消化道平滑肌分化的标记物选择

鉴别低分化肿瘤的组织学起源,常需借助免疫组化染色、在染色前,合理选择出特异性强、敏感性高的抗体、对及时确定诊断等具有重要意义、为作好平滑肌分化的标记物选择,本文观察了同时作过desmin(结蛋白)和ASMA(平滑肌肌动蛋白)标记的30例消化道平滑肌肉瘤切片,对两抗体的染色结果进行了对比分析.1 材料和方法30例均取自我院1986—1992年手术切除标本、10%福尔马林固定,石蜡切片4μm厚.93年用ABC法(试剂盒为 Vector公司产品),同时对30例切片进行了desmin和ASMA标记(抗血清为Dako公司产品).工作稀释度为1:50.desmin标记前,切片经0.05%胰蛋白酶消化.肿瘤旁肠肌壁和血管平滑肌作实验阳性对照,Tris-Hce,缓冲液取代—抗作平行阴性对照.阳性染色反应分为弱阳性(+):阳性细胞数<25%;中度阳性(++ ):阳性细胞数25～50%;强阳性(卅):阳性细胞数>50%.统计学处理用X~2检验.     

介绍一种改良的油红O脂肪染色法

在日常病理诊断和科研工作中,显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色。应用过程中发现,配制该染液所用的丙酮和异丙醇容易挥发,致使染液产生沉淀,染色时易在组织切片上留下红色的结晶,给染色结果的准确判断带来很大影响。为此,我们对染液配方进行了改进,收到较好效果。材料和方法1·标本人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。2·改良的油红O染色液油红O 0.5g,50%乙醇100m l。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。3·染色步骤①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8m in…     

快速石蜡切片法在免疫组化染色中的应用

免疫组化染色在病理诊断中发挥着重要的作用,较多的应用于肿瘤的诊断和鉴别诊断,而制作出良好的组织切片是免疫组化染色的基础和前提。快速石蜡制片是病理检验的常规技术之一,我们将常     

免疫组化染色防脱片几种方法的比较

免疫组化染色技术以其操作简单、敏感性高、特异性强,能将形态和抗原定位结合起来等优点广泛应用于肿瘤临床病理诊断和鉴别诊断[1].但是影响免疫组化的因素较多[2-5],存在经验和判断上的差异.石蜡切片在免疫组化染色中的脱片问题由来已久.切片经抗原修复和缓冲液的长时间浸泡后,往往会部分或全部从载玻片上脱落,影响染色结果的判断.不同的粘附剂和粘附剂不同的涂胶方法防脱片效果不尽相同[6-7].我们在工作中也经常遇到石蜡切片脱落问题,为此探讨了多聚赖氨酸较好的涂胶方法,又进一步对三种粘附剂即APES(氨醛三已氧基硅烷),多聚赖氨酸和白乳胶的防脱片效果和染色情况作了比较,成功地总结出多聚赖氨酸双涂胶法.现介绍如下:     

提高肾小球基底膜PASM染色法质量的技巧

在肾小球疾病的病理诊断中,观察与研究肾小球基底膜的改变具有极为重要的诊断价值。显示肾小球基底膜多采用PASM（Periodic Acid—Silver Methenamine）染色法,应用过程中,发现传统的PASM肾小球基底膜染色法染色效果不佳,基底膜染色显示较浅,背景较深,染色时间过长。我们经大量实验,对染液的配比、染色时间、染色孵育温度等进行了调整,收到较好的染色效果。     

淋巴组织H.E染色"发灰"现象的纠正方法

在常规病理制片技术工作中 ,经常发现淋巴组织 (如淋巴结、鼻咽部组织及扁桃体等 )由于处理不当 ,造成切片染色后组织中间出现发灰现象 ,即镜下核浆染色模糊不清或组织成片不着色。这样将给临床病理诊断带来很大困难。为此 ,我们经大量实验 ,对原组织蜡块再切片后采用下述方法进行处理 ,收到了较好的染色效果。材料和方法1.标本来源 :选取 2 5例 H.E染色切片发灰的淋巴组织原蜡块再进行切片 ,切片厚 5μm。2 .切片的处理方法 :(1)将原蜡块所制切片浸入二甲苯 、 脱蜡各 5 min;(2 )无水酒精 、 浸洗各 2 min;(2 )用无水酒精乙醚等量 (1∶…     

龙胆紫希夫氏液显示DNA染色新方法

应用龙胆紫配制成Schiff(希夫氏)试剂,在微波辐射下进行Feulgen染色,结果使正常及良、恶性肿瘤组织细胞核内DNA着紫红色,并能应用真彩色图像仪进行DNA的定量分析.其方法操作简便,便于临床病理诊断应用.现介绍如下.标本的采集:活检手术切取的肿瘤组织100余例,经甲醛固定,石蜡包埋.切片,厚5μm.染液的配制:①8.3%盐酸水溶液(HCl8.3ml、蒸馏水 91.7ml);②龙胆紫(上海试剂站)希夫氏试剂的配制同PAS方法,以龙胆紫代替碱性品红;③亚硫酸氢盐溶液(10%偏重亚硫酸钠溶液5ml、1mol/L-HCl5ml、蒸馏水90ml).染色步骤;①切片脱蜡至水—蒸馏水;②8.3%盐酸水溶液水解切片1min(微波仪5档),蒸馏水洗;③     

肺隐球菌病标本在六胺银染色中的最佳温育时间

目的探索肺隐球菌在六胺银染色中的最适当温育时间,以期获得最佳染色效果,提高病理标本肺隐球菌病的诊断率。方法收集厦门大学附属第一医院病理科2017年1月—2017年12月确诊的30例肺隐球菌感染病例,每例病例选取最具代表意义的一个蜡块连续切片3张,不同蜡块为区组因素,将每个蜡块切取的3张切片简单随机化分为3组,每组1张,通过区组随机化将90张切片随机分为A、B、C 3组,A组切片在六胺银染液步骤中采用水温箱60℃温育20～25min,B组切片在六胺银染液中温育30～35min,C组切片在六胺银染液中温育40～50min。以10分制对90张六胺银染色片进行评分,比较3组切片得分情况、显微镜下的染色效果与诊断准确率。结果 B组切片镜下显示:隐球菌染成空心黑色,细胞核呈蓝色,周围肺纤维组织呈淡棕色至棕色,隐球菌与周围肺纤维组织染色对比清晰,染色效果显著高于A组与C组。结论在六胺银染色中,采用六胺银染液在水温箱60℃温育30～35min,病理切片六胺银染色评分结果得分更高、六胺银染色效果更好、肺隐球菌病的诊断准确率更高。     

介绍一种陈旧苏木精染液复苏的方法

苏木精是组织切片制作常用细胞核染料 ,以Harris苏木精染液最为常用。Harris苏木精染液在使用一段时间后 ,染色能力逐渐减弱 ,造成细胞核着色困难 ,染色时间延长 ,虽能着色 ,但依然着色浅淡 (图 1,2 )。为此 ,我们采用在陈旧Harris苏木精染液中加入苏木精酒精液 ,经煮沸冷却后加冰醋酸的方法 ,使Harris苏木精染液恢复染色能力 ,收到了较好的效果 ,现介绍如下。1　材料与方法1 1材料 (1) 5 %苏木精酒精液苏木精(E·Merck进口分装 ) 5 g溶于无水乙醇 10 0ml,放置 4～ 5周后使用。 (2 )陈旧Harris苏木精染液80 0ml。1 2方法在 80 0ml陈旧Ha…     

淋巴结组织切片HE染色的体会

目前,组织化学、免疫组织化学、电镜和ＰＣＲ等先进技术虽已用于淋巴系统疾病,尤其是淋巴系统肿瘤的诊断、鉴别诊断和研究,但是,石蜡切片ＨＥ染色仍然是临床病理诊断最常用的有效方法。由于淋巴组织结构复杂,组织处理不当时,常常难以获得理想的切片质量,给准确诊断带来许多困难,有时甚至造成误诊。影响淋巴结石蜡切片质量的因素较多,但我们认为关键应注意以下几个环节。１　淋巴结活检石蜡切片的应用淋巴结石蜡切片主要用于活检和穿刺组织的制片,为了获得准确的病理诊断、疗效判断和某些研究工作,需要高质量的ＨＥ染色切片。诊断…     

石蜡切片法中染色技术的改良

石蜡切片是观察动植物组织最直接有效的方法之一。本实验对水稻品种9311的叶片进行切片并用1%的番红—乙醇染液和1%的苯胺蓝—乙醇染液进行染色,结果显示此改良方法得到的组织比传统石蜡切片更完整,染色的效果比传统石蜡切片更清晰,并且利用此方法对水稻叶片进行制片,可以大量缩短制片后期复水及脱水的时间,提高工作效率。     

Triton-100在抗酸杆菌染色中的应用

在常规病理诊断工作中,多采用传统的ZiehlNeelsen染色法对抗酸杆菌进行染色。由于结核杆菌的菌体含有一层蜡质使染液难以进入,致使染色效果不佳。我们根据抗酸杆菌的组织结构特点,将Triton-100加入染液中,使染色结果得到了明显改善。现将此法介绍如下。     

冰冻切片与石蜡切片对乳腺肿瘤的诊断价值研究

目的:分析和比较冰冻切片与石蜡切片对乳腺肿瘤的诊断价值。方法:选取480例新鲜乳腺标本,将其制成冰冻切片以及石蜡切片,根据诊断结果进行对比分析,评价乳腺肿瘤的冰冻切片与石蜡切片的对乳腺肿瘤的诊断价值。结果:经石蜡切片诊断乳腺良性肿瘤277例,占57.71%,良性肿瘤中以乳腺纤维瘤诊断居多;经石蜡切片诊断乳腺恶性肿瘤203例,占42.29%,以乳腺浸润性导管癌居多。冰冻切片诊断乳腺良性肿瘤279例,占58.13%;恶性肿瘤195例,占40.62%;延迟诊断6例,占1.25%。以石蜡切片诊断结果为金标准,冰冻切片诊断乳腺良性肿瘤的准确率为98.56%(273/277),诊断恶性肿瘤的准确率为95.07%(193/203),假阳性率为0.72%(2/277),假阴性率为2.96%(6/203),冰冻切片与石蜡切片诊断乳腺肿瘤的结果具有显著一致性,K值为0.965(P0.05)。结论:冰冻切片与石蜡切片诊断乳腺肿瘤的符合率较高,可作为术中快速病理检测的手段,但该种切片方式存在少量延迟诊断,多与术者操作经验有关,故术中应注重制片过程,提高冰冻切片质量。     

组织保护液在NADH-TR组织化学方法中的应用

还原型辅酶 四唑氮还原酶 (NADH- TR)组织化学方法是区别肌肉 、 型纤维的重要技术 ,该酶的显示对神经肌病的病理诊断和鉴别诊断具有实用意义。传统的酶组织化学方法 ,染色前多采用 1 %甲醛 -钙液及丙酮等固定液在 4℃下对组织进行处理 ,而后冰冻制片。实际应用中发现 ,经这些方法处理的组织 ,染色后酶活性明显降低 ,且容易扩散。我们经大量实验 ,在酶显色前 ,改用自行研制的组织保护液 (Tissue Protection Solution,TPS)对组织进行前期处理 ;同时对孵育液的配方进行改良 ,收到了理想染色效果。现将此法介绍如下 :1 .材料和方法1 .1…     

硫堇显示细胞核DNA组织化学染色技术

细胞DNA含量反映细胞生长及分化状态,测定其含量的变化对判断肿瘤的性质及预后具有重要意义。在进行各种肿瘤细胞核DNA含量图像分析时,发现细胞核DNA染色质量的好坏直接影响DNA含量测定结果的准确性。应用中发现传统的Feulgen染色技术存在染色特异性不强,背景易共染,染液配制较复杂,对反应条件要求严格,染色时间较长,切片易褪色等缺点。     

冰冻切片染色方法的改进

冰冻切片染色方法的改进熊正文,胡海霞,苏红,商磊岩（张家口解放军二五一医院病理科,０７５０００）冰冻切片是肿瘤病理快速诊断不可缺少的手段,目前,常用的固定染色方法存在着对组织结构、核染色质颗粒不清晰等缺点,针对上述缺点,经参考有关文献,对ＡＡＦ液进行...     

生物组织石蜡切片的不脱蜡染色程序

石蜡切片法是生物学中应用最广泛的一种研究技术,沿用至今已一百余年,形成了一个基本固定的操作程序,为人们所普遍采用。常规的石蜡切片的染色,必须首先用二甲苯将石蜡溶去(即脱蜡),然后经下行的梯度酒精将切片下降至水(水化),用染料的水溶液进行染色;染色后又经上行梯度酒精逐级脱水,经二甲苯透明后用树胶封藏。此染色程序不仅手续较烦琐,而且切片在染色后脱水时容易褪色以及在此过程中组织里一些孤立分散的细胞如孢子、     

56例卵巢上皮性交界性肿瘤的临床和病理分析

目的：探讨卵巢交界性上皮肿瘤（OBT）的临床及病理特征,以供临床和病理借鉴.方法：收集病理快速冰冻切片和石蜡切片确诊的交界性上皮性卵巢肿瘤患者56例,术前均行超声检查及CA125测定.结果：56例OBT中以粘液性肿瘤最多,为33例,占58.9%,浆液性肿瘤23例占41.1%.其中以Ⅰ期多见,手术包括保守性手术治疗交界性肿瘤,预后良好.冰冻切片诊断卵巢交界性上皮肿瘤的总体准确率为64.2%.结论：诊断OBT需根据临床症状、肿瘤标记物及影像学综合判断,术中冰冻切片检查有一定帮助,但最后诊断还是应主要依据病理切片.为提高快速冰冻切片诊断的准确率,应做连续切片.     

小肠腺三色染色法

我们采用三色染色的方法对小肠肠腺细胞进行染色,杯状细胞、潘氏细胞、胞质和肠腺基膜呈现三种不同的颜色。细胞形态清晰,对比鲜艳,收到了理想效果。材料和方法1·材料人小肠为手术切除新鲜标本。10%甲醛固定24-48h,常规脱水,石蜡包埋。2·方法石蜡切片厚4-6μm,切片脱蜡,蒸馏水洗2m in,复合染液染3-5m in,70%乙醇分色,蒸馏水洗1m in,阿利新蓝染5m in,蒸馏水轻洗;0·2%光绿复染胞质、肠腺基膜20s;70%盐酸乙醇分色;梯度乙醇脱水;二甲苯透明;中性树胶封固。3·染液配制(1)复合染液:1%伊红(1g伊红,70%乙醇100m l)40m l,2%偶氮桃红(2g偶氮桃红甲…     

提高网状纤维染色质量的技术探讨

网状纤维染色在病理工作中是一种最常用的特殊染色方法,它可以用来显示病变组织网状支架的破坏情况,对于判断病变的性质、程度及其发展与转归具有重要意义.尤其在肿瘤病理诊断中,对于鉴别来源于上皮组织和间叶组织的恶性肿瘤具有重要价值.网状纤维染色方法很多,但常用的方法是Gordon-Sweet氏法.该法是一种嗜银染色法,易受多种因素的影响,在染色过程中若操作不当,极易造成染色效果不佳.本文对此法进行了改良,并对其染色机理进行了探讨,同时对染色过程中易出现的问题,分析其原因,提出了具体解决办法,使染色质量明显提高.