胰岛素样生长因子的发现及其生理作用

胰岛素样生长因子的发现及其生理作用贺淹才（江西农业大学畜牧兽医学院,南昌３３００４５）关键词胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）近年来,动物血液中的许多生长因子对动物生长、代谢的调节作用引起了人们极大兴趣。这些血浆中的生长因子有：胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）、成...     

胰岛素样生长因子研究进展

胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）是一类多功能细胞增殖凋控因子。因其化学结构民胰岛素原类似而得名。ＩＧＦ系统由２个多肽类生长因子、２类受体和至少６种结合蛋白组成。本仅不ＩＧＦ系统成员的分子生物学方面的最新进展及其主要生物学功能作一综述。     

胰岛素样生长因子系统的营养调控

胰岛素样生长因子系统的营养调控邹仕庚王恬（南京农业大学动物科技学院,南京２１００９５）胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）因其结构和功能类似胰岛素而得名,ＩＧＦ主要包括ＩＧＦⅠ和ＩＧＦⅡ。体内多种组织都能合成ＩＧＦ,表达ＩＧＦ受体;ＩＧＦ大部分由肝脏合成,...     

IGF—I及其受体,IGF结合蛋白—2和LH受体mRNA在卵泡中的表达

利用原位杂交和原位ＤＮＡ－３’末端标记的方法研究了胰岛素样生长因子－Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）,ＩＧＦ－Ｉ受体,ＩＧＦ结合蛋白－２,和促性腺激素受体的信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）在不同生长与闭锁阶段的大鼠卵巢卵泡中表达的变化,结果表明：ＩＧＦ－Ｉ主要在正常生长的初级卵泡,窦前卵泡和小窦状卵泡中表达。在各生长与成熟阶段的卵泡中都检测到ＩＧＦ－Ｉ受体ｍＲＮＡ,闭锁卵泡的ＩＧＦ－Ｉ受体表达降低,窦前与窦状的生长和闭锁     

胰岛素样生长因子与糖尿病神经病变

糖尿病神经病变给糖尿病患者造成严重危害,但其发生机制至今未明。最近研究表明：胰岛素样生长因子（ＩＧＦｓ）对感觉、运动及交感神经元具有支持营养作用;临床糖尿病患者及实验性糖尿病大鼠体内ＩＧＦｓ活性及ＩＧＦｓ ｍＲＮＡ表达水平下降;补充ＩＧＦｓ可减轻糖尿病神经损害程度。上述研究提示ＩＧＦｓ活性下降在糖尿病神经病变的发生中起重要作用。     

人胰岛素样生长因子Ⅰ在大肠杆菌中的表达研究

胰岛素样生长因子Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）是一种多功能细胞增殖调控因子,它对许多疾病有较好的治疗作用．为了获得大量的ＩＧＦ－Ⅰ产品,在测定了ＩＧＦ－Ⅰ全长序列的基础上,构建了ＩＧＦ－Ⅰ表达载体ｐＢＶＩＧＦ,经热诱导表达后,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：含有重组表达质粒的菌株可表达出７．６ｋＤ的蛋白．研究了不同菌株对ＩＧＦ－Ⅰ表达的影响．ＩＧＦ－Ⅰ的表达水平可达１５ｍｇ／Ｌ．重组蛋白主要以包涵体形式存在,进行了初步纯化和复性研究,Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹表明重组蛋白具有ＩＧＦ－Ⅰ的抗原性．并初步建立了ＩＧＦ－Ⅰ生物活性测定方法．     

胰岛素样生长因子结构蛋白功能及其调节机制

胰岛素样生长因子结合蛋白 (ＩＧＦＢＰ)是ＩＧＦ家族的重要成员 ,ＩＧＦ及其生物活性的调节与ＩＧＦＢＰ密切相关。ＩＧＦＢＰ还具有独立于ＩＧＦ的生物活性 ,并拥有自己的调节机制。1 .ＩＧＦＢＰ简介目前 ,已确定了 6种与ＩＧＦ有高亲和力的ＩＧＦＢＰ(ＩＧＦＢＰ1～ 6 ) ,另有 4种与ＩＧＦ有较低亲和力的ＩＧＦＢＰ(ＩＧＦＢＰ相关肽 )也有报道[1] 。ＩＧＦＢＰ1～ 6有 35%的氨基酸序列同源 ,它们都有相同的Ｎ端和Ｃ端模式 ,只是中间区不同。其中 ,前 5种与ＩＧＦ Ｉ的结合优先于与ＩＧＦ ＩＩ的结合 ,而ＩＧＦＢＰ 6与ＩＧＦ ＩＩ的亲…     

乳源性生物活肽及其生物学与保健意义

乳中含有大量的生物活性肽,或自然存在于乳中,或来自乳的酶解产物。前一类生物活性肽包括表皮生长因子（ＥＧＦ）、转化生长因子（ＴＧＦ）、神经生长因子（ＮＧＦ）、胰岛素及胰岛素生长因子Ⅰ和Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅰ、ＩＧＦ－Ⅱ）。初乳中这类生物活性肽的浓度一般高于血液中的浓度。由于初生动物胃肠道的蛋白酶活性低以及乳中存在蛋白酶抑制因子,这些活性肽能在哺乳期动物的消化道内存活。饲喂ＥＧＦ、胰岛素和ＩＧＦ－Ⅰ可加快新生     

鲑鱼胰岛素样生长因子I cDNA在镜鲤中的表达

通过显微注射技术,将冠以鲤鱼β－肌动蛋白基因（ＣＡ）启动调控顺序的鲑鱼胰岛素样生长因子Ｉ（ｓＩＧＦ－Ｉ）的ｃＤＮＡ,即ＣＡｓＩＧＦｃ注入镜鲤受精卵内,经聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术检测,受本胚胎发育各期均携有外源基因拷贝。     

用酵母双杂交系统研究胰岛素样生长因子—1突变体与其结合蛋白 …

为研究胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ１）及其突变体与ＩＧＦ结合蛋白－３（ＩＧＦＢＰ３）的相互作用,针对ＩＧＦ１的第３、４、１５、１６位氨基酸残基,采用定点突变的方法构建了「Ｙ１５Ｌ１６」ＩＧＦ１和「Ｑ３Ａ４Ｙ１５Ｌ１６」ＩＧＦ１。然后分别将ＩＧＦ１／ＩＧＦ１突变体和ＩＧＦＢＰ３ ｃＤＮＡ克隆至酵母表达载体ｐＧＢＴ９和ｐＡＣＴ２中,利用用酵母双杂交技术检测ＩＧＦ１／ＩＧＦ１突变体和ＩＧＦＢＰ３之间的相     

胰岛素样生长因子Ⅱ对大鼠离体培养黄体细胞孕酮生成的影响

本实验观察了胰岛素样生长因子Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）对大鼠离体培养黄体细胞孕酮生长的影响,并对其作用机制进行了探讨。结果显示,ＩＧＦ－Ⅱ能显著地促进大鼠离体培养黄体细胞孕酮生成并呈剂量－效应关系,同时还能促进＾３Ｈ－亮氨酸掺入黄体细胞蛋白质的合成,促进＾３Ｈ－胸腺嘧啶掺入ＤＮＡ的合成,而上述效应分别被放线菌酮（ＣＹＸ）和放线菌素Ｄ所抑制。此外,ＩＧＦ－Ⅱ对大鼠离体黄体细胞内泊性ｃＡＭＰ和ｈＣＧ诱导的ｃＡＭ     

人基因使猪减少脂肪

美国农业部（ＵＳＤＡ）（Ｂｅｌｔｓｖｉｌｅ,ＭＤ）的研究者采用ＧｅｎｅｍｅｄｉｃｉｎｅＩｎｃ．’ｓ（ＴｈｅＷｏｏｄｌａｎｄｓ,ＴＺ）公司的胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）基因培育出体脂减少的猪。此项研究将ＩＧＦ－１转基因猪与导入生长激素（ＧＨ）基...     

一种新的胰岛素及生长因子促生长活性测定系统

ＧＲ２Ｈ６细胞是从小鼠乳腺癌细胞衍生来的成纤维细胞样细胞株。该细胞能在特定的无血清培养液中生长,我们发现在此无血清培养条件下,ＧＲ２Ｈ６细胞生长情况与胰岛素、表皮生长因子和类胰岛素生长因子－Ｉ的浓度有较好的相关性,根据细胞数目和ＤＮＡ总量的变化可定量测定胰岛素和上述生长因子对该细胞株的促生长作用。据此,本实验室建立了一种新的胰岛素与生长因子促生长活性测定系统。与已知的胰岛素和生长因子测活系统比较,     

高效融合表达中载体蛋白对hIGF—I免疫原性结构形成的…

利用人工全合成人胰岛素样生长因子Ｉ（ｈＩＧＦ－Ｉ）基因,构建了分别以β－半乳糖苷酶的三种即含５９０、３１０、２８０个氨基酸序列片段和一种以Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ、Ｃ结构域为载体蛋白的融合型表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达了以上各种ｈＩＧＦ－Ｉ的融合蛋白产物。通过对羟胺裂解前后的ｈＩＧＦ－Ｉ产物进行放射免疫结合测定分析;结果显示以β－Ｇａｌ５９０、３１０、２８０为载体蛋白;均严重影响与其融合的ｈＩＧＦ－     

双链杂交分子“胰岛素－类胰岛素生长因子－I

以去Ｂ链Ｃ端八肽胰岛素（ＤＯＩ）和化学合成的ＩＧＦ－Ｉ的２２～２９（８肽）及２２－３２（１１肽）为底物,用酶促半合成方法制备了杂交分子“胰岛素－类胰岛素生长因子－Ｉ,Ｉｎｓ／ＩＧＦ－Ｉ（８）和Ｉｎｓ／ＩＧＦ－Ｉ（１１）。研究了它们的胰岛素生物活性,结果表明,猪胰岛素Ｂ链Ｃ端Ｂ２７的Ｔｈｒ被Ａｓｎ取代,Ｂ３０的Ａｌａ被Ｔｈｒ取代同时Ｂ２５～Ｂ２６及Ｂ２８－Ｂ２ｋ９氨基酸顺序颠倒以及在Ｂ链Ｃ末端延长３肽（Ｇｌｙ－Ｔｙｒ－Ｇｌｙ）都不影响胰岛素的生物活力。     

甲状旁腺素、胰岛素样生长因子-Ⅰ对骨特征性标志蛋白的影响

为了阐明甲状旁腺素（ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅ,ＰＴＨ）、胰岛素样生长因子－Ⅰ（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－Ⅰ,ＩＧＦ－Ⅰ）在促成骨样细胞ＲＯＳ１７／２．８增殖的同时对其分化状况的影响,研究了ＰＴＨ、ＩＧＦ－Ⅰ对骨特征性标志蛋白碱性磷酸酶（ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ,ＡＬＰ）活性、骨钙素（ｏｓｔｅｏｃａｌ－ｃｉｎ）ｍＲＮＡ表达及骨胶原蛋白（ｃｏｌａｇｅｎ）合成的影响．结果表明,ＰＴＨ、ＩＧＦ－Ⅰ均可抑制ＡＬＰ活性,ＰＴＨ的抑制作用强于ＩＧＦ－Ⅰ,抑制作用具有时间剂量依赖性;ＰＴＨ、ＩＧＦ－Ⅰ均可诱导骨钙素ｍＲＮＡ表达增加;ＰＴＨ能够促进３Ｈ－脯氨酸参入新生小鼠颅骨组织,既ＰＴＨ能够骨胶原蛋白合成增加．这些结果提示,ＰＴＨ、ＩＧＦ－Ⅰ在促成骨样细胞ＲＯＳ１７／２．８增殖的同时也促进其分化,表明在成骨细胞的生发成熟过程中,增殖、分化现象相辅相成,相伴而行．     

胰岛素样生长因子Ⅱ在肾上腺、颈动脉体及其肿瘤中的表达

本研究应用胰岛素样生长因于Ⅱ单克隆抗体（ＩＧＦ－Ⅱ）对人肾上腺、颈动脉体及其来源的肿瘤进行免疫组织化学定位研究。发现,成人肾上腺使质所有细胞的１．２—１０％的细胞显色,嗜铬细胞瘤所有细胞的７５％显色,颈动脉体瘤所有细胞的５０％显色,并且大部分为来自主细胞的瘤细胞显色。ＩＧＦ一Ⅱ阳性表达绝大多数在细胞浆内呈粗大颗粒状且弥漫分布,少数在核周密布。结果表明：人ＩＧＦ－Ⅱ存在成人肾上腺髓质、颈动脉体及其来源的肿瘤组织中,ＩＧＦ－Ⅱ在肿瘤中表达强于正常组织。     

两栖和爬行类生长及生长激素分泌活动的调节

根据生长内分泌学,综述了近年来两栖和爬行类生长激素（ＧＨ）分泌活动的调节及生长激素在两栖爬行类生长中作用这一研究领域所取得的主要成就和研究进展,研究结果表明：在脊椎动物的进化过程中,ＧＨ的化学结构和功能是相当保守的;ＧＨ对两栖爬行类的生长起促进作用;类胰岛素生长因子（ＩＧＦｓ）也能冰分传递ＧＨ促进两栖类的生长;在两栖爬行类,下丘脑对ＧＨ分泌的调控较哺乳类缺乏特异性,利用外源ＧＨ促进两栖爬行类的生长     

高效融合表达中载体蛋白对hIGF－Ⅰ免疫原性结构形成的影响

利用人工全合成人胰岛素样生长因子工（ｈＩＧＦ－Ｉ）基因,构建了分别以β－半乳糖苷醇（β－ｇａｌ）的三种即含５９０、３１０、２８０个氨基酸序列片段和一种以ＰｒｏｔｅｉｎＡ的Ｂ、Ｃ结构域（ＰＡＢＣ）为载体蛋白的融合型表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达了以上各种ｈＩＧＦ－Ｉ的融合蛋白产物。通过对羟胺裂解前后的ｈＩＧＦ－Ｉ产物进行放射免疫结合测定分析,结果显示以β－Ｇａｌ６９０、３１０、２８０为载体蛋白,均严重影响与其融合的ｈＩＧＦ－Ｉ的免疫原性结构形成,但在ＰＡＢＣ－ｈＩＧＦ－Ｉ融合蛋白中,载体蛋白ＰＡＢＣ无明显的影响作用。这表明在高融合表达低分子量蛋白或肽段中,需选择适宜的载体蛋白,以利于目的产物的功能性结构形成。     

人肝癌细胞的IGF—BP1分子特性及内源性蛋白酶对其降解的研究

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳、高效液相色谱（ＨＰＬＣ）、质谱等方法,研究了人肝癌细胞（ＨｅｐＧ２）分泌的胰岛素样生长因子结合蛋白－１（＾３５Ｓ－ＩＧＦ－ＢＰ１）的分子结构、特性,及其被内源性蛋白酶降解的特点,＾３５Ｓ－ＩＧＦ－ＢＰ１的经抗体免疫沉淀、生化分离,纯化为均一体,其分子是由多个亚构成的蛋白质,分子量约为２７ｋＤ;细胞ＵＭＲ、ＨｅｐＧ２、Ｈ３５ＢＲＬ３Ａ分泌的蛋白酶能将＾３５Ｓ－ＩＧＦ－ＢＰ１催