过硫酸铵-N,N,N′,N′-四甲基乙二胺体系产生的氧自由基及其清除的研究

应用ESR和自旋捕集相结合的技术直接测定了过硫酸铵—N,N,N′,N′-四甲基乙二胺(AP-TEMED)体系产生的氧自由基,经计算机波谱模拟和计算波谱参数证实该体系产生的氧自由基是O_2~-和·OH。并用维生素C、茶多酚、超氧化物歧化酶等氧自由基清除剂,从聚丙烯酰胺凝胶法、化学发光法和脂质过氧化法不同角度研究了AP-TEMED体系在自由基研究方面的应用意义。     

N,N,N-三甲基壳聚糖甲基硫酸盐的合成及理化性质的测定

壳聚糖与甲醛、甲酸反应得到N,N-二甲基壳聚糖,然后以硫酸二甲酯为季铵化试剂反应得到N,N,N-三甲基壳聚糖甲基硫酸盐(TMCMS),用IR1、H NMR和元素分析对其结构进行了表征。元素分析结果表明其季铵化度为74.6%,差示扫描量热法和热重分析法结果表明其热稳定性比壳聚糖差,但其水溶性明显优于壳聚糖,25℃时在水中的溶解度可达20 mg/mL,浓度为2 mg/mL时在pH 3～12范围内无沉淀产生。     

核磁共振技术在生物物理学领域中的应用

核磁共振波谱法(NMR)是利用核磁共振波谱对纯化合物进行结构测定,并定性或定量分析其微结构的一种研究手段.随着脉冲傅立叶变换技术和超导磁体的发展和普及.15N和31P等核磁共振谱(以15N和31P原子为测定对象得出的图谱),以及诸如二维核磁共振谱等新技术和新方法不断涌现并完善,核磁共振波谱法在生物学领域的应用也越来越广泛.在调研大量国外文献基础上,介绍NMR方法在生命科学研究方面的应用研究成果.     

木立芦荟多糖提取的工艺优化及其清除活性氧自由基的研究

对影响木立芦荟多糖提取的温度、时间和乙醇浓度3个因素进行L9(33)正交试验,分析其主要影响因素并对提取多糖进行活性测定。结果表明:提取温度显著影响多糖得率,最佳工艺条件为提取温度85℃、乙醇体积分数80%,时间1 h。用过硫酸铵/N,N,N,,N,-四甲基乙二胺(AP/TEMED)体系产生的氧自由基O2-.对在最佳工艺条件下得到的多糖进行活性氧自由基清除研究,发现其具有较高的清除能力。     

用电子自旋标记法研究γ辐照对红细胞膜的影响

本文用5-氮氧自由基硬脂酸、12-氮??氧自由基硬脂酸和16-氮氧自由基硬脂酸三种脂肪酸自旋标记物对人红细胞膜(血影)的不同深度膜脂的流动性作了进一步的研究,所得到的电子自旋共振波谱表明它们的序参数都随γ照射剂量的增大而增大。本文还用马来酰亚胺氮氧自由基标记在膜蛋白的SH基团上,所得到的波谱表明其旋转相关时间和强固定化对弱固定化组分的谱线高度的比值也都随γ辐照剂量增大而增大。结果说明γ辐照后,人红细胞膜的流动性降低。这与我们用荧光探针研究所得到的结果相似。     

6个不同产地的太子参对超氧自由基清除作用的研究

采用邻苯三酚自氧化一化学发光体系,应用智能化学发光法对６个不同产地的太子参物的超氧自由基清除能力进行测定。研究结果表明６个不同产地的太子参均具清除超氧自由基的作用,其中以安徽广德产地的太子参抑制自由基能力最强,其半数抑制率达０．５０４６４ｇ／ｍｌ。研究表明,各产地太子参均具稳定的非酶类清除超氧自由基的ＳＯＤ样作用物质。本文对快速检测不同产地的同种药用植物抑制超氧自由基的能力并筛选其优质资源提供了研     

不同水旱轮作体系稻田土壤剖面N2O的分布特征

通过原位采集淹水和排水状态下土壤剖面4个层次的气体,研究氧化亚氮(N2O)在水旱轮作体系稻田土壤剖面中的动态分布特征.试验设置小麦-单季稻和油菜-双季稻两种轮作体系,包括施N和不施N两种施肥方式.结果表明:施用N肥极显著促进了土壤剖面N2O的产生(P＜0.01),不同层次间N2O浓度相关性极显著(P＜0.01),小麦、油菜生长期施N和无N处理下层30 cm和50 cm处N2O浓度均高于表层7 cm和15 cm处;早稻无N处理则为表层7 cm和15 cm处高于下层30 cm和50 cm处(P＜0.05),其他水稻处理各层次间无显著差异.无N处理土壤N2O峰值出现在旱作向水稻的转变期,施N处理则出现在旱作第2次追肥后,季节转变期也有较高的N2O浓度.     

微生物来源的HLE抑制剂N01WA-735E的研究

人白细胞弹性蛋白酶抑制剂为筛选炎症和癌症的重要靶点。应用白细胞弹性蛋白酶抑制剂高通量的筛选模型对数千株放线菌进行筛选,发现了阳性菌株N01WA-735。首先通过形态学和化学分类学鉴定其为链霉菌属。采用有机溶剂提取、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和结晶等方法对该菌株的发酵产物进行了分离纯化,得到活性单体化合物N01WA-735E,通过对N01WA-735E的理化性质和波谱数据分析,确定其结构与文献报道的化合物BE-52440A相同。该化合物对人白细胞弹性蛋白酶有很强的抑制活性,其IC50为3.02μmol/L。该化合物对人白细胞弹性蛋白酶的抑制活性国内外未见报道。     

微生物来源的HLE抑制剂N01WA-735E的研究

人白细胞弹性蛋白酶抑制剂为筛选炎症和癌症的重要靶点。应用白细胞弹性蛋白酶抑制剂高通量的筛选模型对数千株放线菌进行筛选,发现了阳性菌株N01 WA-735。首先通过形态学和化学分类学鉴定其为链霉菌属。采用有机溶剂提取、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和结晶等方法对该菌株的发酵产物进行了分离纯化,得到活性单体化合物N01 WA-735E,通过对N01 WA-735E的理化性质和波谱数据分析,确定其结构与文献报道的化合物BE-52440A相同。该化合物对人白细胞弹性蛋白酶有很强的抑制活性,其IC50为3.02μmol/L。该化合物对人白细胞弹性蛋白酶的抑制活性国内外未见报道。     

顺丁烯二酰亚胺氮氧自由基的合成及自旋标记的血清白蛋白

本文报道制备顺丁烯二酰亚胺氮氧自由基纯品的方法。本方法为Hamilton-McConnell 法的改进。在温和条件下,该化合物以共价键形式自旋标记到血清白蛋白的硫氢基和氨基等活性基团上。为利用自旋标记顺磁共振技术研究蛋白质分子的构象,提供了必要前提。经顺丁烯二酰亚胺氮氧自由基自旋标记的牛和羊血清白蛋白,由于标记位点和标记物所处的周围环境不同,给出了两类ESR 波谱:即强固定化作用型和弱固定化作用型。用0.5mMHgCl_2预处理牛血清白蛋白,阻断其硫氢基以后再自旋标记,仅给出弱固定化型波谱。从而进一步证明强固定化作用型波谱主要来自标记在蛋白质深层中的硫氢基;弱固定化作用型波谱则来自标记在靠近蛋白质表层的非硫氢基团上。通过对羊血清白蛋白自旋标记以后,再用8M尿素破坏其氢键的试验,发现原样品中强固定化型的谱线消失,仅剩下三条弱固定化型谱线。表明自旋标记物对蛋白质构象变化的反应是十分灵敏的。文中,对两类ESR 波谱用自旋哈密尔顿理论进行了描述。