2—激酶／果糖—2，6—二磷酸酶基因的结构与表达分析

通过RT-PCR,结果RACE技术,得到了玉米（Zea maysL.)果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶的全长cDNA克隆。命名为mF2KP,氨基酸序列同源性比较发现,mF2KP蛋白可以分为两个部分;C端包含高度保守的催化功能区。N端为植物中特有的多肽,将mF2KP基因中一段包含完整催化功能区的片段在大肠杆菌（Escherichia coli)中表达,融合蛋白具有果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶活性,Northern杂交证明在种子活力不同的幼苗中,mF2KP的转录水平存在明显差异。种子活力越高,幼苗中mF2KP的转录水平越低。     

人白细胞介素家族的新成员—IL—19，IL—20，IL—21，IL—22，IL—23

白细胞介素是激活的T细胞分泌的一类细胞因子,它们在免疫调节中发挥重要作用,具有很高的临床应用价值。迄今为止,已有23种人白细胞介素被发现,构成了一个庞大的家族,其中2000－2001年间,就有5种人白细胞介素家族最新成员的序列被阐明,本文简单介绍了它们的结构,诱导表达方式,功能,及其信号相关受体等各个方面的最新研究进展。     

信号蛋白质14—3—3研究进展

14－3－3信号蛋白质家族是一组高度保守,分布十分广泛的多功能真核生物蛋白质,具有7个亚型,与各种信号肽分子包括激酶、磷酸酶、膜转移受体等结构,参与细胞内信号传导包括有丝分裂信号转导、细胞周期调节、细胞凋亡等,并对朊蛋白病有重要诊断价值。     

反义c—fos和c—jun抑制IL—1诱导阿片肽分泌

白细胞介素（ＩＬ－１）及阿片肽作为神经调质参与了神经细胞兴奋性毒性作用,以大鼠大脑皮层神经细胞为研究对象,探讨了ＩＬ－１、阿片肽和ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ表达产物之间的关系,结果表明,ＩＬ－１β能诱导大脑皮层神经细胞ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ ｍＲＮＡ瞬时短暂表达,１５ｍｉｎ增高,３０ｍｉｎ达高峰,ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ ２ｈ回至基线水平,ｃ－ｊｕｎ ｍ ＲＮＡ ８ｈ回至基线水平;联合应用ｃ－ｆｏｓ,ｃ－     

用酸碱法从而包酵母中提取β——（1——3）——D葡聚糖

研究了用酸－碱法制备水不溶性葡聚糖的工艺。０．７５ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ在１００℃作用２ｈ,能有效地去除甘露聚糖,０．５ｍｏｌ／Ｌ的酸使不溶性的葡聚糖的比粘度增加,除去糖元,分析表明,产品为β－Ｄ－葡聚糖,其中β－（１－３）－Ｄ－葡聚糖约为８７％。     

基因工程技术合成一种新的酮内酯类化合物3—去氧—3—羰基—红霉内酯B

大环内酯类抗生素基因工程是近年来生物工程领域研究的一个热点 ,利用基因工程改造大环内酯类抗生素合成基因 ,已经合成了 10 0多种“非天然”的天然化合物 ,为筛选新抗生素开辟了新的途径。本研究以糖多孢红霉菌Ａ2 2 6基因组ＤＮＡ为模板 ,先用ＰＣＲ扩增出红霉素合成基因ｅｒｙＫＲ6两侧片段 ,再用重叠ＰＣＲ将其拼接成去除ＫＲ6的约 3.2ｋｂＤＮＡ片段 ,并克隆于ｐＷＨＭ3载体 ,构建了同源重组质粒ｐＷＨＭ2 2 0 1。用ＰＥＧ介导将ｐＷＨＭ2 2 0 1转入糖多孢红霉菌Ａ2 2 6原生质体。ＰＣＲ鉴定和生物活性检测均显示ｐＷＨＭ2 2 0 1已重…     

香茄环斑病毒HC—RT—PCR—ELISA检测

番茄环斑病毒（ToRSV)是我国对外检疫一类有害生物。目前国内尚无存在的报道。PCR技术是一种快速灵敏的植物病毒检测方法,但核酸内的聚合酶抑制物会导致漏检现象。而只通过凝胶电泳进行结果判定会出现假阳性,这两方面限制了PCR技术在对外检疫中的应用,利用共价结合在PCR管壁上的引物特异性杂交诱捕核酸粗提液中的靶标核酸,洗掉杂质及抑制物质,在同一管内作RT-PCR,凝胶电泳检测液相产物的同时对固相产物进行杂交检测。提高了结果的可靠性及灵敏度。利用所建立的HC-RT-PCR-ELISA成功地从法国进口葡萄苗中检出ToRSV。本方法可用于其他植物病毒及转基因产品的检测。     

K—阿片受体拮抗剂MR—2266—BS对ACTH和催乳素释放的影响

The effect of intravenous injection of different doses of MR-2266-BS, a selective antagonist of kappa-opiate receptor, on plasma adrenocorticotropin (ACTH) and prolactin (PRL) in conscious male rats bearing an intrajugular cannulae was assessed. The results revealed that the MR-2266-BS of 3 mg/kg completely blocked the restraint stress-induced increase in plasma ACTH levels, and further elevated plasma PRL levels in these animals, while there were no effects on the resting levels of ACTH and PRL. MR-2266-BS of 6 mg/kg significantly increased the resting levels of plasma ACTH and also further elevated the restraint stress-induced increase of plasma ACTH and PRL. The present data suggest that kappa-opiate receptor and its endogenous ligand may be involved in the regulation of the resting and restraint stress-induced release of ACTH, and their action appears to be both stimulatory and inhibitory. Furthermore, kappa-opiate receptor and its endogenous ligand may only inhibit the stress-induced release of PRL.     

5—氮—2‘—脱氧胞苷（5—axa—CdR）对HL—60细胞分化和DNA甲基化酶的影响

以５－氮－２－脱氧胞苷为诱导物,在０．５μｍｏｌ／Ｌ的最佳浓度下,可诱导ＨＬ－６０细胞分化达１５％左右。同时,用「＾３Ｈ」－ｍｅｔｈｙｌ－ｓ－ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ（＾３Ｈ－ＳＡＭ）为底物,通过同位数参入法,测定了不同浓度诱导物对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ甲基化酶活力的影响,发现在最佳诱导物浓度下,可使ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ甲基化酶活力明显下降。     

Glycine—SDS—PAGE测定小分子多肽分子量

小分子多肽分子量的测定 ,目前多采用Ｔｒｉｃｉｎｅ -ＳＤＳ -ＰＡＧＥ系统[1～ 3 ] ,但系统中的Ｔｒｉｃｉｎｅ价格昂贵 ,加之电泳时间较长 ( 3～ 4ｈ) ,为此 ,作者经过实验摸索 ,建立了Ｇｌｙｃｉｎｅ -ＳＤＳ -ＰＡＧＥ测定小分子多肽的方法。1　材料和方法表 1　制胶配方成分分离胶 (ｍｌ)浓缩胶 (ｍｌ)分离胶单体母液 1 3 3 -浓缩胶单体母液 -0 23 2ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ 1 3 3 -(ｐＨ8 8)0 5ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ -0 3 8(ｐＨ6 8)尿素 1 44ｇ -Ｈ2 Ｏ 0 40 910 %ＳＤＳ 40 μｌ 15 μｌ10 %ＡＰＳ 2 5 μｌ 12 μｌＴ…     

MALDL—TOF—MS对寡核苷酸的序列分析

通过对几种基质测定含不同碱基的寡核苷酸的灵敏度及精确度的比较,发现用混合基质α－氰基－４－羟基肉桂酸（α－Ｃｙａｎｏ）／３－羟基吡啶羧酸（３ＨＰＡ）用于基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱中测定脱氧寡核苷酸,不仅能得到较好的分子离子峰,而且一些金属离子的加合物峰能得到的有效的抑制,提高了测定的灵敏度,用３′和５′－外切酶对脱氧寡核苷酸１２－ｍｅｒ（５′－ＡＴＧ ＣＡＴ ＡＴＧ ＣＡＴ－３′）进行部分     

拟除虫菊酯对家蝇Ca—ATPase和Ca—Mg—ATPase的抑制作用

通过对家蝇神经系统的Ca-ATPase、Ca-Mg-ATPase性质的研究,表明Ca-ATPase、Ca-Mg-AT-Pase反应的适宜pH值分别为7.0-8.5和6.5。适温皆为35-40℃;底物（ATP）最适浓度均为0.5mmol/L。比较测定了家蝇三个品系中两种ATPase的活性及拟除虫菊酯对该酶的抑制作用,实验证明,敏感与Del-R、2Cl-R品系间Ca-ATPase、Ca-Mg-ATPase活力无明显的差异。溴氰菊酯、氯菊酯可部分地抑制敏感品系家蝇Ca-ATPase活性,而对拟除虫菊酯抗性品系Ca-ATPase无抑制作用,从而证明,Del-R、2Cl-B品系Ca-ATPase对拟除虫菊酯的敏感性已明显降低,这可能能是击倒抗性机制之一。实验还表明,拟除虫菊酯对Ca-Mg-ATPase基本上无抑制作用,这说明在家蝇中,Ca-Mg-ATPase并不是拟除虫菊酯的一个靶标位点。     

用PCR—RFLP方法研究藏族HLA0—DQA1和—DQB1基因多态性

应用目前ＨＬＡ研究领域中成熟的、有效的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ基因分型技术,从ＤＮＡ水平对藏族健康群体进行了ＨＬＡ－ＤＱＡ１（４９人）和－ＤＱＢ１（４９人）基因分型,这在国内外属首次。所采用的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ基因分型技术是在ＨＬＡ－ＤＱＡ１和－ＤＱＢ１各等位基因全部序列已知的情况下,对其第２个外显子碱基序列扩增进而进行ＲＦＬＰ分析的方法。这种方法得到的ＲＦＬＰ的所有片段都是已知序列,因而精确度很高,同时为     

人β干扰素重组质粒导入CHO—dhfr^—细胞

采用磷酸钙共沉淀技术,将人β干扰素编码区基因片段与pSV_2-dhfr载体质粒SV40早期启动子下游60碱基对(bp)处重组的pSVEHβ_1质粒导入中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷型株,简称CHO-dhfr~-细胞。共转化后,于选择培养基中长出的265个细胞克隆中随机挑出13株细胞克隆进行表达水平检测,其中7株细胞有表达,表达阳性细胞克隆株占54％,共转化率为1.33×10~(-4)。