细菌的酶抗酶及免疫酶染色法的研究

细菌的酶抗酶(PAP)及免疫酶(IES)染色法是测定抗体或抗原的一种新方法。它操作简单,不须荧光显微镜及分光光度等特殊设备,可直接用肉眼判定。目前国内尚未见到在细菌方面应用的报导。作者自已制作了酶抗酶血清及市     

外切菊粉酶的酶学研究进展

菊粉富含于菊芋、菊苣等多种菊科植物中,是一种来源丰富的可再生资源。菊粉是一种由D 呋喃果糖经β-2, 1-糖苷键连接,还原端经α-1, 2-糖苷键连接1个葡萄糖残基构成的果聚糖。菊粉能被菊粉酶水解,生产果糖、高果糖浆、菊粉寡糖,可通过微生物发酵生产燃料酒精等产品,在食品、生物能源、医疗保健等方面都有重要应用,受到广泛关注。介绍外切菊粉酶的分类、来源、结构和催化机理,重点总结近10年微生物来源外切菊粉酶的重组表达和酶学性质情况,简述外切菊粉酶在食品、能源等方面的应用,展望外切菊粉酶的研究热点及方向。     

琼胶酶酶学研究进展

琼胶酶是一类能够降解琼胶多糖的酶的总称,根据其降解琼胶多糖的作用方式不同,分为α-琼胶酶(EC3.2.1.158)和β-琼胶酶(EC3.2.1.81)两种。本文从琼胶酶的酶学性质、晶体结构、催化机制和酶基因研究等方面,综述了近年来国内外琼胶酶酶学的最新研究进展,这将有益于琼胶酶未来的应用。     

真菌漆酶的酶活测定方法评价

目前真菌漆酶酶活的测定方法多样,没有统一的标准,致使不同研究之间的漆酶酶活无法进行比较分析,也造成漆酶产品在酶活质量意义上的混乱。因此,对测定真菌漆酶酶活的各种不同的分光光度法进行了综述和比较分析,认为采用ABTS法作为测定漆酶酶活的方法较具合理性和科学性,建议作为漆酶酶活测定的统一方法。     

天然巴曲酶的酶学性质研究

目的 研究巴西矛头蝮蛇蛇毒中纯化的天然巴曲酶的酶学性质.方法 测定不同的温度、pH值和金属离子等条件对重组定点突变巴曲酶活性的影响.结果 实验表明,该酶在温度30～40℃,pH 6.5～9.0活性较为稳定;其最适反应温度为37℃,pH为7.5;Mg2+、K+和Ca2+离子对酶活有激活作用,而Cu2+、Fe2+和Zn2+离子对该酶有抑制作用.结论 从蛇毒提取的天然巴曲酶酶学性质比较稳定.     

酶的实验

这组实验与高中生物课的《新陈代谢与酶》一节的教学相配合演示给学生。     

作为人造极端酶的交联酶晶体

作为人造极端酶的交联酶晶体林影卢荣德郭勇（华南理工大学生物工程系,广州５１０６４０关键词交联酶晶体极端酶酶作为生物催化剂,催化效率高,立体选择性和底物专一性强,是普通化学催化剂所不可比拟的。然而,在酶的应用过程中还有很多令人不满意之处,如在环境中常常...     

酶的结晶

当酶被提到相当纯以后,就有可能将它结晶出来。自从1926年首次得到脲酶结晶以来,已得到了百余种酶的结晶。随着酶在各方面日益广泛的应用及其作用规律的深入研究,     

褐藻胶裂解酶基因的克隆表达及重组酶酶学性质

【目的】克隆交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)BYS-2的褐藻胶裂解酶基因,实现其在大肠杆菌细胞中异源表达,对分离纯化的重组酶进行酶学性质研究。【方法】以交替假单胞菌BYS-2菌株基因组DNA为模板,克隆得到褐藻胶裂解酶基因alg738,构建重组基因工程菌BL21(DE3)/p ET22b-alg738,诱导表达,表达产物通过Ni-NTA树脂纯化后进行酶学性质研究。【结果】重组酶的最适反应p H为8.0,在p H 6.0-9.0范围内37°C保温1 h仍能保持84%以上的相对酶活力,具有较好的p H稳定性;最适反应温度为45°C,热稳定性实验显示在37°C下保温60 min其残余酶活力仍达66.6%;在5 mmol/L浓度下,Na~+、Mg~(2+)、Mn~(2+)对该酶具有明显的促进作用,Ni~(2+)、Co~(2+)、Cu~(2+)、Hg~(2+)、Zn~(2+)、EDTA、β-巯基乙醇、SDS具有明显的抑制作用。动力学参数Km、Vmax分别为1.11 g/L和0.011 g/(L·min),底物特异性分析表明该重组酶为偏好聚甘露糖醛酸钠(Poly M)裂解作用的双功能酶。【结论】重组褐藻胶裂解酶具有良好的酶学特性,为褐藻胶裂解酶的开发应用打下基础。     

酶的辅因子

(一)辅因子概念酶的化学本质是蛋白质,它和其它蛋白质一样,主要由氨基酸组成。因此也具有两性电解质的性质,并且具有一、二、三、四级结构。酶和其它蛋白质一样,其中有些是单纯蛋白质,有些是结合蛋白质。脲酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和核糖酸酶等一般水解酶都属于简单蛋白质。这些酶只由氨基酸组成,此外不含其它成份。转氨酶、碳酸酐酶、乳酸脱氢酶及其它氧化还原酶类等均属于结合蛋白质。这些酶除了蛋白质组份外,还含有对热稳定的非蛋白的小分子物质。前者称为酶     

蚯蚓外源酶与内源酶酶解产物分析

本试验采用了枯草杆菌(Bacillus subtilis)AS1.398枯草杆菌蛋白酶和自溶制备蚯蚓肽,通过前期单因素试验,设计正交试验L9(34),以氨基氮数,多肽浓度为衡量指标,对最佳酶解条件进行筛选研究,并分析了酶解液氨基酸组成和相对分子量的分布。结果表明:AS1.398枯草杆菌蛋白酶最佳酶解条为pH 6.5、酶浓度1%、温度50℃、反应时间8 h,在此条件下,酶解蚯蚓蛋白的每100 mL水解液氨基氮数可以达到16.55 mmol,多肽浓度达9.22 mg/mL;自溶酶解蚯蚓的最佳条件pH 7.0、底物浓度1∶2、温度50℃、反应时间6 h,在此条件下,酶解蚯蚓蛋白的每100 mL水解液氨基氮数可以达到21.55 mmol,多肽浓度达11.65 mg/mL;二者酶解产物分子量大部分是在5000以下的多肽、小肽及氨基酸的混合物,其中分子量在300以下占了80%,氨基酸组成平衡,含量丰富,可用来制取新型氨基酸微量元素及小肽添加剂。通过控制酶解条件,蚯蚓可以利用自身的酶源自溶来代替外源酶,从而降低成本。     

纳米酶:新一代人工模拟酶

正酶是活细胞产生的一类具有催化作用的有机分子.1877年,德国科学家Wilhelm Kuhne将这类分子命名为"酶".随后,美国科学家James B.Sumner将其鉴定为一种蛋白质.天然酶具有催化效率高、底物专一、反应条件温和等特点.然而,由于酶的化学本质是蛋白质,在酸、碱、热等非生理环境中容易发生结构变化而失活.为此,科学家一直在寻求用化学合成法制备人工模拟酶,以便在非生理环境中应用.但如何提高模拟酶的催化效率,一直是该领域的核心问题之一.特别是,能否用无机材料制造出人工酶,使其不仅具有生物酶     

辣根过氧化物酶模拟酶研究进展

辣根过氧化物酶 (HRP)是一种常用的工具酶 ,对其模拟酶的研究是近年来生物化学和有机化学的重要课题 ,具有重要的理论意义和应用价值。本文评述了近十年来HRP模拟酶的研究进展。     

酶技术发展与酶定向进化

在分子水平改良酶的结构和功能是对工业微生物菌种传统诱变育种的发展和扬弃。采用ＤＮＡ改组,酶定向进化,分子孵化技术改良产酶编码基因可大大提高产酶基因在宿主中的表达,从而提高酶的活力,增加酶的稳定性并产生其它附加功能。本文除了分析酶学研究和应用的一些最新观点和实施技术,还对当前酶制品的国际市场,传统酶与特殊酶的市场份额等作了介绍。     

融合酶构建技术在酶的改性以及多功能酶的构建方面的应用

融合酶技术是酶的改造技术之一。应用融合酶技术还可以创造出多功能的新酶,这些新酶有望应用于食品、化工等领域。目前研究表明,融合酶在低聚糖制备,生物燃料,生物材料,氨基酸发酵以及生物传感器等领域极具应用前景。融合酶的构建技术有理性设计和非理性设计,这两种技术各有利弊。整理了近年融合酶在以上领域中的研究成果,对融合酶的工业应用进行讨论。     

木瓜凝乳蛋白酶的酶学性质研究

以酪蛋白为底物,木瓜凝乳蛋白酶的最适反应温度为80℃(pH7.0),最适pH为3-5(37℃)。在pH为7.0、反应温度为37℃的条件下,木瓜凝乳蛋白酶的Km值为1.25g·L-1,Vmax为0.1 g·L-1min-1。低浓度的NaCl和Ca2+对木瓜凝乳蛋白酶有激活作用,盐酸胍对其有抑制作用。     

漫谈酶营养和酶的养生保健功能

酶营养学是近年来所形成的抗病抗衰老学说之一,酶营养学家做了大量研究终于明白机体衰老和慢性病根源是由于体酶不足所引起的。不良的生活习惯和饮食可引起消化不良,从而导致体酶的大量损耗,因此提倡改善饮食和生活习惯来节约体酶的消耗以防止体酶之无谓浪费,并多食生鲜果蔬及酶补充剂是延缓衰老、减少慢性病发生的有效措施。     

噬菌体整合酶--基因转移的工具酶

噬茵体整合酶是整合位点序列特异性的酶类。由于这一特性,它可用于向染色体定位特异性地导入目的基因,在遗传工程、基因治疗、转基因动物等领域极具应用前景。本文综述噬茵体整合酶的发现与分类、结构与功能及其应用前景。     

关于多功能酶与多酶复合体的教学

多功能酶与多酶复合体这两个概念有的学生在学习生化时不易分清。究其原因 ,盖由于多酶复合体所含多种酶其分别表现出的酶功能加在一起也有多种所致。实际上这两个概念不仅定义不同 ,而且有其特点可循。多功能酶是指在不同条件下显示不同催化功能的同一种 (酶 )蛋白 ,具体表现在酶所作用的底物和催化的反应在不同条件下是不同的 ,但其氨基酸顺序是不变的。最简单的多功能酶即双功能酶 ,如磷酸果糖激酶 2与果糖二磷酸酶 2 ,分别催化下列两个不同的反应 ,但其氨基酸顺序是一样的 ,只是其中一个较为特殊的Ｓｅｒ—ＯＨ发生磷酸化与否的差别 (该…